颗粒酶A在肿瘤免疫中的功能研究

颗粒酶A(Granzyme A,Gzm A)是一类定位于活化淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞胞质的丝氨酸蛋白酶,是细胞毒性颗粒中表达丰度最高的蛋白酶之一。Gzm A能够特异性靶向人体很多重要的蛋白,如:组蛋白,维持核膜的核纤层蛋白和几种关键的DNA损伤修复蛋白(Ku70,PARP-1);激活白细胞介素-1,具有促炎活性。Gzm A激活了一种新的程序性细胞死亡途径,该途径始于线粒体,产生活性氧(ROS),导致单链DNA损伤,参与杀死敏感的靶细胞。此外,还可作为免疫检查点以及生物标志物。本文主要就Gzm A晶体结构、特异性结合蛋白种类以及在肿瘤免疫中发挥的重要功能进行综述。     

我国学者在心肌细胞DNA损伤和修复机制方面取得重要进展

<正>在国家自然科学基金项目(批准号:31671177,81630008,81790621,31521062和81370234)等资助下,北京大学分子医学研究所肖瑞平教授研究团队张岩副研究员在心脏心肌细胞DNA损伤和修复机制方面取得重要进展,相关研究成果以"CaMKII-δ9Promotes Cardiomyopathy through Disrupting UBE2T-dependent DNA Repair"(钙/钙调素依赖的蛋白激酶-δ9通过损害泛素耦联酶E2T依赖的DNA修复引起心肌病)为     

世界上“最丰富”的蛋白质——光合酶

正世界上"最丰富"的蛋白质是什么?要回答这个问题可以从不同的角度入手,如从人类自身的角度,问题的答案是:胶原蛋白。胶原蛋白是人体中最丰富的蛋白质,其含量介于25%~35%。而对于单个细胞来说,含量最丰富的蛋白质则是肌动蛋白,它被称为真核细胞的"管家蛋白"。但当我们不考虑单个细胞或某个物种时,可以说,世界上最丰富的蛋白质是植物进行光合作用时的关键酶——1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(下文简称光合酶)。     

哺乳动物霍利迪连结体解离酶被发现

在减数分裂和同源DNA修复中,会形成一个被称为霍利迪连结体的四链DNA中间体。这个结构以共价键方式连接两个DNA分子．因此必须将其拆解．才能让染色体正确分离和复制。1991年．研究人员发现．大肠杆菌中的ruvC基因的产物为细菌霍利迪连结体解离酶。不过,NTL动物相应的酶却并不好寻找．但经过17年之后．它们终于被发现了。人体中的这种酶是一种被称为GEN1的蛋白．酵母中的这种酶是其直系同源蛋白．即Yen 1。二者都是结构特异性核酶的Rad2／XPG家族的成员。     

遗传密码知多少?

<正>人和其他大多数生物的遗传信息被记录在脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)中,DNA和RNA中所含的所有基因也称基因组。DNA中每个有功能的单位被称作基因,每个基因都是由一连串单核苷酸组成。每个单核苷酸都由碱基、戊糖(即五碳糖,DNA中为脱氧核糖,RNA中为核糖)和磷酸3部分组成。碱基不同构成了不同的单核苷酸。组成DNA的碱基有腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)及胸腺嘧啶(T)。组成RNA的碱基以尿嘧啶(U)代替了胸腺嘧啶(T)。     

HPLC法测定百令片中腺苷的含量

目的:建立百令片中腺苷的含量测定方法。方法:高效液相色谱法,采用C18(250×4.6mm,5μm)色谱柱;甲醇-0.04mol/L磷酸二氢钾溶液(5:95)为流动相;流速1.0m L·min-1;检测波长260nm。结果:在5.94400μg·m L-1~59.44000μg·m L-1浓度范围内腺苷的峰面积和浓度具有良好的线性关系,R=0.99997;平均回收率为100.48%,RSD=0.95%(n=9)。结论:本方法准确、可靠、重复性好,适用于百令片的质量控制。     

骨形态发生蛋白-2治疗股骨头坏死研究进展

随着细胞组织工程学的发展,骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)越来越多的应用在骨科领域,而骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein,BMP-2)在治疗骨缺损,骨不愈合等方面的效果已经在基础实验和临床实践上均得到了证实[1-3],其作用机制可能是BMP-2可诱导间充质干细胞向软骨方向分化,并通过Smad通路及MAPK通路传导,并对骨组织的形成、生长和损伤的修复具有促进作用[4]。基于这一作用机制,越来越多的学者把研究重点放在治疗股骨头坏死领域,文章就近年来BMP-2治疗股骨头坏死研究进展。     

DNA为生命导航

1869年,年轻的瑞士医生米歇尔发现白血球细胞核内有一些复杂的物质,这就是核酸。到了1929年,科学家发现核酸有两种,一种含有核糖,称为“核糖核酸”或“RNA”;另一种含有脱氧核糖,称为“脱氧核糖核酸”或“DNA”。DNA存在于染色体上。后来人们渐渐明白,DNA含有整个生     

