哺乳动物内耳毛细胞的体外培养（英文）

由于内耳的血脑屏障作用,药物渗入到内耳比较困难。新生小鼠内耳毛细胞的体外培养体系的建立,为体外进行支持细胞转分化机制的研究和进行体外药物损伤毛细胞实验等提供实验技术的前提。为了避免毛细胞体外培养过程中污染杂菌,解剖内耳耳蜗的整个过程十分重要。处死小鼠后,将其浸泡在75%酒精中1～3分钟,防止鼠毛污染培养基。打开内耳耳蜗之前,选用添加了青霉素的磷酸盐缓冲液(1×PBS);培养过程中使用的是仅仅添加青霉素的培养基来减少对毛细胞的损伤。在基底膜培养的第一步,选用DMEM(包含5%马血清体积比和5%胎牛血清)作为组织粘附培养的培养基,保证足够的营养,同时更好地维持整个基底膜培养状态下的形态。在之后的培养中,选用DMEM(添加了10%胎牛血清、1%N2和1%B27)作为长期的培养基。使用含有表皮生长因子的N2和B27的培养基进行基底膜以及椭圆囊之后的培养,有助于维持毛细胞的体外生长时间。选用鼠尾胶包被盖玻片后培养,可以增加基底膜和椭圆囊的粘附作用,保证毛细胞静纤毛的向上生长。该文章展现了哺乳动物毛细胞的体外培养的具体方法,能够较好地维持耳蜗基底膜在体外培养的形态,并增加毛细胞体外培养的存活时间。     

顺铂对耳蜗毒性的实验研究

目的 :探讨顺铂对耳蜗毒性的影响。方法 :将豚鼠 12只随机分成顺铂组、对照组 ,每组 6只。顺铂组连续 5d腹腔注射顺铂 ,2ml·kg- 1·d- 1;对照组连续 5d腹腔注射生理盐水 ,2ml·kg- 1·d- 1。两组豚鼠均于实验结束后测耳蜗血流、耳蜗电图 ,断头 ,取耳蜗 ,用不同方法染色固定 ,铺片及电镜观察。结果 :顺铂组动物在给药后体重减轻 ,耳廓反射减退 ,耳蜗血流下降 ,阈值提高 ,毛细胞大片缺失 ,两组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。顺铂组血管纹较对照组血管纹明显扩张 ,红细胞聚集。扫描电镜下观察 ,顺铂组的绝大部分内、外毛细胞的纤毛散乱 ,倒伏 ,甚至缺失 ;透射电镜下观察 ,顺铂组血管纹线粒体水肿变性。结论 :顺铂对耳蜗有损坏作用。     

USP11通过去泛素化p53调控p53稳定性

研究目的：深入研究p53的泛素化及稳定性的调控。创新要点：发现一个新的调控p53去泛素化的酶USPll,它可以通过与p53的结合去泛素化并稳定p53,从而揭示了一个新的p53去泛素化调控的机制。研究方法：通过免疫共沉淀发现p53可以与USP11结合（图1a）,通过泛素化检测试验发现USPI1可以去泛素化p53（图3a和3b）,最后通过逆转录．聚合酶链式反应（RT—PCR）试验发现在DNA损伤后,USP11对p53转录活性的提高是非常重要的。     

参附汤对心脏毒性损伤大鼠细胞凋亡相关基因的影响

探讨参附汤对阿霉素心脏毒性损伤大鼠细胞凋亡相关基因转录水平的影响。采用实时荧光定量PCR法测定大鼠心肌组织Bax、Bcl-2和Caspase-3 m RNA的转录水平。结果表明,阿霉素心脏毒性损伤模型大鼠与对照组相比,Bax和Caspase-3 m RNA的转录水平均提高,而Bcl-2 m RNA的转录水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。参附汤组与模型组相比,Bax和Caspase-3 m RNA的转录水平均降低,而Bcl-2 m RNA的转录水平提高,差异有统计学意义(P<0.05)。阿霉素心脏毒性损伤与心肌细胞凋亡有关,参附汤通过调节细胞凋亡相关基因表达水平来改善心肌毒性损伤,达到保护心肌的功能。     

缺氧诱导因子-1研究进展

缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是1992年Semenza和Wang[1]首先发现的,随后确立了HIF-1的结构,并证明了其cDNA的编码顺序.HIF-1普遍存在于人和哺乳动物细胞内,常氧下(21%O2)也有表达,但合成的HIF-1蛋白很快即被细胞内氧依赖性泛素蛋白酶降解途径所降解,只有在缺氧条件下HIF-1才可稳定表达[2].HIF-1是具有转录活性的核蛋白,具有相当广泛的靶基因谱,其中包括与缺氧适应、炎症发展及肿瘤生长等相关的近100种靶基因[3,4].当其与靶基因结合后,通过转录和转录后调控使机体产生一系列反应,有些反应尽管带有适应代偿性质,但也常给机体带来病理性损害,如低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)、肿瘤加速生长等.     

