实时荧光定量PCR应用技术综述

实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)于1992年由Higuchi等人第一次报告:使用EB加入PCR反应体系,经改装的带有CCD的PCR仪检测样品的荧光强度,它的优势性决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法.而且也是一个能对核酸分子进行精确定量的有力工具.随着分子生物学技术的不断发展,rt-PCR技术取得了突飞猛进的发展,也由此诞生了许多与此技术相关的新的分支学科,极大的推动了分子生物学的发展.     

实时荧光定量PCR应用技术综述

实时荧光定量PCR（real—time quantitative PCR）1992年由Higuchi等人第一次报告：使用EB加入PCR反应体系，经改装的带有CCD的PCR仪检测样品的荧光强度，它的优势性决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法，而且也是一个能对核酸分子进行精确定量的有力工具。随着分子生物学技术的不断发展，rt—PcR技术取得了突飞猛进的发展，也由此诞生了许多与此技术相关的新的分支学科，极大的推动了分子生物学的发展。     

分子生物学技术在食源性致病菌检测中的研究进展

分子生物学技术作为生命科学中发展最为迅速的学科之一,其对致病菌检测产生的影响越来越深远。目前,食源性致病菌的检测正从传统的培养方法向分子水平方法改进。我们主要介绍了多重PCR,DNA指纹图谱技术,核酸探针技术和基因芯片技术在食源性致病菌检测方面的最新研究进展。     

影响食品安全的食源性致病菌快速检测技术研究进展

食源性致病菌是影响食品安全的主要因素之一。传统的以培养为基础的检测方法操作复杂、特异性不强、所需时间长,而近年来发展起来的免疫学方法及分子生物学方法广泛应用于食源性致病菌的检测,克服了传统检测方法的不足。目前常用的免疫学方法主要包括ELISA、免疫磁性分离技术和免疫胶体金技术等;分子生物学方法则主要有依赖PCR的DNA指纹图谱技术、多重PCR、基因芯片、定量PCR和NASBA等技术。     

免疫PCR技术及进展

随着聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)技术的发展,对于核酸的超灵敏检测已成为常规手段,检测能力已经达到单分子水平;但是蛋白质的常规检测,例如酶联免疫吸附实验(ELISA)技术,检测限也仅仅达到1×10-18mol,与超灵敏检测存在相当差距。免疫PCR方法(immunopolymerasechainreaction,immuno-PCR)是SanoT,SmithCL和CantorCR等于1992年将免疫学反应和PCR技术相结合而创建的一种新的检测技术,同时具有抗原-抗体反应的特异性和PCR扩增技术的高效性。它运用P C R强大的扩增能力来放大抗原-抗体特异性反应的信号,使实验中只…     

PCR技术简介

现代生物技术在近20年的发展中受到了各方人士的普遍关注，更有许多专家将21世纪称为生命科学的世纪，将现代生物技术产业称为21世纪的朝阳产业。而PCR技术是现代分子生物学和生物丁程技术的灵魂，PCR技术已经成为遗传与分子分析的根本性基石。PCR技术操作简便，结果可靠，被世界各国广泛应用于医学、农业、考古学，甚至是刑侦方面。本文简要介绍了PGR技术的原理、反应组分及应用中常见问题。在农业方面，PCR技术作为分子植物育种实验室的技术平台具有较好的实用性。在西藏自治区，分子植物育种方法尚未起步。本文旨在向大家简单介绍PCR技术，以期一问探讨在西藏这个种质资源丰富地区的常规分子生物学及生物丁程技术的应用。     

DAN芯片在医学上的应用和发展

基因是生物体的遗传物质 ,其化学本质是 DNA(脱氧核糖核酸 ) ,每一个核酸分子是由数个或更多的碱基单体组成的线性大分子结构。分子生物学的研究证明 ,核酸分子中的碱基具有相互配对的特性。当一个核酸分子与另一个核酸分子的碱基有相对应的排列关系 ,那么这两个核酸分子就可以稳定地组合起来 ,这就是所谓的分子杂交。1　生物芯片的分类生物芯片主要包含基因芯片和肽芯片两大类 ,是利用生物大分子间具有特殊相互识别的能力而发展起来的。由于尚未形成主流技术 ,生物芯片的形式非常多 ,以基质材料分 :有尼龙膜、玻璃片、塑料、硅胶晶片、微…     

DNA芯片在医学上的应用和发展

基因是生物体的遗传物质,其化学本质是DNA(脱氧核糖核酸),每一个核酸分子是由数个或更多的碱基单体组成的线性大分子结构.分子生物学的研究证明,核酸分子中的碱基具有相互配对的特性.当一个核酸分子与另一个核酸分子的碱基有相对应的排列关系,那么这两个核酸分子就可以稳定地组合起来,这就是所谓的分子杂交.     

大田种子纯度检验技术分析

最近的几年当中,伴随着生化分析与分子生物学等技术迅速的发展,农作物种子的纯度检验方法也从原来的外观形态检测法发展到了生理、生化以及分子检测的水平上了。种子纯度的检验方法当今常用的有形态、蛋白质电泳以及DNA分子标记这三种技术检验的方法。     

分子生物学教学改革探索

分子生物学是21世纪生命科学中最具活力的学科之一,它在分子水平上阐述蛋白质与蛋白质、蛋白质与核酸的相互作用,阐述基因表达及调控的机理.分子生物学在生物学教学中占有重要位置,为与此相适应,笔者在多年从事生物化学与分子生物学教学的基础上,开展了分子生物学教学改革的初步探索.从教学改革的方案、教学大纲、教材、教学方法和手段、教学考核等诸多方面着手,构建了一种适合新时代人才培养需求的分子生物学教学体系,并在教学中获得初步成效.     

