用包埋脱水法冰冻保存两种硅藻--预培养对包埋脱水法冰冻保存两种硅藻存活率的影响

采用包埋脱水法冰冻保存牟氏角刺藻（Chaetoceros muelleri）、小新月菱形藻（Nitzschia closterium minutissimai），探讨了预培养对两种硅藻存活率的影响．结果表明，用0．6M的蔗糖预培养时，牟氏角刺藻冰冻后的存活率有提高，最大可提高7．2％．但预培养对小新月菱形藻的存活率没有明显提高．     

一品红离体培养中2，4—D对诱导芽分化的影响

由大戟科大戟属多年生灌木一品红（Euphorbia pulcherrima willd）幼叶诱导形成的愈伤组织，在MS＋NAA0．5mg.L^-1（以下单位相同）的培养基上培养10－15d后的愈伤组织，在光照下植于MS＋ZT1．0＋NAA0．1培养基上培养，芽分化为66．4％。愈伤组织先在MS＋2，4－D1．0的培养基上预培养20d，再转入MS＋ZT1．0＋NAA0．1的培养基上培养，芽分化率明显提高，分化率为89．3％，但是在仅有2，4－D的培养基上培养未见芽形成。     

植物生长调节物质对玉米根尖愈伤组织培养的影响

以玉米根尖为实验材料，研究不同种类的生长素和细胞分裂素在不同浓度及不同配比下，对愈伤组织培养的影响．通过本研究得出，植物生长调节物质是影响玉米离体根尖愈伤组织培养的重要因素，不同激素种类及不同浓度配比的效果是不一样的．对玉米晴3幼根根尖愈伤组织的培养，2.4-D 2mg／L与BA 1mg／L搭配，效果最好；对玉米大黄幼根根尖愈伤组织的培养，2，4-D 2 mg／L与KT 0．5 mg／L搭配，效果最好．     

体外诱导生成树突状细胞的成熟度和激活性研究

目的：探讨人外周血单核细胞体外培养树突状细胞（dendritic cell，DE）的成熟度和激活性。方法：从健康成人外周血分离单核细胞（PBM）．加入粒单系集落刺激因子（GM—CSF）1000U／ml、重组白细胞介素-4（IL-4）500U／ml．体外培养7d。然后加入肿瘤坏死因子α（TNF-α）100ng／ml，体外培养3d。培养流式细胞仪分别测定两次DC的主要组织相溶性复合体（MHC）-Ⅱ类分子和协同刺激分子，分析其成熟度和激活度。结果：PBM经GM—CSF和IL-4诱导培养7d后，细胞成簇，表型为CD8322．6％、CD8655．5％、CD11c36．1％、CD643．2％、人类白细胞抗原（HLA）-DR13．4％；加入TNF-α培养3d后，细胞表型为CD8381．5％、CD8699．3％、CD11c98，8％、CD643．4％、人类白细胞抗原（HLA）-DR83．3％。结论：GM-CSF和IL-4诱导培养PBM7d，可获得大量不成熟DC，该体系有利于DC扩增，加入TNF-α继续培养3d后．DC成熟度高，激活性好。     

除虫菊愈伤组织的诱导与继代培养

诱导除虫菊愈伤组织，结果显示：除虫菊愈伤组织从第8d开始迅速生长，20d达到最大生长量；并对除虫菊愈伤组织继代培养条件进行了探讨。     

2，4-D对香蕉胚性愈伤组织增殖的影响

将香蕉胚性愈伤组织为起始材料,研究了2,4-D对香蕉胚性愈伤组织增殖生长的影响．结果表明：2,4-D的浓度为2mg／L时,香蕉胚性愈伤组织生长迅速,增殖倍数最高,培养30d后,胚性愈伤组织生长量达到16．1g．且形态特征和生长状态最好,颜色鲜黄、柔软、颗粒大小均衡、易分散,是建立ECS的理想起始材料．     

猪耳皮肤组织冷藏后成纤维细胞的特性变化

目的:本试验旨在探究猪耳皮肤组织块在4℃冷藏条件下保存后,考察其成纤维细胞的细胞活力、细胞周期及细胞骨架等特性变化。方法:采集猪耳皮肤组织,分别冷藏保存2、4、7d后,进行成纤维细胞分离培养,同时设立新鲜组织块对照组,观察组织块原代细胞培养开始贴壁以及80%汇合的时间,再传至第3代,MTT检测各组细胞的活力,流式细胞仪检测细胞周期,免疫荧光染色检测细胞骨架的变化。结果:与对照组相比,各保存组成纤维细胞经组织原代培养后开始贴壁和80%汇合时间滞后,细胞形态都良好;保存7d的细胞活力与对照组相比显著性降低;保存4d和7d的G0/G1期细胞显著性增加,保存7d的S期细胞显著性降低;各组细胞具有良好的骨架系统,各给药组微管蛋白的荧光强度与对照组也无显著差异。结论:猪耳缘组织块在4℃保存后,经原代培养和继代培养,可获得具有正常增殖活力和细胞特性的成纤维细胞。     

雷公藤愈伤组织诱导与悬浮培养不定芽诱导

以雷公藤茎段为材料,进行了细胞悬浮培养及植株再生诱导的研究.结果表明:愈伤组织诱导培养实验中MS+2,4-D2mg·L-1+KT1.5mg·L-1+NAA0.02 mg·L-1这个处理组中对愈伤组织的诱导培养较为合适,将获得的愈伤组织转置于1/2MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1液体培养基中,黑暗振荡培养,建立细胞悬浮培养体系,更换6次培养液后,分化出芽:分化芽诱导生根后形成植株.     