SIRT1基因的表达调控及对动物脂类代谢的功能

SIRT1是Sirtuin家族的一个成员,一种NAD+-依赖性蛋白去乙酰化酶.SIRT1通过与p53、Ku70、FOXOs、PGC-1A、p300和H1、H3、H4等不同的非组蛋白和组蛋白相互作用来发挥不同的功能.SIRT1基因调控肝脏、脂肪、肌肉、胰岛和脑等器官中的糖脂代谢.SIRT1是脂类稳态的一个重要调节因子,并且对脂肪酸的氧化也起作用.SIRT1自身的表达和活性在转录水平、转录后水平及翻译后水平都受到调控.本文综述SIRT1基因的表达调控及对动物脂类代谢的功能.     

UFCI基因在乳腺细胞系中的表达分析

泛素结合酶UFC1是一个新鉴定的类似泛素结合酶E2的基因。目前,对UFC1的功能研究报道还比较少,有待更进一步的研究和探讨。采用半定量RT-PCR技术分别检测一系列的乳腺细胞系MCF7、HBL100、MDA-MB231和MDA-MB-453中UFC1基因的转录水平,结果显示,在正常的HBL100乳腺细胞系中的表达最高,而在乳腺癌细胞系MCF7,MDA-MB231,MDA-MB-453中的表达明显降低。UFC1在乳腺细胞系中的差异表达的结果为将UFC1作为新的靶分子引入乳腺癌的临床预防和治疗提供实验依据。     

山羊TTF-1基因的表达及其分子生物学特性

甲状腺转录因子-1(TTF-1)是NKx组织特异性转录因子家族中的一员.TTF-1基因可能是调节哺乳动物初情期的关键基因.采取山羊的甲状腺、下丘脑、垂体、大脑、卵巢等与青春期发育和繁殖性能有关的组织样,采用RT-PCR方法来检测TTF-1基因在以上组织中的表达特性.结果表明:TTF-1基因在甲状腺、下丘脑、垂体、大脑、卵巢中均有表达,为进一步研究山羊TTF-1基因及其对哺乳动物繁殖性能的影响提供理论基础.     

PAS家族转录因子及其下游基因在大鼠肝再生中的作用

为在基因转录水平了解PAS结构域转录因子家族基因及它们的下游基因在肝再生（1iverregeneration,LR）中作用．本文用Rat Genome230 2．0芯片检测上述基因在大鼠再生肝中表达情况,用真、假手术比较方法确定肝再生相关基因。初步证实25个基因与肝再生相关,它们在促进再生肝细胞分化及异源物、糖、脂代谢,促进肝再生早期的免疫反应和后期的血管发生中发挥作用。     

上海交通大学科学家发现能阻断肿瘤血管生长的靶点

据2007年11月1日《新民晚报》文章,上海交通大学医学院细胞信号传导研究室主任程金科博士及其研究小组,发现了在缺氧条件下“类泛素蛋白酶”调节“缺氧诱导因子1”的稳定与活性的分子机制。这一发现为研发阻断肿瘤血管生长的药物提供了新的靶点。     

建筑废砖骨料再生产试验研究

通过提炼建筑垃圾中的废砖,利用建筑废砖作为再生混凝土骨料进行试验研究,得到再生混凝土的力学性能以及砖骨料粒径含量和用水量对再生混凝土性能的影响分析。通过调节再生混凝土原料的配比和砖骨料的粒径含量,使再生混凝土的性能达到最优。实验结果表明,砖骨料的吸水率、粒径含量和用水量是实验成功的关键,砖骨料的最佳粒径范围为9.5-19 mm。     

听力正常耳鸣患者治疗前后诱发性耳声发射的临床研究

目的:分析耳鸣与耳蜗毛细胞早期损害的关系,以及听力正常耳鸣患者治疗后基本痊愈和显效的病耳耳蜗毛细胞恢复情况。方法:40例(66耳)纯音听力正常的耳鸣患者,行诱发性耳声发射检查:瞬态耳声发射(TEOAE)和畸变产物耳声发射(DPOAE)检查,并对耳鸣患者给予相应治疗,对基本痊愈和显效的病耳治疗前DPOAE或TEOAE未通过的复查DPOAE或TEOAE。结果:①治疗前TEOAE检查28耳通过,38耳未通过;DPOAE检查34耳通过,32耳未通过;②经治疗,38耳治疗前TEOAE检查未通过的患耳基本痊愈和显效的病耳有15耳,复查TEOAE,3耳通过;32耳DPOAE检查未通过的患耳基本痊愈和显效的病耳有13耳,复查DPOAE,4耳通过。结论:部分听力正常的耳鸣患者已有耳蜗毛细胞的损害,而且不易恢复。     

