柔嫩艾美耳球虫合肥(HF)株的分离与鉴定

取具有球虫病典型症状的病鸡盲肠内容物,用离心沉浮法收集鸡球虫卵囊,加入适量的2．5％重铬酸钾溶液,置于27℃恒温箱中培养,定时观察卵囊的发育情况,并测量卵囊的大小,再结合病鸡的临床症状和病理变化,初步鉴定为柔嫩艾关耳球虫。为获得纯种柔嫩艾美耳球虫,采用改进的单卵囊分离技术进行分离。即用2％琼脂块分离到单个卵囊后,制成单卵囊胶囊,进行雏鸡单卵囊胶囊人工感染试验,然后将收集到的柔嫩艾美耳球虫进行无球虫鸡体增殖。测量增殖后两代卵囊的大小,卵形指数等形态指标, 并进行差异显著性检验(F检验),结果差异不显著,而且第二代球虫的寄生部位和病理变化与第一代相同,鉴定分离出的球虫为柔嫩艾美耳球虫,暂定为柔嫩艾关耳球虫合肥(HF)株。     

含有Etp28基因昆虫杆状病毒表达载体的构建

以含有柔嫩艾美耳球虫（广东株）子孢子折光体抗原Etp28基因的重组质粒pGEM－T－Etp28为材料，分别构建了可表达GST／6×His－Etp28融合蛋白和Etp28非融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体质粒pAcGHLT－A－Etp28和pSXIVVI＋X3-Etp28，并探讨了两种重组转移载体质粒的特点和应用前景．     

熏蒸对柔嫩艾美球虫致病力的影响

实验用14日龄AA肉鸡40只,等分成1、2、3、4组,分别口服接种熏蒸12、24、36h和未经熏蒸处理的柔嫩艾美球虫卵囊10×104个,并于接种后第8天称重,追杀,检查病变、OPG,计算耗料、饲料转化率、平均日增重、卵囊值及病变记分。结果表明第1、4组球虫症状明显,各项指标均次于2、3组,但各组鸡OPG均较高,熏蒸消毒对柔嫩艾美球虫致病力基本上无影响．     

中草药对柔嫩艾美耳球虫卵囊孢子化的影响

为筛选有效的体外抗球虫中草药,研究了苦参、商陆等23味中草药对柔嫩艾美耳球虫卵囊孢子化的影响.将未孢子化球虫卵囊分别在质量百分浓度为25%、50%、100%的上述药物中进行培养,分别在第18h,24h,36h,48h观察球虫卵囊的孢子化率.然后洗去药物,在重铬酸钾中继续培养,分别在第18h,24h,36h观察球虫卵囊的孢子化率.结果表明:在23味中草药中,苦参等抑制效果不明显;商陆等具有较好的抑制作用,随时间的延长,球虫卵囊的孢子化率呈下降趋势,且药物浓度越高,抑制效果越好.     

家蚕核型多角体病毒p35基因的核苷酸序列分析

对家蚕核型多角体病毒苏州株（ＢｍＮＰＶｓｕ）ｐ３５基因的序列分析表明：ＢｍＮＰＶｓｕ ｐ３５编码序列为８９７ｍｔ,编码２９８ａａ。同源性分析表明：ＢｍＮＰＶｓｕ ｐ３５与ＢｍＮＰＶＴ３、ＡｃＮＰＶ 、ＳＩＮＰＶ在核苷酸水平上同源性分别为９９．５％、９５．１％、８９．３％,在氨基酸水平上的 性分别为９８．７％、８９．４％、７６．４％,显示了杆状病毒ｐ３５基因在进化上的保守性。ＢｍＮＰＶＴ３中位的Ｎ１     

斜纹夜蛾核型多角体病毒p74基因的定位和克隆

用苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＭＮＰＶ）ｐ７４基因的部分片段标记探针,通过ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔｉｎｇ将斜纹夜蛾核型多角体病毒（ＳｌＭＮＰＶ）的ｐ７４基因定位于ＸｈｏⅠ４９ｋｂ、ＥｃｏＲⅠ４４ｋｂ、ＢａｍＨⅠ３０ｋｂ片段上．通过酶切图谱分析和部分序列测定,将其ｐ７４基因精确定位．用计算机软件ＤＮＡＳＩＳ和ＰＲＯＳＩＳ对这部分ＤＮＡ序列进行分析发现其与ＡｃＭＮＰＶｐ７４基因的同源性为６９％,其可能编码多肽的氨基酸顺序与ＡｃＭＮＰＶｐ７４相应部分的同源性为６６％．     

鸭源WF01D株新城疫病毒HN蛋白基因的测序与序列分析

用鸭源WF01D株新城疫病毒接种对9-10日龄SPF鸡胚尿囊腔,成功增殖了该病毒,采用一步法RT-PCR技术扩增WF01D病毒的HN基因,获得了1条约1.8kb的特异性条带。PCR产物回收纯化后测序。测序结果表明,扩增片段大小为1844bp,含有1个1716bp的开放性阅读框,编码571个氨基酸。核苷酸同源性分析表明：WF01D与国内外其他NDV HN基因的同源性为81.2%-95.0%,其中与国内标准强毒株F48E9的同源性为84.3%,说明WF01D与国内外的传统毒株有较大变异。与Taiwan95株和NL/96株的同源性为93.8%和95.0%,说明WF01D与Taiwan95株和NL/96株亲缘关系较近,具有较高的相似性。     

