双向电泳技术

由O'Farrel等1975年建立的双向电泳技术是目前唯一能将数千种蛋白质同时分离与展示的分离技术。双向电泳的原理是,第一向进行等电聚焦(isoelectric focusing,IEF),蛋白质沿pH梯度分离至各自的等电点;随后,再沿垂直的方向进行SDS-PAGE电泳,按分子量大小进行分离。样品经过电荷和质量两次分离后,得到等电点和分子量的信息。电泳的结果不是蛋白质条带,而是点。在第一向等电聚焦电泳中,具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极,pH逐渐增大,由于蛋白质具有两性解离和等电点的特征,在碱性区域蛋白质分子带负电荷向阳极移动,直至某一pH位点时失去电荷而停止移动,此处介质的pH恰好等于聚焦蛋白质分子的等电点。同理,位于酸性区域的蛋白质分子带正电荷向阴极移动,直到在它们的等电点     

封面照片说明

由O’Farrel等1975年建立的双向电泳技术是目前唯一能将数千种蛋白质同时分离与展示的分离技术。双向电泳的原理是，第一向进行等电聚焦(isoelectric focusing，IEF)，蛋白质沿pH梯度分离至各自的等电点；随后，再沿垂直的方向进行SDS—PAGE电泳，按分子量大小进行分离。样品经过电荷和质量两次分     

华东师大生命科学学院研究生课程班招生

由O’Farrel等1975年建立的双向电泳技术是目前唯一能将数千种蛋白质同时分离与展示的分离技术。双向电泳的原理是，第一向进行等电聚焦(isoelectric focusing，IEF)，蛋白质沿pH梯度分离至各自的等电点；随后，再沿垂直的方向进行SDS—PAGE电泳，按分子量大小进行分离。样品经过电荷和质量两次分     

溶液pH计算中的易“忽视”的六类问题

一、易忽视水的电离例1常温下,将pH=5的盐酸1m L加水稀释至1L,稀释后溶液的pH为A.8B.7C.6.96D.6解析1m L pH=5的盐酸稀释至1L后,溶液为极稀溶液,此时不能再忽略水的电离,溶液中的氢离子浓度可作如下近似计算:c(H+)=(10-8+10-7)m ol/L,即溶液的pH应为6.96。选C。二、易忽视弱电解质的电离平衡移动例2常温下,将pH=3的醋酸加水稀释100倍,稀释后所得溶液的pH为A.4B.6C.大于3,小于5D.5解析醋酸加水稀释后,醋酸的电离度增大,溶液中氢离子的物质的量增多,所以溶液的pH应大于3而小于5。选C。三、易忽视盐类的水解例325℃时,将物质的量浓度…     

《溶液的pH值》复习与应试

一、知识体系 电离度、水的离子积、pH值这三个概念,联系密切,环环相扣,复习时要循序渐进。 复习时,要注意运用电离平衡移动理论,分析外界条件以及溶液酸碱性对α、[H~ ]、pH值的影响。 二、重点与难点 1.pH值的定义 溶液中H~ 浓度的负对数叫做溶液的pH值,即pH=-lg[H~ ]。其内涵: ①pH值的适用范围:(ⅰ)只适用于水溶液。(ⅱ)适用于1摩/升以下的稀溶液,pH值的取值范围为0—14。 ②溶液的pH值表示溶液的酸碱性的强弱,是溶液酸碱度一种表示方法。常温下,pH=7溶液呈中性,pH>7溶液呈碱性,pH<7溶液呈酸性。     

蛋白质两性性质的演示实验

高中生物课本中介绍了蛋白质的基本结构和有关性质。两性电离是蛋白质的重要性质之一,又是教学的难点,为了帮助中学生学习,本文设计了一个简单的电泳实验,以供参考。一、原理蛋白质是两性电解质,在蛋白质分子中有游离的氨基和羧基。在溶液中,蛋白质分子能作两性电离,即蛋白质分子处手pH高于等电点的碱性溶液时,带负电。在一定强度的电场中,带正电蛋白质分子向负极泳动;带负电的蛋白分子向正极泳动。如果蛋白液中加入适当染色剂,则蛋白分子在电场中的泳动现象便可观察到。     