SNG系统的架构、需求与功能

1.SNG系统共分为四大部分·服务器端 (Server)。服务器为 SNG系统的核心 ,它扮演着整个课程的设置、操作者的执行、使用者的收看及管理者维护的重大角色 ;服务器对系统的要求为 Windows 2 0 0 0 Server(IIS、Ftp Service、Media Service)、SQL 7.0版以上、SNG Serv-er软件。·编码器端 (Encode)。编码器端即为视频的编辑端 ,视频来源经由 SNG主控台作采集及效果后 ,由 U SB接口将讯号送至笔记本上 ,再将模拟讯号转为数字讯号 ,以方便作为直播或点播用 ;编码器端对系统的要求为 Windows 98以上、MediaEncode、SNG Encode软件…     

多梳抑制复合体PRC1的核心组分CBX家族蛋白在表观遗传调控中的作用(英文)

研究目的:多梳蛋白家族(PcG)是一类染色质水平上通过表观遗传修饰调控靶基因的转录因子,其主要功能是使其靶基因转录受到抑制进而沉默。PcG通常以多梳蛋白复合体(PRC)的形式存在,目前研究的最多的是PRC1和PRC2。PRC1在PcG对其靶基因进行转录抑制发挥着主要作用。本综述主要论述了哺乳动物中PRC1核心成员CBX蛋白在多梳蛋白调控基因转录过程中发挥的作用及其对胚胎发育、细胞记忆、细胞周期、细胞增殖和肿瘤形成等过程的影响。创新要点:现已有大量有关PcG在表观遗传水平对其靶基因进行修饰转录机制的综述报道,且以PRC1和PRC2为整体来介绍表观遗传调控机制的文章也屡见不鲜。然而,关于PRC1核心成员CBX蛋白在哺乳动中的同源蛋白CBX2、CBX4、CBX6、CBX7、CBX8对哺乳动物个体发育调节及肿瘤发生过程的分子机制并没有系统的论述。本综述主要将这五种CBX蛋白在转录分子水平上的所发挥的功能进行相关的介绍,并且总结了CBX2、CBX4、CBX6、CBX7、CBX8各自最新的研究进展,体现出五种CBX蛋白的共同功能、各自独特的功能及彼此间的相互联系。重要结论:总结了在哺乳动物中的五种CBX蛋白在胚胎发育和肿瘤形成等过程中独特的功能调节机制以及整体的相互作用,发现CBX作为PRC1的核心组分在基因表观遗传调控中发挥着极其重要的作用。     

神经轴突再生过程中微小RNA(miRNA)、转录因子和靶基因的网络功能分析（英文）

创新点:本研究比较详细地阐明了与神经轴突再生相关的微小RNA(mi RNA)、转录因子和靶基因的相互作用关系,为神经系统疾病的恢复奠定基础。方法:本研究从基因表达综合数据库中获得与轴突再生相关的转录因子和基因数据,利用文献报道及生物信息学数据库预测的方法筛选与轴突再生相关的基因靶向mi RNA。利用生物信息学方法分析了三者之间的网络作用关系,预测了在相互作用网络中发挥重要作用的节点。最后对目标基因的基因本体(GO)功能进行了富集。结论:通过分析,初步筛选了与神经轴突再生相关的51个mi RNA、27个转录因子和59个靶标基因。进一步分析得到359对前馈环路,在此基础上推测了神经轴突再生过程中发挥重要作用的7个核心基因(Nap1l1、Arhgef12、Sema6d、Akt3、Trim2、Rab11fip2和Rps6ka3),6个miRNA(hsa-miR-204-5p、hsa-miR-124-3p、hsa-miR-26a-5p、hsamiR-16-5p、hsa-miR-17-5p和hsa-miR-15b-5p)和8个转录因子(Smada2、Fli1、Wt1、Sp6、Sp3、Smad4、Smad5和Creb1)。     

陆地棉胚状体发生率的提高与再生植株的移载

本研究通过两个陆地棉品种和多个培养基组合实验表明：单独使用GA3，及GA3与6-BA搭配使用对胚状体发生都有利，且搭配使用对新陆早1号胚状体发生效果较好，其次为新陆早7号。胚状体发生可以由激素组合及其浓度组合调控。胚状体萌发及叶．根平衡生长直至形成再生植株在不同培养基组合下反应不同。31号培养基（1／2MS）有利于新陆早1号试管苗的发育。14号培养基（MS＋IAA1．0＋6-BA0．2）有利于新陆早7号试管苗的发育。不同的移栽基质对再生植侏的生长明显不同．其中混合土：珍珠岩-1：1的移栽基质对再生植株生长最佳。     