尿嘧啶DNA糖苷酶活性的电泳凝胶成像分析测定

尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG)是防止PCR假阳性反应的工具酶,参照限制性DNA内切酶活力测定法的原理(以完全消化DNA带型的最高稀释度为一个活性单位)和应用凝胶成像分析技术,建立了UNG酶活性的非同位素检测新方法.反应体积为20μL,底物dU ung(dU DNA)为165μg,加UNG后在适当温度下反应10min,使底物去除尿嘧啶,其AP位点经碱降解.通过琼脂糖凝胶电泳和凝胶成像分析,测定底物dU ung的残留量以测定UNG酶活性.酶活力以37℃每分钟降解1ngdU ung的酶量为一个单位,检测灵敏度为1ng,检测线性范围为0～165ng.该法简便易行、客观、精密,重复性好(CV<3%),结果显示直观.     

SV40早期启动子中原核增强子样序列的初步研究

萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体pGL2可在原核细胞中高效表达。该载体中含有SV40早期启动子及荧光素酶基因cDNA5'端总长共758bp的DNA碱基序列，经计算机分析发现，在SV40早期启动子中含有SV40基因组HindⅢB片断中一段长为49bp的DNA序列，且荧光素酶基因cDNA编码区的5'端含有一个原核细胞基因表达调控区相似序列。将pGL2中的荧光素酶基因cDNA（Luc）克隆入真核表达载体pED中，构建成pED-Luc。该载体经表达测定后，只在真核细胞中表达，在原核细胞不中表达。这说明荧光素酶基因cDNA编码区的5'端的原核细胞基因表达调控区相似序列不具表达有活性的荧光 素酶的功能。经DNA序列对比研究，认为pGL2含有的SV40基因组Hind ⅢB片段5123bp-5171bp长49bp的DNA序列可能就是Hind ⅢB片段的原核增强子功能的决定序列。     

应用组织芯片技术分析磷酸化53BP1在结肠癌中的表达及其意义

p53结合蛋白1(p53 binding protein,53BP1)是一种参与DNA损伤检查点活化和DNA损伤修复的关键蛋白之一。已知在结肠癌中,BRCA1基因的突变会使患结肠癌的风险增加,而磷酸化53BP1是其功能的表现形式。为研究磷酸化53BP1与结肠癌发生发展的关系,我们制备特异性磷酸化53BP1多克隆抗体,经RNA干扰技术、蛋白免疫共沉淀(Co-IP)、蛋白免疫印迹(WB)等实验验证抗体的特异性。随后通过免疫组织化学染色(IHC)方法对31例临床结肠癌组织标本进行染色,并结合临床病例资料进行分析。实验结果表明,磷酸化53BP1在结肠癌组织中的表达明显高于癌旁组织,且在TNM分期I-II期结肠癌患者中,磷酸化53BP1高表达病例数比例(13/16)显著高于III-IV期患者中的高表达病例数比例(7/15)(p0.05),同时磷酸化53BP1高表达病例数比例在未发生淋巴结转移和发生淋巴结转移的病例中差异显著(p0.05)。这些研究结果表明,磷酸化53BP1高表达可作为结肠癌分期(I-II期)和未发生淋巴结转移的潜在标志。     

利用正向重复片段的GUS报告基因检测DNA双链断裂引起的基因重组研究

本研究建立了一种方便快捷地检测DNA双链断裂引起的基因重组的方法。传统的检测DNA双链断裂的方法较为复杂、繁琐。因此,构建简单、快速的此类检测技术是非常必要的。本研究构建了利用正向重复片段的GUS基因载体以及引导RNA和噬菌体MS2外壳蛋白偶联限制性核酸内切酶的基因组编辑系统,在GUS基因内部DNA重复区切割DNA,导致双链断裂(double-strand breaks,DSBs),DSB经同源序列引导修复(homology-directed repair,HDR)途径,引起GUS基因重组,恢复其功能。此方法可以经过GUS染色后快速、直观地检测位点特异的DSB。通过GUS与其底物的反应,以达到半定量、直观快速检测DSB的目的。     

DNA加合物研究及在环境毒理学中的应用

致癌物在生物体内经解毒系统诱导与生物体内的DNA形成加合物, DNA加合物综合反映了生物体对致癌物的暴露、吸收、分布、代谢以及机体对DNA的修复能力,是致癌物有效作用的量度,与致癌作用直接相关。目前较多用于DNA加合物测定的方法是³²P后标记技术。DNA加合物作为一项反映人群暴露于致癌物的指标在肿瘤分子流行病学研究中得到了较好的应用,鱼与哺乳动物一样可活化致癌物形成DNA加合物,由于解毒系统不完善及DNA修复能力差而对致癌物特别敏感,因此鱼及其他水生动物的DNA加合物研究受到重视并且一直引人注目。因此,DNA加合物作为指标用于环境毒理学研究应该大力发展和建立以鱼为模式动物的实验系统来筛选潜在致癌物和检测水环境中的致癌物。     