高效毛细管电泳中移动反应界面法富集奶粉中三聚氰胺的方法研究

运用移动反应界面理论建立奶粉中三聚氰胺的毛细管电泳富集分离体系。与传统的毛细管电泳相比,体系中引入了富集缓冲溶液(富集相)和分离缓冲溶液(分离相)。优化的条件:样品缓冲溶液为50mmol/L甲酸-甲酸钠(pH2.60),富集相为20mmol/L甲酸钠-甲酸pH8.00),分离缓冲溶液为50mmol/L～50mmol/L甲酸-甲酸钠(pH2.60);样品压力进样50mbar×40s,富集相压力进样50mbar×20s,紫外检测波长232nm,电压30kv。该方法比常规电泳灵敏度高近20倍。     

pH对席夫碱在玻碳电极上电化学氧化还原的影响

合成了一种席夫碱（N-苯基苯甲亚胺）,利用循环伏安法对这种席夫碱溶液在玻碳电极上的电化学氧化还原进行了研究,并考察了pH对这种席夫碱的电化学氧化还原反应的影响．结果表明：该席夫碱的循环伏安图上,在-1．590V电位下出现了一个-CH=N-基团不可逆的还原峰,这说明在玻碳电极上此席夫碱可以被还原;在不同pH的缓冲溶液中,此席夫碱的-CH=N-基团还原峰的峰电位随着H^＋浓度的增大向负方向移动,并对H^＋对席夫碱-CH=N-基团的电化学氧化还原影响的机理进行了推断．     

响应曲面法优化高效毛细管电泳分离维生素C和异维生素C

采用三因素三水平的Box-Behnken设计，利用响应曲面法对影响毛细管电泳分离维生素C及异维生素C的主要影响因素（缓冲溶液的pH、浓度和分离电压）进行研究，以两种维生素C的分离度为响应函数，建立了相应的数学模型，得到了它们的最佳分离条件为：50mM的三羟基甲基氨基甲烷-盐酸电泳缓冲液，pH=7．5，30kV电压。     

能否用pH试纸测出这三种酸的pH值

初中化学实验八“酸的性质”中,要求学生用pH试纸测出稀盐酸(1∶4)、稀硫酸(1∶4)、稀硝酸(1∶4)三种酸的pH值。笔者认为欠妥。溶液的酸碱度用pH值来表示时,其范围通常在0～14之间,此时C(H+)[mol/L]、pH值与溶液酸碱性的关系如图1所示。当溶液中的C(H+)或C(OH-)大于1mol/L时,用pH值表示溶液的酸碱性并不简便。例如,一些溶液中的C(H+)与pH值的关系如下表:所以,当溶液中的C(H+)大于1mol/L时,一般不用pH值表示其酸碱度,而直接用H+浓度表示。而本实验中,给出的三种酸为:稀盐酸(1∶4)、稀硫酸(1∶4)、稀硝酸(1∶4)。如果将稀释过程中溶…     

8种3,4-二氢嘧啶-2-酮衍生物的MEKC法分离

采用胶束电动毛细管色谱法（MEKC）分离8种3,4-二氢嘧啶-2-酮衍生物,研究了电泳缓冲液的pH值、组成及浓度和分离电压等对分离效果的影响。得到了优化的实验条件：缓冲溶液组成为10 mmol/LNa2HPO4-75 mmol/L十二烷基硫酸钠（SDS）-5 mmol/L脱氧胆酸钠（SDC）,pH=9.0,压力进样（3 447.4Pa）5 s,25℃,分离电压20 kV。8种分离物中其中6种分析物达到基线分离。     

影响pH区带逆流色谱分离效果的主要因素

pH区带逆流色谱是在高速逆流色谱基础上发展起来的一种新型制备型分离技术,利用物质解离常数和疏水性的不同进行分离,具有分离量大、分离效果好等优点,并且应用领域十分广泛,在中草药等天然产物的有效成分分离纯化方面也得到了越来越多的应用.文中着重探讨了影响pH区带逆流色谱分离效果的流动相流速、逆流色谱转速、溶剂组成、样品量和酸碱度等主要影响因素.     

甲基吡啶的解离萃取分离实验研究

应用解离萃取分离合成吡啶产生的3-甲基吡啶(3-MPD)与4-甲基吡啶(4-MPD)的混合物(φ(3-MPD)＝68.472 2%;φ(4-MPD)＝26.517 6%),对影响解离萃取分离的6个因素萃取剂、萃取剂的浓度及投料量、有机溶剂及投料量,以及分离温度进行了研究.选取了各因素的不同水平进行了六因素五水平的正交试验,以有机相两甲基吡啶的体积比为主要考查对象,筛选出了解离萃取分离甲基吡啶混合物的最佳工艺条件:当甲基吡啶的混合物为24 mL时,以浓度为2 mol/L的对甲基苯磺酸为萃取剂,用量为40 mL,正庚烷为溶剂,用量为48 mL,温度为0 ℃时分离效果最好.通过重复性实验,分离效果得到明显提高,说明此法具有工业化潜力.     

