SDS法和CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA用于SSR分析

选用8个西藏黄籽油菜干种子作材料,分别采用SDS和CTAB的微量法提取基因组DNA,取适量的该DNA进行琼脂糖凝胶电泳,并利用uv1100型紫外分光光度计测定所提取的DNA在260nm、280nm的光密度值及比值,并进行SSR标记。结果表明,2种方法均能从西藏黄籽油菜干种子中提取出一定量的比较完整且纯度较高的DNA,用琼脂糖凝胶检测时,表现带型清亮,每个样品带型较一致,利用SDS法CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA,均适用于SSR分析。但用CTAB法提取的干种子DNA的纯度更高、量多、质量更好,更适于制备SSR分子标记的模板DNA。     

大花黄牡丹总DNA的提取初探

本文经过反复实验摸索,在没有液氮的情况下,改良了常用的总DNA的提取方法～SDS法和CTAB法,用这两种方法成功的提取了大花黄牡丹（Paeonia ludlowii）的总DNA。并通过琼脂糖凝胶电泳、分光光度计进行紫外检测发现,提取到的DNA纯度及含量均适合分子生物学操作的要求,为进一步遗传多样性分析、遗传图谱构建等研究奠定基础：     

改进的CTAB法提取高寒植物长鞭红景天基因组DNA的研究

根据自己抽提高寒植物基因组DNA的实际经验,改进了Clark利用CTAB提取植物基因组DNA的方法,在试验过程中发现,通过在研磨材料时加入液氮、剪去端部的吸头转移含有DNA的溶液,并且将加入RNaseA消化RNA的步骤,结果证明改良的CTAB法得到的长鞭红景天基因组DNA浓度和纯度较高,且无无蛋白质和RNA等杂质影响。     

蜘蛛主壶腹线cDNA文库构建过程的优化

通过本实验得出采用简易CTAB法提取基因组DNA,利用总RNA试剂盒提取总RNA,提取效率和纯度较为理想。并利用生物软件学方法对老狡蛛丝蛋白基因引物进行了构建,为蜘蛛主壶腹线cDNA文库构建打下了基础。     

大学学报

槟榔基因组DNA提取及ISSR反应体系的优化Extraction of Genomic DNA of Areca catechu L.and Optimization of Its ISSR-PCR System摘要以槟榔为试验材料,用改良的CTAB法提取基因组DNA,并设置不同梯度分别对每个PCR反应因子做了相应的试验.结果表明：     

植物基因组DNA提取及酶切技术的初步探讨

随着基因工程等分子生物学技术的迅速发展及广泛应用,人们经常需要提取高分子量的植物DNA,用于构建基因文库、酶切及克隆等,这是研究基因结构和功能的重要步骤。本研究通过用机械方法使组织和细胞破碎,然后加入离子型表面活性剂,溶解细胞膜和核膜蛋白,细胞膜和核膜破裂,进入细胞核内的表面活性剂解聚核中的核蛋白并与蛋白质形成混合物,用CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）在低盐浓度下加入酚和氯仿等表面活性剂使蛋白质变性,通过离心得植物总DNA溶液的过程总结CTAB 提取DNA 的方法,进一步了解DNA 的性质。     

DNA的提取及其在猪育种中的应用

本文对原种猪场3头无血缘关系的台系杜洛克种公猪前腔静脉采血,以ACD抗凝,采用4种不同方法(苯酚-氯仿法、改良CTAB法、试剂盒法、Chelex-100法)对采取的猪血基因组DNA进行提取,并以所提取的基因组DNA为模板,采用紫外分光光度计对其进行浓度和纯度的定量检测;采用琼脂糖凝胶电泳法对其进行定性检测;并对RAPD反应体系进行优化设计,用优化后的RAPD体系进行PCR扩增。     

转大豆WRKY基因烟草后代的鉴定

本试验通过培养转大豆WRKY基因烟草的T1代种子,获得T1代植株.经过卡那霉素的筛选,获得具有抗性的植株,利用CTAB法提取叶片DNA,然后通过聚合酶链式反应(PCR)技术检测外源基因在T1代中的遗传稳定性.     

四种从蒙古马全血中提取基因组DNA方法的比较研究

本实验分别采用酚———氯仿抽提法、快速抽提法、胍盐酸提取法和天为时代试剂盒法对蒙古马血样进行基因组DNA的提取,再利用琼脂糖凝胶电泳技术、紫外分光光度计和PCR扩增技术,对提取得到的DNA纯度、浓度及实用性进行检测,从而选择一种高效、快速、经济的从蒙古马血液中提取基因组DNA的方法。     

广西产三种地钱RAPD分子鉴定初步研究

目的:建立广西产地钱(Marchantia polymorpha L.)拳卷地钱(Marchantia convoluta gao et chang.)和粗裂地钱(Marchantia paleacea Bertol.)的分子鉴别方法。方法:利用RAPD(random amplified polymorphic DNA)技术。结果:采用改良的CTAB法提取地钱、拳卷地钱、粗裂地钱3种植物的总DNA均适用于22引物对供试材料DNA进行随机扩增,共扩增出145条谱带,多态性条带128条,占扩增总条带的88.3%,平均多态性百分率为89.8%;三种地钱遗传距离为0.3713-0.4107、Nei′s遗传一致度为0.5893-0.6287。结论:RAPD技术对广西产地钱、拳卷地钱、粗裂地钱进行分子鉴定是有效的。RAPD分析。     

