虫媒登革病毒的研究——Ⅱ.登革病毒非结构蛋白NS1的纯化、鉴定及其在临床检测应用

本文从纯化Den2 NS1,Mab入手,自制了Mab亲和层析系统,从感染Den2的细胞膜中,分离提取了天然的Den 2 NS1双体,比较其NGC株与我国地方株(H-87)NS1的理化性质及组成,并对某些重要的生物学性质进行了综合性研究。同时,利用上述研究结果建立了检测DF病人血清特异NS1抗体的新方法,探索其协助临床诊断及研究的可能性。     

膜法分离大豆蛋白中试工艺的优化研究

对超滤膜法分离大豆蛋白的中试工艺和膜污染的清洗进行了系统的优化研究。超滤膜浓缩分离大豆蛋白的优化工艺条件为：膜的截留分子量为10000，超滤温度50℃，超滤pH6-7，超滤压力0．4-0．5MPa，截留液固形物终点浓度应控制在14％(质量分数)以内。超滤膜污染的清洗优化工艺条件为：纯水清洗10min后，用pH8．0的0.1g／L alcalase碱性内切酶清洗30min，再用0.3mol／L NaOH清洗30min，最后用纯水清洗至pH中性，清洗温度50℃．压力0.3MPa。     

亲和色谱法从融合蛋白GST-IL-6中纯化重组人白细胞介素-6

研究用亲和融合谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)的方法纯化重组人白细胞介素 6(IL 6)的发酵和纯化工艺 ,使用含有质粒pHZl818的E .coliJMl0 9在 2XYT培养基中进行发酵表达 ,IL 6表达为与谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)融合的融合蛋白GST IL 6.融合蛋白存在可溶的活性蛋白和不可溶的包含体两种形式 ,此包含体无活性且无法复性 ,无法用亲和层析回收 ,通过实验优化摇床发酵的诱导温度和转速 ,以增加可溶融合蛋白的表达 .菌体超声破碎液后 ,上清液用作亲和柱层析 ,可将融合蛋白提纯至 80 00 ,每升发酵液可得 10mg融合蛋白 ,用凝血酶裂解处理 6h ,亲和标志物GST被特异性切除 ,裂解得到的IL 6用离子交换柱层析可纯化至 95 00 ,MTT法测得纯化的IL 6生物学活性为 1.0 2× 10 8IU/mg .