加样时间不同对丙型肝炎病毒抗体测定结果的影响

目前,随着EIA、RIA、PCR等方法在临床检验中的应用,使HCV的诊断方法不断完善。但酶联免疫测定试剂盒的质量还存在着一定的不足。本文从加样时间先后的角度,观察了酶联免疫测定试剂盒的稳定性。结果显示,随加样时间先后,阳性血清抗-HCV的OD值有显著性变化(P<0.05)。     

梅毒螺旋体抗体诊断试剂的临床应用

目的:同时用评价试剂和参比试剂检测436例血清样本,探讨评价试剂与参比试剂检测结果的符合率.方法:评价试剂采用化学发光法,参比试剂采用双抗原夹心酶联免疫吸附试验;并通过卡方检验来判断两试剂盒间有无显著差异.结果:评价试剂和参比试剂阳性符合率为98.25%,阴性符合率为99.47%.两种试剂通过卡方检验比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:评价试剂与参比试剂的检测结果具有很好的一致性,评价试剂可以用于梅毒感染的辅助诊断.     

前S1抗原在乙型肝炎检测中的临床意义

对236例乙肝表面抗原(HBs Ag)阳性患者血清标本的前S1抗原(Pre S1-Ag)及肝功能(HBV-DNA、ALT、AST和γ-GT)同时检测。前S1抗原阳性与HBV-DNA阳性高度一致(Kappa=0.65,P<0.05)。前S1抗原阴性组和阳性组ALT、AST和γ-GT进行比较,有显著性差别(P<0.05)。因与乙型肝炎的检测结果(ALT、AST及γ-GT)密切相关,前S1抗原在乙肝的诊断及预后方面有重要的临床意义。     

ELISA操作及常见问题分析

ELISA（酶联免疫吸附测定法）检测结果是否准确可靠,除了有优质的试剂,良好的仪器,正确的操作在ELISA检测中是非常重要的一步.标本采集和保存、准确加样、温浴的温度与时间、洗涤液的浓度,均可直接影响到ELISA检测结果的准确性.对本底及假阳性产生原因的正确分析,正确对临界（CUT OFF）值附近的血清处理,对ELISA检测结果能否准确报告具有非常重要的临床意义.     

热加工食品中α-乳白蛋白双抗夹心酶联免疫分析法的建立

建立热加工食品中α-乳球蛋白的双抗夹心酶联免疫检测检测方法。以热处理的α-乳白蛋白为抗原,制备抗α-乳白蛋白的高特异性单克隆抗体,并将以此蛋白作为包被抗体,构建双抗夹心ELISA方法。本方法标准曲线的IC50为360 ng/mL,方法的灵敏度为10 ng/mL。以尿素作为提取液可以大大提高热加工食品中α-乳白蛋白的提取率,添加回收率在76%~89%之间,相对标准偏差小于15%。该方法能准确地识别热加工的奶制品,避免了传统免疫方法在热加工奶制品检测上的假阴性。     

丙肝病毒核心抗原与丙肝病毒抗体检测的比较

目的：了解丙肝病毒核心抗原检测的意义.方法：采用HCV游离核心抗原试剂盒,对来自入院前或手术前筛查的180例临床样本和24例丙肝或疑似丙肝患者的血清样本进行HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录多聚酶链反应（RT-RNA）证实.结果：180例筛查样本HCV-Ab均为阴性,HCV-cAg阳性2例,其中RT-RNA阳性1例;24例HCV-Ab阳性的样本检出HCV-cAg阳性12例,RT-RNA阳性14例.HCV-cAg与RT-RNA符合率为85.71%（12/14）.结论：HCV核心抗原检出时间早于抗体,HCV-cAg检测试剂盒可作为HCV抗体检测的补充试剂.     

用Dot-ELISA法检测囊虫病患者血清特异性IgG4

应用植物血凝素亲合层析技术所获得的纯化抗原进行斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA).用该方法对146例囊虫病患者、40例其它寄生虫感染者及36例健康人IgG4亚型的检测.结果表明,除3例囊虫病人未能检出外,143例均为阳性.其它寄生虫感及健康人均为阴性.该试验方法敏感性为98％,特异性为100％.结论:IgG4可作为囊虫病免疫诊断指标之一.     

临床ELISA检测干扰因素分析及处理

ELISA即酶联免疫吸附试验,是常用于各种抗原和抗体的测定.其操作简便、快速、消耗成本低,被临床实验室广泛用于传染病、肿瘤等的筛查和诊断.但ELISA测定中的干扰因素较多,而且操作中有一定的技术要求,在测定中常出现检测结果重复性较差或假阴性、 假阳性结果.因此,学会分析和处理引起ELISA测定误差的干扰因素就尤为重要.     