基于微阵列技术的缺氧/复氧诱导下血管内皮细胞转录组分析

目的:应用全转录组芯片研究缺氧/复氧诱导下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的转录组轮廓。创新点:血管内皮细胞(VEC)缺氧/复氧损伤被视定为许多生理和病理过程中导致器官功能障碍的重要驱动因素。然而,其详细病理生理机制和基因表达谱信息尚未阐明。本研究首次应用全转录组芯片技术研究VEC缺氧/复氧诱导下的转录组轮廓。方法:采用缺氧孵育3h后复氧1h的HUVEC为缺氧/复氧组,同时常氧孵育的HUVEC为常氧对照组。应用含58 339条探针的全转录组芯片检测每组三个样本。对差异表达基因进行生信分析和功能验证。结论:本研究发现372个有意义的差异表达基因探针。相关基因涵盖多种途径和功能,例如氧自由基的产生、钙超载、炎症、糖脂代谢、内皮细胞增殖、分化、细胞骨架及通透性调节、细胞裂解、凋亡和血管生成。另外,实验进一步表明,差异表达基因pleckstrin同源样域家族A成员1(PHLDA1)的m RNA和蛋白质表达结果与微阵列结果一致。STRING分析发现,PHLDA1可能与差异表达基因SLC38A3、SLC5A5、Lnc-SLC36A4-1和Lnc-PLEKHJ1-1具有物理性和/或功能性相互作用,这有望揭示VEC在缺氧/复氧环境下长链非编码RNA(lnc RNA)的相关机制。     

基于微阵列技术的缺氧/复氧诱导下血管内皮细胞转录组分析（英文）

目的:应用全转录组芯片研究缺氧/复氧诱导下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的转录组轮廓。创新点:血管内皮细胞(VEC)缺氧/复氧损伤被视定为许多生理和病理过程中导致器官功能障碍的重要驱动因素。然而,其详细病理生理机制和基因表达谱信息尚未阐明。本研究首次应用全转录组芯片技术研究VEC缺氧/复氧诱导下的转录组轮廓。方法:采用缺氧孵育3h后复氧1h的HUVEC为缺氧/复氧组,同时常氧孵育的HUVEC为常氧对照组。应用含58 339条探针的全转录组芯片检测每组三个样本。对差异表达基因进行生信分析和功能验证。结论:本研究发现372个有意义的差异表达基因探针。相关基因涵盖多种途径和功能,例如氧自由基的产生、钙超载、炎症、糖脂代谢、内皮细胞增殖、分化、细胞骨架及通透性调节、细胞裂解、凋亡和血管生成。另外,实验进一步表明,差异表达基因pleckstrin同源样域家族A成员1(PHLDA1)的m RNA和蛋白质表达结果与微阵列结果一致。STRING分析发现,PHLDA1可能与差异表达基因SLC38A3、SLC5A5、Lnc-SLC36A4-1和Lnc-PLEKHJ1-1具有物理性和/或功能性相互作用,这有望揭示VEC在缺氧/复氧环境下长链非编码RNA(lnc RNA)的相关机制。     

CRISPR-dCas9系统在基因表达调控中的最新研究进展

CRISPR-Cas9系统自问世以来一直被广泛地应用于基因组编辑技术中,直到人们通过点突变的方式将Cas9的Ruv C和HNH剪切结构域失活得到d Cas9后,这个系统又有了新的功能——调节基因的表达水平。研究者通过改变g RNA的结构,并与RNA结合蛋白配对,从而招募转录因子以调节基因的转录水平,达到影响基因表达的目的。本文主要讨论了CRISPR-d Cas9系统的结构特点、作用原理和目前对调节基因表达的最新研究进展,以期为此领域的研究者提供参考。     

化学奖泛素调节蛋白质细胞控制化学过程的分子层认知

以色列科学家阿龙·切哈诺沃、阿夫拉姆·赫什科和美国科学家欧文·罗斯对泛素调节蛋白质的功能的发现,使人们能在分子水平上认识和理解细胞中如何控制许多非常重要的化学过程,比如细胞周期、DNA修复、基因转录,以及新生蛋白质的质量控制。这种对蛋白质控制死亡的新知识对阐明免疫防御功能也是很重要的,如果缺欠就会导致各种各样的疾病,包括某些癌症的发生。特颁以2004年度诺贝尔化学奖。———瑞典皇家科学院