转录解旋过程需要的是RNA聚合酶还是转录因子

就转录过程中DNA双链解旋所需要的是RNA聚合酶还是转录因子进行了分析,包括转录过程中的相关概念,原核生物、真核生物转录的起始过程等,并得出原核生物转录的解旋过程是在RNA聚合酶作用下完成的,而真核生物转录是在转录因子的直接作用下实现的。     

烟草中NAC转录因子NtNAC8的克隆与序列分析

利用数据库资源和RT-PCR技术从烟草中克隆出一个NAC转录因子新成员--NtNAC8,并进一步对NtNAC8转录因子的序列进行分析;同时对该基因编码蛋白质的理化性质、蛋白质结构及其生物学功能等进行预测.结果表明,NtNAC8编码一个由301个氨基酸残基组成的相对分子质量为34.98 kD的NAC转录因子,并推测其可能...     

过表达水稻MYB转录因子OsARM1对转基因拟南芥冷冻耐受性的提高

克隆水稻MYB转录因子OsARM1全长编码序列(coding sequence,CDS)并构建植物过表达载体,转化获得过表达OsARM1的拟南芥。冷冻处理结果显示,OsARM1能明显提高转基因拟南芥的冷冻耐受性,与野生型对照处理后存活率只有37.04%相比,转基因过表达OsARM1的拟南芥存活率达到83.33%与86.11%。实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR)分析结果表明,在低温处理下OsARM1主要通过影响低温响应相关基因CBF和下游COR基因的表达水平来提高转基因拟南芥的冷冻耐受性。同时,GUS染色结果显示,OsARM1只在转基因拟南芥的叶柄和叶片输导系统中特异性表达,推测其可能通过参与脯氨酸和可溶性糖等的转运和分布来提高植物的冷冻耐受性。     

验证转录因子与靶基因启动子互作的科技实践

在验证转录因子与靶基因启动子互作的科技实践中,以双荧光素酶瞬时表达体系为载体,在成功建立烟草双荧光素酶瞬时表达体系的基础上,进一步验证了MYB转录因子与其靶基因的互作关系,有效提高了学生的抽象思维、推理判断和实践能力,使学生了解生命的精巧并激发学生的生物学学习热情。     

应用人延伸因子1α亚基启动子和人工转录激活因子提高外源基因在CHO细胞中的表达

来大志、翁少洁、于长明、齐连权、付玲、于婷、陈薇在《生物化学与生物物理进展》2004年第2期撰文指出:表达载体的设计对于提高外源基因在哺乳动物细胞中的表达量十分重要.而表达载体中最为重要的元件是启动子,一些常用病毒来源的启动子,如巨细胞病毒即早期启动子(PCMV-IE)仅在S期激活,应用这类启动子表达外源蛋白需要宿主细胞不停增殖,这对于连续持久大规模培养的宿主细胞不现实.而人延伸因子1α亚基启动子(PEF-1α)不受细胞周期限制,且启动子强度高于PCMV-IE,对于大规模外源蛋白的生产较为理想.首先构建了基于PEF-1α启动子的哺乳动物细胞表达载体pED5,在增     

调节动物脂肪酸合成的核转录因子

脂肪酸的从头合成主要发生在肝脏和脂肪组织,肝脏脂肪酸的合成受到多种因素的调节,文章重点介绍调节脂肪酸合成的核转录因子:肝脏X受体固醇调节元件结合蛋白、碳水化合物反应元件结合蛋白。     

柑橘黄龙病菌CpaB基因的原核表达和抗体制备

柑橘黄龙病菌CpaB基因编码一种菌毛组装蛋白(Flp pilus assemble protein),前期研究已经证实该蛋白具有外分泌性.在本研究中,首先构建pET30a-CpaB重组载体,然后将其转化BL21(DE3)感受态细胞,重组菌在37℃,0.2 mmol·L^(-1) IPTG诱导下,CpaB蛋白可被成功诱导表达,经过Ni-NTA亲和柱纯化后,获得纯度较高的CpaB重组蛋白,分子量为28.2 kDa,以其为抗原,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗血清;采用Western blot对多抗血清的特异性进行分析,结果显示该多抗能特异性结合纯化的CpaB蛋白;进一步使用制备好的CpaB抗血清对感染黄龙病和健康的柑橘样品进行DTBIA检测,具有较好的区分度.这些研究结果为柑橘黄龙病快速检测体系的建立提供理论参考.     