关于n阶(n1,n2)型二重(r1,r2)-循环矩阵求逆及相乘的计算方法

循环矩阵的求逆及相乘的算法，无论在理论上还是在实际应用中都具有非常重要的意义．本文不从计算Jordan标准形式或特征值出发，而是利用矩阵乘法及逆矩阵的一些简单性质，给出了n阶(n1，n2)型二重(r1,r2)-循环矩阵求逆、两个n阶(n1，n2)型二重(r1，r2)-循环矩阵相乘的直接计算方法，推广了已有的结果,这些算法已编到C 源代码在服务器上通过，验证了这些算法是稳定的有效的,若用快速富里叶变换(FFT)计算，这些算法的时间复杂性均为O(n1n2log2n1n2)。     

大蹼铃蟾皮肤白蛋白的胰蛋白酶抑制活性研究

通过离子交换层析和凝胶过滤层析,在大蹼铃蟾(Bombina maxima)皮肤中得到其白蛋白。该蛋白有强烈抑制胰蛋白酶水解小肽底物的活性,但对其它丝氨酸蛋白酶如凝血酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶及枯草杆菌蛋白酶无抑制。它以1∶1摩尔比同胰蛋白酶形成稳定结合的复合物。经测定发现,该蛋白对温度、pH值及还原剂二硫苏糖醇的耐受性较强,三种因素对其胰蛋白酶抑制活性影响不大。说明大蹼铃蟾皮肤白蛋白具有稳定的胰蛋白酶抑制活性,可能在大蹼铃蟾防御天敌捕食的过程中发挥重要作用。     

瞄准DNA根治疾病

<正>生命的核心是遗传物质,也即脱氧核糖核酸(DNA),人的DNA包裹在细胞核中,一个人的DNA包含了其所有的生命和遗传信息。现在,研究人员已经能通过对DNA编(剪)辑来根治人的疾病,甚至可能操控生命。编辑DNA的利器编辑DNA需要工具,这些工具实际上就是一些蛋白酶,它们可以在特定的位置切割和编辑基因,因此也可以视它们为基因剪刀。现在,最厉害的基因剪刀或基因编辑器是CRIS-     

利用大脑内神经元调控抗衰老因子的化学信息

人类的大脑细胞和神经组织对活性因子转化作用的化学物质DNA复制和磷化信息激活酶活化细胞各种结构的变化,涉及体内的密切联系。人到35岁左右开始呈现体内衰老,随着年龄的增长而降低DNA细胞的数量。为了进一步探索延缓衰老逆转生化反应机理,通过人体物质新陈代谢,实现自我更新皮肤,自身修复完     

1.6-二磷酸果糖治疗肝炎后肝硬变失代偿疗效观察

尝试应用 1 6-二磷酸果糖治疗 60例肝炎后肝硬化失代偿患者进行疗效观察。治疗组 60例 ,男 52例 ,女 8例 ,年龄 3 5～ 63岁 (平均 48 4岁 )。每例患者每日 1 6-二磷酸果糖 1 0g,连用 3 0天为一个疗程。结果表明 1 6-二磷酸果糖能够有效地控制和缓解肝炎后肝硬变失代偿患者的临床症状 ,促进腹水、胸水消退 ,感染减轻 ,减少肝性脑病及上消化道出血的发生机率 ,对于改善肝功能 ,特别是在消除乏力、纳差、腹胀、失眠等症状方面明显优于对照组 (P <0 0 5)。     

资讯

正饮酒致癌的分子机制酒精位列世界卫生组织国际癌症研究中心(IARC)的1类致癌物清单上,但饮酒究竟为何会致癌,此前并没有从分子机制上证明两者间的关联。一项新研究首次发现,酒精可以损伤干细胞的DNA,从而提高饮酒者罹患癌症的风险。酒精的初级代谢产物乙醛会导致小鼠造血干细胞DNA双链断裂。虽然部分DNA断裂后被修复,但是残留损害仍影响     

翟中和

细胞生物学家。江苏溧阳人。1 956年毕业于苏联列宁格勒大学生物学系。北京大学生物学系教授。在我国较早建立细胞超微结构技术；首次研制成鸭瘟细胞疫苗；对我国20多种重要家畜(禽)的传染病进行了病毒分离、鉴定与分类，进行了病毒形态及其在细胞内的发生规律研究；在阐述染色体端粒、DNA复制、基因转录活性、RNA分子加工和病毒装配与核骨架关系的研究中，取得了系统的创新性的结果；在国际上首次证实原始真核细胞存在染色体骨架与核骨架，在植物细胞与原始真核细胞中存在角蛋白中间纤维；在国内首次建立了非细胞体系核重建的实验模式，证明核骨架与核纤层在重建核形成过程中起重要作用，体外核装配核小体的构建并非必须。他领导科研小组从1 9 96年起进行“细胞程序性死亡”方面的研究，是这一领域国内最权威的专家之一。