“毛细管区带电泳同时分离BSA与单链DNA”开放实验

毛细管电泳(CE)作为新型微量分析技术,具有高效、快速、样品用量少、可定性定量分析等特点,在生物、医学、食品、农业、环境等领域有广泛的应用。为生物学专业本科生开设"毛细管区带电泳同时分离BSA与单链DNA"开放实验,可以帮助学生深入理解CE的原理及应用,提高实验技能,激发对新技术新方法的兴趣。开放实验利用毛细管区带电泳(CZE)同时分离BSA与单链DNA,并对可能影响分离的多种因素如电压、温度、缓冲液pH等进行了讨论,确立了实验的优化条件。此实验可作为"仪器分析"和"色谱分析"课程中同时分析检测蛋白质和单链核酸的教学实验内容。     

高效毛细管电泳在临床检验中的应用

高效毛细管电泳 (highperformancecapillaryelec trophoresis,HPCE)是八十年代发展起来的分离分析技术 ,其具有分离效率高 (理论塔板数 10 5～ 10 6 )、灵敏度高 (可达fmol水平 )、应用范围广 (从无机离子、有机分子到生物大分子蛋白质、核酸 ) ,分离时间短 (一般不超过 4 0min)、需要样品体积小 (一般为nL级 )、柱子成本低、分离模式多等诸多优点。该技术的发展 ,为临床检验提供了新的分离分析技术 ,并迅速成为非常活跃的领域 ,在临床检验方面占有重要地位。毛细管电泳 (capillaryelectrophoresis,CE)主要有六种分离模式 :毛细管区带电…     

盐类水解演示实验的改进

一、用广范pH指示液代替石蕊,它在中性溶液中为浅绿色,在弱酸性溶液中为浅黄色,在弱碱性溶液中为浅蓝色。此种颜色即使不用白背景,在教室后排学生也可清楚分辨。(学生没有见过广范pH指示液的变色情况,可预先做好弱酸弱碱溶液的比色试管供对照。) 二、不预先配成溶液,而是先将四个试管中加等量蒸溜水,并各滴加广范pH指示液三     

蛋白质稳定性分析仪样品管的再生方法及成效

多参数蛋白质稳定性分析仪是一款非常实用的蛋白质稳定性研究工具,其样品管由16个高光亮的石英毛细管组成,单价高于750元。为了降低使用成本,该文开发了一种样品管的再生方法,并取得了良好的再生成效。该文旨在探讨不同pH值的酸碱溶液作为再生剂对4种不同蛋白质溶液样品和同一蛋白质溶液样品的4种不同质量浓度梯度的稳定性数据的影响,结果表明,pH值为11.0的氢氧化钠碱性溶液可作为优选再生剂。经过5次再生后,变异系数均小于5.00%,且最优值小于1.00%。这一再生方法不仅可将最终样品管的使用成本降低到原来的16.67%,还为毛细管的再生提供了新的途径。     

从一道生物学高考试题谈电泳

电泳技术广泛用于核酸、蛋白质等成分的分离和鉴定.高考试题借助电泳结果,考查核酸和蛋白质有关知识内容,本文对近年与电泳有关高考试题进行解析,以期为理解掌握电泳有关试题提供帮助.     

一道有趣的化学题——有关稀溶液中pH值的计算

教学中曾有学生提出这样一个问题:某溶液的[H~ ]=10~(-6)M,若把该溶液用水冲稀100倍后,溶液的pH值等于几?溶液呈何性?问题一提出,就引起学生广泛的兴趣。对于这一问题,若解答为当冲稀100倍后,[H~ ]=10~(-8)M,故pH=8,则显然是错误的。如果这样,岂不是酸溶液由于冲稀变成碱溶液了吗?同样对于用纯水稀释pH=5的盐酸到1000     

溶液酸碱性与pH中考题型归类例析

一、物质的酸碱性与pH大小相互判断例1 将氧化钠、氯化钠、三氧化硫分别溶于水,依次得到A、B、C三种溶液,它们的pH由小到大的顺序为--(用A、B、C表示,下同),分别向这三种溶液中滴入紫色石蕊试液,显红色的是溶液。