禾谷镰刀菌Homeobox转录因子FgHtf1敲除突变体基因差异表达分析

禾谷镰刀菌是引起小麦赤霉病的主要病原真菌。分生孢子在侵染过程中起关键作用。先前研究表明同源异型盒(Homeobox)转录因子FgHtf1特异调控分生孢子的产生。为明确其调控产孢的分子机制,本研究采用高通量RNA测序技术(RNA-Seq),对ΔFghtf1突变体菌株和野生型PH-1菌株进行测序,结果显示其中591个基因转录上调,549个基因下调。对这些基因进行功能预测并聚类分析发现:上下调基因中分别有约30%和22%参与新陈代谢和能量转运。运用荧光定量PCR,检测10个基因的表达,验证了RNA-Seq的结果是可靠的。运用同源重组方法敲除明显下调的基因FGSG_10565和FGSG_07629,表型分析结果显示,相比野生型,ΔFGSG_10565和ΔFGSG_07629的生长速率和产孢量均不变,说明两个基因的表达受FgHtf1调控,但功能上不直接参与分生孢子的形成。     

华裔美国科学家揭示转录因子TAF3在胚胎干细胞的分化中扮演重要角色

据生物通网2011年9月6日报道,近日美国加州大学伯克利分校的生物化学与分子生物学系钱泽南(RobertTjian,华裔)教授及其研究小组,揭示了转录因子TAF3在胚胎干细胞(ES细胞)的分化中扮演着重要角色。这一研究成果已经作为封面文章公布在最新(2011年9月2日)一期的《细胞》杂志上。     

一种在莲花瓣中实现基因瞬时表达的实验设计

基因瞬时表达是研究目标基因功能的快速、有效手段,在植物领域得到了广泛应用。为了使学生充分了解基因工程技术在植物次级代谢物研究中的应用,实现科研反哺教学,设计了植物基因瞬时表达并影响其次级代谢物质积累的综合实验。选取非模式植物莲（Nelumbo nucifera）转录因子NnWRKY70和NnMYB5为研究对象,运用分子克隆技术构建双元表达载体。利用农杆菌注射法将目标基因导入莲花瓣中实现瞬时转化,发现过表达NnWRKY70和Nn MYB5能促进莲生物碱的合成以及花瓣花青素的积累。该实验是对以往植物生物学及生理学实验内容的扩充,有利于培养和提高学生的科研思维和实践创新能力。     

甜橙CsLOB1基因克隆、表达及干涉载体构建

为探讨高感溃疡病‘纽荷尔’脐橙CsLOB1基因序列特征及其响应柑橘溃疡菌侵染表达特点,利用同源序列法从‘纽荷尔’脐橙叶片中克隆得到CsLOB1基因CDS全长并进行序列分析.实时荧光定量法检测‘纽荷尔’脐橙叶片接种溃疡菌后CsLOB1基因表达变化.结果表明,CsLOB1基因CDS序列全长714 bp,编码237个氨基酸.理化性质预测分析表明CsLOB1蛋白为亲水性蛋白质;保守域预测表明,CsLOB1蛋白含有LBD基因家族LOB保守结构域.系统进化树分析表明,‘纽荷尔’脐橙与克里曼丁橘CsLOB1蛋白同源性高于其它非柑橘类植物.实时荧光定量PCR分析显示,柑橘溃疡菌接种后,‘纽荷尔’脐橙叶片CsLOB1基因表达显著上调.采用gateway克隆技术进一步构建CsLOB1基因RNAi干涉载体,为柑橘抗溃疡病种质的创建建立基础.     

