甲胎蛋白(AFP)胶体金检测试纸条的研制

目的:研制一种简便、快速、灵敏的检测血清中甲胎蛋白(AFP)的试剂.方法:采用胶体金免疫层析法,用胶体金标记AFP单克隆抗体,用另一株AFP单抗包被硝酸纤维素膜,制成AFP胶体金检测试纸条.结果:用国家标准品进行检测,该试剂灵敏度达到20ng/ml;对157份血清样本进行检测,结果与ELISA法相比总符合率达99%.结论:AFP胶体金检测试纸条简便快速、结果准确,能满足临床检测需要.     

癌胚抗原(CEA)胶体金检测试纸条的研制

目的:研制一种简便、快速、灵敏的检测血清中癌胚抗原(CEA)的试剂.方法:采用胶体金免疫层析法,用胶体金标记CEA单克隆抗体,用另一株CEA单克隆抗体包被硝酸纤维素膜,应用双抗体夹心的原理,制成胶体金检测试纸条.结果:用国家标准品进行检测,该试剂灵敏度达到5ng/ ml;对165份临床病人血清进行检测,结果与ELIsA法相比总符合率为99.1%.结论:癌胚抗原(CEA)胶体金检测试纸条简便快速,结果准确,能满足急诊检验的需要,具有临床推广应用价值.     

赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮二联定量胶体金免疫层析试纸条的制备及应用（英文）

目的:优化建立二联胶体金免疫层析试纸条,实现对玉米、面粉和饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的同时快速定量检测。创新点:采用纳米金颗粒标记真菌毒素单克隆抗体,基于竞争反应模式,通过对金颗粒尺寸、免疫层析相关组成材料及缓冲液配方的系列优化,同时借助手持式信号读取装备,实现对谷物和饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的同时定量检测。该方法简单、快速且成本低,与液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)一致性良好,便于基层单位的推广使用。方法:采用柠檬酸钠还原法制备纳米金颗粒并标记获得金标抗体。通过在基于竞争反应的免疫层析检测体系中,同时设置两条检测线(T1、T2)以实现两种毒素的同时检测,最终采用金标信号读数仪实现定量检测。结论:制备的二联定量胶体金试纸条对赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的检测限分别为0.32和0.58 ng/ml(图5),在玉米、小麦和饲料样本中的加标回收率为77.3%～106.3%,且变异系数均小于15%(表2)。制备的二联定量胶体金免疫层析试纸条和LC-MS/MS对玉米、小麦和饲料等天然样本中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的定量检测结果相关性较好(表3和图7),具有较好的应用价值。     

水稻条纹叶枯病大爆发因缘与防治对策

水稻条纹叶枯病大爆发与灰飞虱猖獗的因缘、特点及其控防对策.     

南京农大成功克隆抗水稻“癌症”基因

据2014年9月13日《科技日报》报道,水稻条纹叶枯病是由灰飞虱为媒介传播的病毒病,俗称水稻"癌症",一旦染上将颗粒无收。南京农业大学万建民教授团队成功克隆了第一个水稻抗条纹叶枯病基因STV11,并阐述了该基因的功能。相关论文由《自然·通讯》在线发表。水稻条纹叶枯病是由灰飞虱为媒介传播的病毒病。在中国东部、日本和韩国超过80%的水稻种植区曾受到其严     

鸡白痢沙门氏菌胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制及初步应用

为了建立一种适合基层现场的鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)抗体检测方法,以S.pullorum的基因组为模板,利用PCR方法扩增inv A基因并进行原核表达后,用Ni-NTA纯化inv A融合蛋白,Western-blot和ELISA进行分析;采用30 nm的胶体金溶液标记山羊抗鸡Ig Y,并对金标抗体的质量浓度和p H值进行优化;在NC膜上分别包被inv A融合蛋白和鸡Ig Y作为检测线和质控线,评估其特异性、灵敏性和稳定性.用该方法对临床的195份血清进行检测,平板凝集试验验证其准确性.结果表明:构建的inv A重组蛋白质粒在大肠杆菌BL21中成功高效表达,获得的蛋白纯度较高,经Western-blot和ELISA方法证实具有良好的反应原性.该试纸条最佳胶体金标记的p H值为7.6,抗体质量浓度为1.3 mg/m L,方法的灵敏性与平板凝集试验的灵敏性一致,与其他病原菌无交叉反应.对195份临床样本进行检测,其结果与平板凝集试验的符合率为96.43%.研究建立的S.pullorum胶体金免疫层析检测试纸条具有方便、快捷、安全和灵敏度高等优势,可用于S.pullorum抗体的早期检测和流行病学筛查.     