抗雌激素多克隆抗体的制备及效价鉴定

为了快速安全地检测动物性食品中是否含有过高浓度雌激素,本研究将半抗原雌二醇(Estradiol, E₂)合成为雌二醇-3-羧甲基醚(E₂-3-CME),再通过碳二亚胺(EDC)法与牛血清白蛋白(BSA)结合,合成完全抗原(E₂-BSA).将1 mg/只的E₂-BSA免疫雌性家兔,制备出抗雌激素的抗体.通过用酶联免疫吸附(Elisa)实验对产生的抗体进行效价鉴定.实验结果表明,第三次免疫后E₂-BSA产生的抗体光密度值(OD)最高,且与对照组,免疫一次和两次产生的抗体的OD值均具有明显差异,显示通过抗原免疫三次的家兔产生的抗体效价最高,可为后期通过此方法制备抗体和Elisa试剂盒奠定基础.     

改良肥达氏方法

随着对肥达氏反应认识程度的加深 ,假阳性和假阴性的报道也逐渐增多 ,关于其对伤寒、副伤寒是否具有诊断意义出现争议[1] .其实 ,有关伤寒、副伤寒的检测 ,新近的血清酶法 ,如郑州博赛生物技术研究所提供的伤寒杆菌抗原酶免检测 ,只能检测伤寒杆菌和Ｈ抗原 ,对副伤寒易漏诊 ,而传统的肥达氏方法目前仍被认为准确、特异性强、快速、简便、实用的方法[2 ] .只是传统的肥达氏方法受外界因素影响较多 .此地周边地区是伤寒、副伤寒的高发地区 ,为此 ,特对传统方法稍作改良 .1　实验原理用已知伤寒沙门氏菌Ｈ、Ｏ抗原及甲、乙、丙三种副伤寒沙门氏…     

加味保元汤对束缚应激大鼠血清皮质酮浓度的影响

为了研究加味保元汤对束缚应激大鼠血清皮质酮浓度的影响,将30只SD大鼠随机等分为正常对照组、模型组、加味保元汤组。模型组、加味保元汤组大鼠每日束缚1次,连续3周。加味保元汤组束缚前给予大鼠200 mg/kg体重加味保元汤水提取物灌胃。采用酶联免疫法检测各组大鼠血清皮质酮浓度。结果显示大鼠血清皮质酮浓度:正常对照组(706.28540±98.64284)ng/m L,低于模型组(858.31980±55.87683)ng/m L,差异具有显著性(P<0.01),加味保元汤组(746.67220±61.79915)ng/m L与正常对照组(706.28540±98.64284)ng/m L比较,差异无显著性(P>0.05),与模型组(858.31980±55.87683)ng/m L比较,差异具有显著性(P<0.05)。结果提示加味保元汤对束缚应激大鼠血清皮质酮浓度升高具有调节作用。     

简述抗原抗体的体外检测技术

结合教材对抗原抗体检测的描述,从酶联免疫吸附试验、免疫层析技术、免疫印迹技术、化学发光免疫分析以及免疫PCR技术5个方面分析了几种常见的抗原抗体体外检测技术,提出相应的教学建议,拓宽学生的知识视野。     

乙肝患者血浆MBL水平分析

目的:检测健康人及乙肝患者血浆中甘露聚糖结合凝集素(MBL)水平,比较差异并评价其非特异性免疫功能.方法:采用MBL ELISA试剂盒检测健康人及乙肝患者血浆中甘露聚糖结合凝集素含量.结果:42位HBV-DNA阳性患者血浆MBL的含量为5.414±2.658mg/L,52位HBV-DNA阴性患者血浆MBL的含量为4.949±2.219mg/L,40位健康人血浆MBL的含量为2.874±1.717mg/L,HBV-DNA阳性患者与HBV-DNA阴性患者血浆MBL的含量差异无统计学意义(t=0.761,P>0.05),HBV-DNA阳性患者与健康人血浆MBL的含量差异显著(t=5.810,P<0.01),HBV-DNA阴性患者与健康人血浆MBL的含量差异显著(t=4.786,P<0.01).结论:乙肝患者血浆MBL 水平较健康人提高,说明机体分泌急性时相蛋白MBL参与机体免疫防御及监视.     

甲胎蛋白(AFP)胶体金检测试纸条的研制

目的:研制一种简便、快速、灵敏的检测血清中甲胎蛋白(AFP)的试剂.方法:采用胶体金免疫层析法,用胶体金标记AFP单克隆抗体,用另一株AFP单抗包被硝酸纤维素膜,制成AFP胶体金检测试纸条.结果:用国家标准品进行检测,该试剂灵敏度达到20ng/ml;对157份血清样本进行检测,结果与ELISA法相比总符合率达99%.结论:AFP胶体金检测试纸条简便快速、结果准确,能满足临床检测需要.     