An evaluation of Early Reading First (ERF) preschool enrichment on language and literacy skills

Early Reading First (ERF) was created to address problems related to language and development among economically disadvantaged and language-minority preschool children through quality classroom processes, professional development, and instruction. More than any previous initiative, ERF specifies what early literacy instruction should look like in preschool classrooms; however, to date, scant research has examined the effectiveness of the program. In this quasi-experimental study, the effectiveness of ERF preschool enrichment was evaluated through comparison with the performance of demographically similar children from the same school district who received practice-as-usual instruction. As in previous research, ERF-enriched instruction was found to enhance acquisition of alphabet knowledge and print concepts. Unlike previous studies, however, it was also found to promote vocabulary development. Multilevel models were chosen to take into account the non-independence of students in the same classroom in testing the effects of ERF.     

重组人B淋巴细胞刺激因子原核表达初探

借助SDS－PAGE分析方法，以重组人B淋巴细胞刺激因子（rhBLyS）蛋白表达宿主菌株M15（pQE30a/rhBLyS）作为研究对象，对于用IPTG诱导的重组目的的产物的表达进行了优化研究，分析比较了诱导时间、IPTG浓度、温度等参数对重组产物表达的影响。实验结果表明，降低温度和IPTG浓度有利于增加靶蛋白的可溶性，27℃和0．075mmol/L为比较适合的表达条件。     

关于冬虫夏草对乙型肝炎疗效及对免疫性肝损伤保护作用的研究

根据近10多年的研究报导及课题组的研究结果，综述了冬虫夏草（CS）对乙型肝炎的治疗效果及对免疫性肝损伤的保护作用。试验证明，乙型肝炎患者经CS治疗后，HbeAg有较高的阴转率，ALT、AST等肝功能指标明显改善，乏力、纳差等症状也大为好转，患者外周血中的CD3、CD4、CD4/CD8均明显提高。即便发生肝硬化者，经一定疗程CS治疗后，硬化症状减轻，肝纤维化得到有效控制和减轻。对免疫性肝损伤有很好的保护作用。     

浅谈《新思维综合英语》(第三册)精读课文的语篇分析教学

本文以《新思维综合英语》第三册第一课“Arctic Adventures”——《北极探险》为例，进行了语篇分析教学，从表达完整确切意义和思想内容的语段篇章结构形式入手，分析句子之间、段落篇章之间的衔接和相关意义及逻辑思维的连贯。此方法有利于培养学生的分析、归纳、综合和推断能力，有助于“以学习者为中心”的教学活动。     

白木香资源的开发利用

从白木香[Aquilaria sinensis (Lour．)Gilg]生物学特性、化学成分、药理作用、栽培要点、组织培养、虫害防治以及开发利用的价值等几个方面进行了论述，介绍了我国白木香植物资源的状况及研究概况．     

"既A又B"、"既A也B"的异同分析

“既A又B”和“既A也B”都是表示并列关系的结构.本文在已有研究成果的基础上,以1680万字语料为基础,对“既A又B”、“既A也B”进行了形式、意义考察,以期进一步明确两个格式的异同,并在此基础上提出相关教学建议.     

鳖致病性细菌与病毒的研究

对鳖致病性细菌与病毒的研究进行评述：包括病原及其所诱发的疾病；当前颇具争议的焦点问题──细菌与病毒哪个是病鳖中主要的致病病原．并在建立致病性细菌与病毒的早期快速诊断方法方面提出一些浅见．     

主分量分析方法和二次判别分析方法应用于基因芯片数据分析

本文主要采用主分量分析方法和二次判别分析(QDA)有监督分类的方法来对基因芯片(微阵列)数据进行分析.PCA是一种提取海量的数据有效特征的有效方法.可以获得与原来基因芯片数据更为接近的成分的提取特征的效果.实验表明采用PCA方法事先对数据处理不可以提高基因芯片数据分析的准确性.得出结论可为工业应用提供科学依据.