免疫层析试纸划液仪的设计与实现

针对免疫层析检测试纸C/T线在生产制作上存在的不足,设计了一套对恒线速度运动的NC膜进行划液的专业设备,主要用于在试纸的NC膜表面划上定量均匀的蛋白质液。为了满足划液要求,划液仪以单片机为主要控制核心,设计了自主调节的划液平台和精确稳定的传动装置,通过键盘和液晶显示使操作更加简单直观,检测装置增加了划液仪的精度和稳定性。另外加入RS-485通讯接口,PC机可通过Modbus协议实现对划液仪的控制,便于设备组网后的集中监控。实验证明:该仪器经济简便、性能稳定、操作精准,适用于各种免疫层析试纸条的科研以及中小型企业的研发。     

胶体金免疫层析法检测猪PRVgE抗体方法的建立及应用

利用PCR技术从猪伪狂犬病毒基因组中克隆gE抗原表位基因,并将其插入到载体pET-22b（＋）中,构建成原核表达质粒pET-22b（＋）-gE,使其在E．coli BL21（DE3）中以IVFG诱导表达,经斑点杂交证实表达产物具有抗原性．表达产物纯化后作为抗原,结合胶体金标记技术,运用双抗原夹心法于国内首先建立了猪PRVgE抗体检测的免疫层析试纸条．该方法操作简单灵敏度高、特异性好,适合猪伪狂犬的临床诊断．     

基于图像的金免疫层析试条定量检测系统

在使用CMOS图像传感器获得金免疫层析试条的图像的基础上,使用多副图像平均法和PDE去除试条图像的噪声,再用Snake分割和Hough变换提取金免疫层析试条的检测窗口,然后使用积分扫描法较精确地提取金免疫层析试条的检测线,输出检测线内的总灰度值。实验结果表明,该方法比较理想地实现了金免疫层析试条的定量检测。     

基于单克隆抗体的检测马铃薯植物中马铃薯S病毒的血清学方法（英文）

目的:建立基于单克隆抗体的检测马铃薯植物中马铃薯S病毒(PVS)的血清学方法,为我国PVS的田间调查和检测及无毒种薯的生产提供快速、实用的检测技术。创新点:首次制备了抗PVS的高度特异和灵敏的单克隆抗体,并以制备单抗为核心建立三种能快速、准确、灵敏、特异地检测PVS的血清学检测方法。方法:以差速离心方法提纯的PVS病毒粒子作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了能稳定传代并分泌PVS单克隆抗体的杂交瘤细胞株;扩繁的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔获得单抗腹水,并以纯化的制备单抗为核心,根据血清学原理建立检测马铃薯植物中PVS的双抗夹心酶联免疫吸附试验(DAS-ELISA)、斑点酶联免疫吸附试验(dot-ELISA)和组织印迹酶联免疫吸附试验(tissue print-ELISA)血清学检测方法;并对田间马铃薯样品进行PVS检测,分析建立的血清学方法检测PVS的有效性。结论:利用杂交瘤技术获得了五株能稳定传代并分泌PVS单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以制备杂交瘤细胞分泌的单抗为核心建立了检测马铃薯植株中PVS的DAS-ELISA、dot-ELISA和tissue print-ELISA三种血清学方法。三种血清学方法检测感染PVS的马铃薯植株呈阳性反应,而检测健康的马铃薯及感染其他三种马铃薯病毒的植株呈阴性反应,且建立的DAS-ELISA和dot-ELISA方法检测马铃薯病叶的灵敏度分别达到1:163 840和1:10 240倍稀释(w/v,g/ml)。田间样品检测结果发现,建立的血清学方法的检测结果与逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的检测结果一致,表明建立的血清学方法可有效地用于马铃薯植物中PVS的检测,从而为我国PVS的田间调查和检测及无毒种薯的生产提供快速、实用的检测技术。     

水稻转化系统应用研究进展

本文简单综述了水稻遗传转化体系研究及其转化系统应用研究进展。     

水稻旱育稀植的增产效应试验

本试验就水稻旱育直栽、旱育抛栽、二段育秧、湿润水育秧等四种育秧栽培方式进行产量比较试验,得出：旱育抛栽与旱育直栽产量分居一、二位,但两者差异不显著,二段育秧产量居第三,湿润水育秧产量最低。     

粮食安全背景下江苏水稻生产优化布局研究

基于2005—2020年江苏水稻生产数据,运用综合比较优势、Topsis综合评价和趋势预测模型等方法对江苏各地水稻生产水平进行综合评价,指导江苏水稻生产优化布局。结果表明：江苏粳稻生产应向苏北、苏中优化布局,其中盐城、淮安、宿迁、连云港和扬州可以适度增加粳稻种植面积,泰州、南通、南京、镇江、苏州、常州、无锡应稳定粳稻种植面积;江苏籼稻生产应向淮安、宿迁、徐州和南京优化布局,盐城、连云港、扬州、泰州、常州和镇江可以适度减少籼稻种植面积,提倡“籼改粳”,并提出优化布局的政策建议。     