鸡源NDV WF00C株F基因的测序与蛋白特性分析

用鸡源新城疫病毒凤阳分离株WF00C对9～10 日龄SPF鸡胚的尿囊腔接种,成功增殖了该病毒,采用一步法RT-PCR技术扩增WF00C病毒的F基因,获得了1条1.7kb的特异性条带.用PCR产物直接测序.测序结果表明,扩增片段大小为1782bp,含有1个1662bp的开放性阅读框,编码554个氨基酸.核苷酸同源性分析表明:WF00C株与国内外其他NDV F基因的同源性为84.8%～97.5%,其中与国内标准强毒株F48E9的同源性为87.1%,说明WF00C与国内外的传统毒株有较大变异.与Taiwan95株和J株的同源性为94.1%和97.5%,说明WF00C与Taiwan95株和J株亲缘关系较近,具有较高的相似性.F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为112Arg-Arg-Gln-Lys -Arg-Phe117, 表明为NDV的强毒株.蛋白疏水性和抗原性分析表明与标准强毒株相比没有太大的变异.     

雌激素受体α基因PvuII基因多态性与冠心病关系的meta分析(英文)

研究目的:系统评价雌激素受体α基因PvuII基因多态性与冠心病的关系。创新要点:目前关于雌激素受体α基因PvuII基因多态性(c.454-397TC)与冠心病的关系仍存在争议。因此本研究针对这一问题系统收集国内外符合纳入与排除标准的研究,通过meta分析,系统地评估雌激素受体α基因PvuII基因多态性与冠心病的关系。研究方法:针对研究问题系统检索国内外相关数据库,根据事先制定的纳入与排除标准及质量评价量表,筛选出符合标准的研究文献。利用STATA11.0和RevMan 5.2软件对纳入的21篇研究(包括9926病例和16710对照)进行定量分析。优势比(OR)值及95%置信区间(CI)用来衡量雌激素受体α基因PvuII基因多态性与冠心病的关系。重要结论:Meta分析结果提示,雌激素受体α基因ESR1 PvuII基因多态性与冠心病的关系在研究的整体人群中有重要意义。地区亚组分析显示,在亚洲人群中,雌激素受体α基因PvuII基因多态性与冠心病相关,然而这种相关性不存在于西方人群。     

鸡柔嫩艾美尔球虫早熟株选育

本试验将柔嫩艾美尔球虫凤阳株通过鸡体传代筛选早熟株,传5代后,接种鸡只,观察早熟株的致病性.选择30只15日龄健康无球虫感染鸡随机分成3组(n=1 0)(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组),Ⅰ、Ⅱ组分别口服接种等量(1×105个/只)经5代选育的早熟株和亲本株孢子化卵囊,Ⅲ组为不接种空白对照组,根据临床表现、成活率、饲料转化率、每克粪便中卵囊数(OPG)、病变指数等指标判断早熟株与亲本株致病性差异,以及与不感染对照组的差别来衡量选育结果.结果表明早熟株与亲本株、早熟株与对照组的成活率、饲料转化率、每克粪便中卵囊数、病变指数的差异不显著,说明了早熟株的致病性没有明显的降低,可能是选育代数过少所致.     

番茄（Lycopersicum esculentum）几丁质酶基因LeCHI的克隆与序列分析

根据GenBank发布的几丁质酶基因序列设计PCR引物,从叶片cDNA中克隆到了番茄几丁质酶基因,并命名为LeCHI,基因在NCBI中的登陆号为FJ849060。测序结果表明,LeCHI编码区全长为762 bp,编码253个氨基酸。RT-PCR检测表明,LeCHI基因在根、茎、叶和花蕾中均有表达。序列比对结果表明,LeCHI编码的氨基酸序列与同科的马铃薯、辣椒有较高的同源性。     

花生苹果酸脱氢酶基因的克隆及其蛋白序列分析

根据已知植物的苹果酸脱氢酶基因序列设计简并引物,采用RT-PCR技术从花生叶片中克隆得到苹果酸脱氢酶基因,命名为Ah MDH,Genbank登录号为KF499119,该基因编码区长度为1071bp,编码356个氨基酸。序列比对结果表明,Ah MDH编码蛋白与大豆、蒺藜苜蓿和豌豆等具有较高的相似性。     

主分量分析方法和二次判别分析方法应用于基因芯片数据分析

本文主要采用主分量分析方法和二次判别分析(QDA)有监督分类的方法来对基因芯片(微阵列)数据进行分析.PCA是一种提取海量的数据有效特征的有效方法.可以获得与原来基因芯片数据更为接近的成分的提取特征的效果.实验表明采用PCA方法事先对数据处理不可以提高基因芯片数据分析的准确性.得出结论可为工业应用提供科学依据.