贡蕉胚性细胞悬浮培养过程中重要生长参数的研究

以贡蕉未成熟雄花序来源的胚性愈伤组织为材料建立了贡蕉胚性细胞悬浮系，测定其培养过程中培养基MII的蔗糖浓度、NO3^-浓度、磷浓度等参数在培养过程中的变化动态，并就蔗糖浓度对贡蕉体胚发生的影响做了研究．结果表明，在培养周期内，蔗糖在15d内完全消耗，NO3^-在培养周期结束时还保持较高水平含量，磷在培养第10d基本完全消耗；在培养周期内，当培养基MII蔗糖浓度为4．5％～6％时，贡蕉悬浮细胞增殖量最大；在培养基MIII蔗糖浓度为4．5％时，体胚萌发频率最高．     

密叶罗勒茎尖组织培养研究

以密叶罗勒的茎尖为外植体,以期筛选出诱导愈伤组织分化和丛生芽生根的最佳培养基。同时研究了密叶罗勒组织培养中材料的消毒时间对消毒效果的影响。试验结果表明,培养基MS＋6-BA5．0mg/L＋NAA0．1mg/L是愈伤组织诱导分化相对较好的培养基;培养基MS＋6-BA0．3mg/L＋NAA0．6mg／L是罗勒生根培养较好的培养基。在以75％的酒精消毒30秒后,用0．1％的升汞消毒2min,对试验材料的消毒效果相对较好。     

剑叶龙血树愈伤组织的诱导及其增殖培养研究

以西双版纳可提取药用活性成分“血竭”的剑叶龙血树为材料,进行愈伤组织的诱导及增殖培养,结果显示：外植体的消毒侧芽以75％乙醇浸泡2min＋0．1％升汞浸泡8min,花蕾以75％乙醇浸泡1．5min＋0．1％升汞浸泡8min,叶片以75％乙醇浸泡3min＋0．1％升汞浸泡12min效果较好;愈伤组织诱导以花蕾为外植体效果较好,且诱导与增殖的培养基为B5＋2．0mg/L NAA＋0．5mg／L6-BA．     

非洲菊工厂化育苗技术研究

以非洲萄幼嫩花托为外植体，以MS为基本培养基，添加不同浓度6．BA、IBA、GA等进行愈伤组织诱导、不定芽分化、照代增殖、生根培养和过渡炼苗。试验表明：采用MS＋6-BA2．0-5．0mg/L（单住下同）＋IBA0．25-0．5培养基，愈伤诱导率在60％以上；采用MS＋6-BA4．0＋IBA0．25＋GA0．5-2．0培养基对不定芽的生长度增殖效果好。增殖率可达13．5；采用1／2MS＋NAA0．1或IBA0．1-0．5或IAA0．5-1．0培养基，20d生根率达100％；在蛭石：珍珠岩：泥炭=1：1：1基质中驯苗。成活率可达95％以上。     

重组猪胰蛋白酶冻干制剂稳定性研究及在细胞培养中的应用

目的 筛选重组猪胰蛋白酶(rPT)冻干保护剂和保存方法,及配制细胞消化液的稳定性及其应用.方法 在rPT酶液中添加不同浓度不同种类的冻干保护剂,比较冷冻干燥后的活性保留率,并从赋型性、色泽度、溶解性方面评价冻干保护剂的作用;rPT酶液经过无菌过滤处理,内毒素含量检测合格后,冻干.然后配制成细胞消化液,优化细胞消化液组成,将细胞消化液应用于细胞培养.结果 添加3％甘露醇和3％海藻糖的rPT冻干品的酶活性保留率分别为101％和86.5％;用PBS缓冲液配制细胞消化液(含有0.01％ EDTA)消化贴壁细胞的综合效果最好,且保存在-20℃时稳定性较好.结论 从冻干后酶活性保留率和冻干品外观评价,3％甘露醇可作为rPT冻干过程中的最佳保护剂;rPT细胞消化液应用在细胞培养中的成功,证明rPT可以替代提取的猪/牛胰蛋白酶使用,消除了动物源性病毒等外源因子的污染.     