营养黑米饼干的研制

黑米经膨化、糖化、过滤,可得紫黑色糖化液,添加面粉等物,即能制出光亮细腻、口感香脆、富锌健脑的饼干——黑米饼干。     

水稻品种株型遗传聚类分析

本试验在对 17个粳稻代表性品种主要株型性状遗传相关分析的基础上 ,进而进行主成分分析和聚类分析 ,结果表明 :参试品种与各类群性状基本相符 ,可见按水稻品种株型遗传进行聚类分析是可行的。     

Genetic basis of heterosis and inbreeding depression in rice (Oryza sativa L.)

INTRODUCTIONAlthoughriceisanaturallyself-pollinatedcrop,strongheterosisisobservedintheirF1hybrids.HeterosisorhybridvigorismanifestedasimprovedperformanceforF1hybridsgeneratedbycrossingtwoinbredparents.Heterosiscanbedefinedquan-titativelyasanupwarddeviationofthemid-parent,basedonthemeanvaluesofthetwoparents(JohnsonandHutchinson,1993).Heterosismaybepositiveornegative.Dependinguponbreedingob-jectives,bothpositiveandnegativeheterosisareusefulforcropimprovement.Ingeneral,positiveheterosisisd…     

粉渣替代部分粮食喂猪试验

用粉渣代替部分粮食喂肥育猪。试验用 30千克左右的长白杂交猪 2 0头 ,分成试验和对照组 ,每组 1 0头 ,公母各半 ,试验组饲喂用粉渣代替部分粮食的自配饲料 ,而对照组饲喂常规配合饲料。结果表明试验组与对照组净增重、日增重和日耗料无显著差异 ,而试验组的日支出低于对照组的 ,日增收高于对照组的。暗示粉渣可代替部分粮食喂猪     

Genetic basis of heterosis and inbreeding depression in rice (Oryza sativa L.)

The genetic basis of heterosis was studied through mid-parent, standard variety and better parent for 11 quantitative traits in 17 parental lines and their 10 selected hybrids in rice (Oryza sativa L.). The characters were plant height, days to flag leaf initiation, days to first panicle initiation, days to 100% flowering, panicle length, flag leaf length, days to maturity, number of fertile spikelet/panicle, number of effective tillers/hill, grain yield/10-hill, and 1000-grain weight. In general the hybrids performed significantly better than the respective parents. Significant heterosis was observed for most of the studied characters. Among the 10 hybrids, four hybrids viz., 17A×45R, 25A×37R, 27A×39R, 31A×47R, and 35A×47R showed highest heterosis in 10-hill grain yield/10-hill. Inbreeding depression of F2 progeny was also studied for 11 characters of 10 hybrids. Both positive and negative inbreeding depression were found in many crosses for the studied characters, but none was found significant. Selection of good parents was found to be the most important for developing high yielding hybrid rice varieties.     

Genetic basis of heterosis and inbreeding depression in rice (<Emphasis Type="Italic">Oryza sativa</Emphasis> L.)

The genetic basis of heterosis was studied through mid-parent, standard variety and better parent for 11 quantitative traits in 17 parental lines and their 10 selected hybrids in rice (Oryza sativa L.). The characters were plant height. days to flag leaf initiation, days to first panicle initiation, days to 100% flowering, panicle length, flag leaf length. days to maturity, number of fertile spikelet/panicle, number of effective tillers/hill, grain yield/10-hill, and 1000-grain weight. In general the hybrids performed significantly better than the respective parents. Significant heterosis was observed for most of the studied characters. Among the 10 hybrids, four hybrids viz., 17A×45R, 25A×37R, 27A×39R, 31A×47R, and 35A×47R showed highest heterosis in 10-hill grain yield/10-hill. Inbreeding depression of F₂ progeny was also studied for 11 characters of 10 hybrids. Both positive and negative inbreeding depression were found in many crosses for the studied characters, but none was found significant. Selection of good parents was found to be the most important for developing high yielding hybrid rice varieties. Project supported by the Foundation of Ministry of Science and Information and Communication Technology, People's Republic of Bangladesh     

水稻米香基因的初步定位

香味是水稻重要食味品质性状之一,但稻米香味的遗传甚为复杂.早有报道水稻米香基因位于第八条染色体上且与RFLP标记RG28紧密连锁.本实验通过水稻籼粳亚种之间的杂交,利用SSR(Simple Sequence Repeat)分子标记的方法对水稻米香基因进行初步定位.结果表明:稻米香味性状受一对隐性基因控制,且位于第八条染色体SSR标记RM8264和RM1109之间,其遗传距离大约2.1cM.这一结果将对于米香基因的精细定位提供了重要依据.