芦苇床中芦苇内生菌群总DNA提取方法研究

本文对污泥干化芦苇床中芦苇内生菌总DNA的提取方法进行了研究,实验经过摸索后采用Soil DNA Kit提取基因组DNA对不同来源的芦苇内生菌群总DNA进行提取。利用PCR技术对不同来源的总DNA的提取方法进行了对比分析。以期应用分子生物学技术研究和评价芦苇共生菌群改变,从而为改善芦苇床工艺设计提供生物学证据。     

一种通用的基因组DNA提取方法

高质量的基因组DNA是进行分子生物学实验的前提。为此,本研究通过从动植物组织和细胞中分别提取DNA,探索了一种通用的基因组DNA的提取方法。本方法所提取到的DNA纯度高、适合后续PCR扩增。     

土壤DNA提取与纯化方法的研究

土壤DNA提取与纯化成为研究土壤微生物微生态的首要前提,本文系统总结了国内外提取和纯化土壤DNA的方法。     

近亲幽灵蛛基因组DNA提取方法的优化

蜘蛛基因组DNA的提取是对蜘蛛在分子水平上进行研究的关键。本实验通过酚抽提法与仲丁醇浓缩法结合;酚抽提法与醚抽提法结合将酚抽提法进行优化,从而提高DNA的提取效率和纯度。为开展包括蜘蛛在内的节肢动物的分子生物学研究提供了基础实验依据。     

三种检验方法在接触性检材中比较及应用

目的:运用Chelex-100法、直接扩增法、磁珠法对日常案件中常见的接触性检材进行检验及比对,以获得最佳的方法。方法:运用三种方法提取接触性检材DNA,并对结果进行比对分析。结果:直接扩增法操作方便、快速,对无抑制物的检材检出率高;磁珠法对污染、有抑制物的检材效果最好;Chelex-100法检验效果不理想。讨论:直接扩增法和磁珠法在接触性检材DNA的检验中有各自的优势,可根据案件中检材的具体情况作出合适的提取方法。     

大黄鱼基因组DNA的提取及其RAPD分析条件的探索

通过实验筛选出一种快速、简便提取大黄鱼基因组 DNA的方法 .以该法提取的大黄鱼基因组 DNA为模板 ,对大黄鱼 RAPD分析中的 DNA模板浓度、镁离子浓度、d NTPs浓度、引物浓度和 Taq酶浓度进行了研究 ,初步确定了适于大黄鱼 RAPD分析的最佳反应体系 :2 5μL反应体系中 ,含模板 DNA2 5 ng,1 0× PCR缓冲液 2 .5μL,d NTPs1 0 0μmol/L,Mg Cl2 2 .5 mmol/L,引物 0 .2μmol/L,Taq DNA聚合酶 1 .0 μmol/min.     

提取西藏油菜总DNA的一种方法

以西藏栽培的油菜为材料,采用不同的药品、不同的配方、不同的水浴时间、不同的离心速度等关键的操作程序,筛选出一种提取油菜总DNA效果较佳的方法。此方法提取的DNA纯化后经电泳、紫外吸收光谱检测证明为高分子量、高纯度的DNA,可用于一般的生物化学和分子遗传学的研究。     

贵州桐梓天花粉rDNA ITS序列分析

目的：对贵州桐梓天花粉rDNA ITS序列（包括ITS1、5．8S和ITS2）进行序列测定与分析,为其基源鉴定和品质评价提供分子依据。方法：采取改良CTAB法提取天花粉总DNA,PCR扩增ITS序列后直接测序,在GeneBank将测序结果进行同源搜索,再将同源序列用MEGA5．1软件进行变异位点分析、遗传距离测定及同属植物ITS序列系统发育树的构建。结果：贵州桐梓天花粉ITS序列与GeneBank三组同源序列存在变异位,点107个、遗传距离范围在0．0252到0．0597之间、物种间亲缘存在较明显的远近关系。结论：ITS序列可以有效地鉴别贵州桐梓天花粉,ITS序列分析技术对近缘种类群间系统学研究及品种鉴定具有较大的意义,同时为进一步利用分子生物学技术鉴定中药材奠定了基础。     

PCR技术快速鉴别牛、羊、猪皮革的初步探讨

提取牛、羊、猪3种动物皮革组织中的DNA,设计了3对特异性引物,PCR扩增,初步建立了这4种动物皮革成分的鉴定方法。DNA的提取的质量及其后的PCR鉴定依赖于皮革的加工程度,如何从皮革成品中提取有效的核酸信息需进一步研究。     

基因敲除小鼠不同部位提取DNA方法的比较

目的:建立简便、快捷、稳定可靠的鉴定小鼠基因型方法,维护动物伦理福利。方法:基因敲除小鼠后代鉴定时,分别从鼠尾,鼠耳,趾甲三个部位提取DNA,通过优化DNA提取技术,经分光光度计检测,PCR扩增等技术,比较分析DNA纯度、提取时间,及基因型鉴定结果。结果:取组织提取DNA,经分光光度计检测,发现DNA浓度尾尖最高,耳尖次之,趾甲浓度最低,但是纯度最好。经PCR扩增技术发现不同基因型的不同部位提取DNA鉴定结果一致。结论:剪趾甲提取DNA操作方法相对于其他常规方法,操作简单,耗时最短,基因型鉴定结果可靠,对小鼠本身伤害更小,可用于规模化的小鼠基因型鉴定实验中。