改进血型实验方法,培养学生综合能力

改进血型定性实验为综合性实验,试制血型诊断抗体和诊断红细胞悬液,满足中学生血型实验试剂需求。自正常A、B型血样分离血清或红细胞,玻片法定性倍比稀释定量检测抗A、抗B,滤菌后冷藏;生理盐水洗涤红细胞,离心沉淀,冷藏。用自制诊断抗体和诊断红细胞悬液与标准试剂对比检测样本60例。自制诊断抗体与诊断红细胞悬液的诊断结果与标准试剂无显著性差异。大学生自制诊断抗体与诊断红细胞悬液基本达到生物制品诊断试剂的标准,大大降低学校用血型试剂成本,也有利于培养大学生综合技能。     

三种不同包被抗原用于RF的测定与比较

分别用人、兔、鼠IgG作包被抗原,检测244份血清标本(类风湿性关节炎72份,系统性红斑狼疮74份,慢性肾病50份,其它内科疾病33份,健康体检者15份)。类风湿因子RF,发现以AgHIgG作为包被抗原时,方法最敏感,AgRIgG次之,而AgMIgG最差。以AgRIgG为包被抗原(间接法)与以AgHIgG、AgRIgG为包被抗原(双抗原夹心法)所测RF有较好一致性,P分别为0.01,P<0.05,P<0.01。     

间接血凝试验(IHA)检测肝片形吸虫病的研究

以肝片形吸虫成虫虫体制备的纯化抗原为诊断液,采用间接血凝试验(IHA)检测了40只山羊和160头牛血清,并与粪便检查法作平行试验。结果显示肝片形吸虫阳性检出率,IHA法为12.00%,粪便检查法为9.00%。与粪检结果相比,总的血清阳性符合率为62.50%,其中牛为57.14%,山羊为100.00%;总的血清阴性符合率为98.29%,其中牛为97.85%,山羊为100.00%。结论:IHA适合于大规模的血清流行病学调查,可以快速的筛选出大量的阴性样品。     

α-硫辛酸对热应激小鼠睾酮分泌失调的保护作用

目的:研究α-硫辛酸对热应激引起小鼠睾酮分泌失调的保护作用.方法:将性成熟雄性SPF昆明小鼠60只,随机分为3组,即对照组、热应激组和α-硫辛酸+热应激处理组.分别采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组小鼠血清睾酮含量,石蜡切片免疫组化染色法(IHC)分析各组小鼠非折叠蛋白反应信号通路的关键信号转导调节分子肌醇需求酶1(IRE1)在睾丸中的表达定位,以及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠IRE1和促凋亡基因半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白表达量变化.结果:与对照组相比,热应激组的血清睾酮含量显著下降(P<0.01),睾丸组织中IRE1和Caspase-3蛋白表达量显著增加(P<0.01,P<0.01);与热应激组相比,α-硫辛酸+热应激处理组的血清睾酮含量显著升高(P<0.05),在睾丸生精小管和间质细胞中均可观察到IRE1蛋白的阳性免疫染色,但IRE1蛋白阳性细胞数量显著减少(P<0.05),IRE1和Caspase-3的蛋白表达量均显著降低(P<0.05,P<0.05).结论:热应激能够抑制小鼠睾丸睾酮的分泌,降低血清睾酮的含量;在本试验条件下,添加60 mg/(kg·d)的α-硫辛酸能够有效增加热应激状态下小鼠的血清睾酮含量,其发挥保护作用的机制可能与α-硫辛酸抑制IRE1介导的非折叠蛋白反应信号通路激活、降低凋亡促进基因Caspase-3的蛋白表达量有关.     

癌胚抗原(CEA)胶体金检测试纸条的研制

目的:研制一种简便、快速、灵敏的检测血清中癌胚抗原(CEA)的试剂.方法:采用胶体金免疫层析法,用胶体金标记CEA单克隆抗体,用另一株CEA单克隆抗体包被硝酸纤维素膜,应用双抗体夹心的原理,制成胶体金检测试纸条.结果:用国家标准品进行检测,该试剂灵敏度达到5ng/ ml;对165份临床病人血清进行检测,结果与ELIsA法相比总符合率为99.1%.结论:癌胚抗原(CEA)胶体金检测试纸条简便快速,结果准确,能满足急诊检验的需要,具有临床推广应用价值.     

脑卒中患者血清sIL-2R水平的变化及其在预测继发肺部感染中的诊断价值

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测了60例脑卒中患者血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平,结果发现:脑卒中急性期血清sIL-2R水平显著高于对照组(P<0.001),而在其后发生肺部感染的患者显著高于非感染患者,提示脑卒中患者急性期免疫功能低下,sIL-2R在预测脑卒中后肺部感染中有一定的诊断价值。