成年大鼠心肌细胞分离方法

目的：探讨三种分离成年大鼠心肌细胞的方法。方法：分别应用酶消化法（0．1％的胰蛋白酶和0．1%胶原酶依次消化）、程序冷冻后机械分离法（4℃30min，-20℃30min，-80℃30min，-196℃冻存）、酒精和多聚甲醛固定后机械分离法分离心肌组织获取单个心肌细胞悬液。光镜观察，结合形态学和台盼蓝染色评价心肌细胞。结果：用三种方法新分离的活性心肌细胞比率约70%～80%、杆状、横纹清晰。结论：三种方法均可以对成年大鼠心肌细胞进行良好的分离。     

榛子的立体培养及紫杉醇的提取

这篇章着重比较分析了榛子的芽和幼茎愈伤组织中紫杉醇的合成能力。用高效液相色谱仪测定榛子，结果显示芽比幼茎含量更高。用2．0mg/L BA和1．4mg/C LNAA诱导幼芽，8天后的愈伤组织以100％的速度感应。较好的培养愈伤组织的方法是用0．5mg/L2，4-D、1．0mg/L NAA和0．5mg/L KT补充B5培养基。测得愈伤组织的生长速度和紫杉醇的含量分别是7．74g／L和0．13％。     

一品红离体培养中2,4-D对诱导芽分化的影响

由大戟科大戟属多年生灌木一品红 (Euphorbiapulcherrimawilld)幼叶诱导形成的愈伤组织 ,在MS +NAA 0 .5mg .L-1(以下单位相同 )的培养基上培养 10— 15d后的愈伤组织 ,在光照下植于MS +ZT1.0 +NAA0 .1培养基上培养 ,芽分化率为 6 6 4 %。愈伤组织先在MS +2 ,4 -D1.0的培养基上预培养 2 0d ,再转入MS +ZT1.0 +NAA0 .1的培养基上培养 ,芽分化率明显提高 ,分化率为 89 3% ,但是在仅有 2 ,4 -D的培养基上培养未见芽形成     

菘蓝组培过程中细胞组织学观察

以菘蓝试管苗幼叶为外植体,MS 6-BA0.5mg·L~(-1) NAA0.1mg·L~(-1)为愈伤组织培养基,分化培养基为MS 6-BA2mg·L~(-1) NAA0.2mg·L~(-1)。观察黄色正常愈伤组织和绿色水浸状愈伤组织在组织细胞学上的特性及由菘蓝愈伤组织分化不定芽和不定根的过程,得出:由菘蓝愈伤组织上分化的不定芽起源于愈伤组织的表层细胞,叶原基与原体-原套同时发生。不定芽的起源为外起源。不定根起源于维管束外薄壁细胞处,根原基向外需穿透皮层,突出愈伤组织表面,才能达到肉眼可见的程度。不定根的起源为内起源。     

冬凌草细胞的悬浮培养研究

以冬凌草愈伤组织为实验材料,研究了培养基组分、接种量等培养条件对冬凌草细胞悬浮培养的影响,结果表明MS基本培养基附加2,4-D 1.0 mg/L,NAA 0.5 mg/L,Vc 0.1 mg/L,30 g/L蔗糖为最佳培养基。同时选择适宜的接种量和合适的摇床转速,能够建立起良好的冬凌草细胞悬浮体系。     

薄荷叶片愈伤组织的诱导与增殖

以薄荷（Mentha haplocalyx Briq）幼嫩叶片为外植体，采用正交设计L9（3^3）考察6-BA，NAA，2，4-D3种植物生长调节物质对叶片愈伤组织诱导的影响，实验结果表明薄荷叶片愈伤组织诱导最佳培养基为MS＋6—BA10mg／L＋NAA1．0mg／L＋2，4-D0.5mg／L＋蔗糖30g／L．在此培养基上研究不同培养条件对愈伤组织增殖效应的影响，结果表明薄荷愈伤组织继代增殖适合且经济的培养条件为蔗糖20g／L，液体浅层静置培养．     

朋娜、纽贺尔脐橙胚珠离体培养珠心苗法的研究

以花后七周的朋娜、纽贺尔脐橙品种的幼果作为实验材料,挑取胚珠进行离休培养,在MT培养基上分别附加麦芽汁（2ml／L）,6－BA（5mg／L）和麦芽汁＋6－BA（2ml／L,5mgL）诱导愈伤组织及胚状体,获得21．3％（20．7％－21．3％,对照15％）（朋娜）18．1％（6．2％－18．1％,对照12．1％）（纽贺尔）的胚状体,试验结果显示附加成份能促进胚状体生成。而且胚状体及愈伤组织,在附加NAA（0．5mg／L）＋BA（2ml／L）的MT培养基上,能较好地诱导多丛芽。多丛芽可在固体培养基上扦插生根,用权壳、积极试管苗为砧木进行嫁接成活率可达84．4％－91．9％,是敦好的方法。同时在培养基中加入AgNO3（5mg／L）,多次继代培养,能筛选出胚性愈伤组织。