DNA芯片—21世纪的新技术

ＤＮＡ芯片技术是９０年代期发展起来的分子生物学新的研究工具。它利用照相平板印刷,寡核苷酸合成以及微加工技术制成含有高密度探针的芯片,与放射性同位素或荧光标记的待测ＤＮＡ样品进行分子杂交,通过计算机检测技术,用于分析ＤＮＡ多态性、发现新基因及基因表达差异等领域。     

科技杂志要览

核酸定量技术及其在生物检测中的应用Review on the theory and applications of quantitativetechniques of nucleic acid摘要对目前主要的核酸定量方法(分光光度法、荧光染     

分子生物学技术在医学检验中的应用进展

分子生物学技术是发展中的医学技术,技术质量虽然还有待提高,但其发展的速度确是新兴生物学技术中发展最快的。分子生物学技术的快速发展,在一定程度上大大提高了医学检测技术的工作效率,丰富了人们对生命的更细致了解,推动了医学检测领域的快速发展。本篇文章主要介绍了分子生物学技术,并仔细研究了分子生物学技术,在发展中存在的问题及发展现状,与此同时具体探讨了分子生物学的生物传感器技术。     

分子生物学技术在病原微生物检验中的应用

进入21世纪以来,感染性疾病仍然是危害人类健康的重大隐患,WHO宣布,近年来新发现29种新病原体,而且出现了一些耐药性菌株,给临床诊断和治疗带来了很大的困难.因此,研究和发展各种病原微生物的分子生物学检测技术,从分子水平准确确认与检测病原体,对感染性疾病的治疗和预后有重要意义,本文就分子生物学技术在病原微生物诊断中应用作一简要概述.     

分子生态学及其在微生物生态研究中的应用

分子生态学是分子生物学实验技术应用于生态学研究而产生的一门新兴学科,它的产生为微生物生态学研究提供了一个新的研究方法,开拓了新的研究领域,在研究微生物生态系统结构、功能的分子机理以及微生物与非生物环境之间相互关系等方面显示了巨大的潜力,推动了微生物生态学进入一个新的发展时期。本文就分子生态学的概念以及在微生物生态研究总所用的主要技术方法进行了简要综述。     

人乳头瘤病毒核酸分型定量检测试剂盒的研发与评估

目的:评价人乳头瘤病毒核酸分型定量检测试剂盒(荧光PCR法)的检测性能及临床有效性。方法:开发一种用于检测人乳头瘤病毒核酸分型定量的检测试剂盒,验证最低检测限、准确度、精密度等性能指标,同时通过与同类已上市试剂盒的临床一致性评价确认该方法的灵敏度和特异性,考察试剂盒对HPV16型病毒载量检测的临床意义。结果:研制出的试剂盒各项指标均符合要求:试剂盒检测灵敏度较高,经确认和验证过程确定其最低检出限为20 copies/反应;不同HPV型别的分型以及HPV16型载量检测的准确性高,报告量值的线性范围宽;检测与人乳头瘤病毒感染部位相同、症状相似或序列相近的病原体,均未出现交叉反应;临床样本中常见的内源性及外源性干扰物质对试剂盒检测无干扰;经精密度验证,试剂盒检测中批内/批间的CV值均小于5%。经与临床已上市产品进行一致性评价,阳性符合率为91.2%;阴性符合率为98.2%;总符合率为97.7%;Kappa值为0.823。508例HPV16型阳性样本以病理检测结果作为金标准,通过病毒载量预测病理等级CINⅠ-Ⅱ及以上等级的准确率在72.44%。结论:该人乳头瘤病毒核酸分型定量检测试剂盒(荧光PCR法)的主要性能指标均表现良好,并与对比试剂及临床诊断标准有良好的一致性,是一种准确快速的诊断方法,具有较高临床应用价值。     

基于核酸的信息安全技术研究现状及发展建议

由于具有巨大并行计算能力、海量信息存储密度及超低能耗等优势,近年来,核酸分子在分子计算、数据存储以及信息安全等研究领域广受关注。特别作为基于数学难题的、传统的密码理论与技术的有益补充,以核酸为信息载体的数据隐藏、认证、加密等信息安全技术极富发展前景。文章在介绍基于核酸的加密、隐藏及认证技术原理的基础上,详细论述了该领域国内外的最新研究成果,并对我国如何发展基于核酸的信息安全技术的研究提出了建议。     

石英晶体微天平-环介导快速检测大肠杆菌O157特异基因方法的建立

目的:建立原位石英晶体微天平(QCM)-环介导恒温扩增(LAMP)快速检测大肠杆菌O157特异基因的方法。方法:在环介导恒温核酸扩增(LAMP)技术平台引入石英晶体微天平(QCM)技术,采用巯基化试剂分子组装方法,将LAMP反应体系中的4个引物之一固定于QCM电极上,在安装所述电极的QCM检测池中配置O157 LAMP反应体系进行环介导恒温核酸扩增,用QCM仪器在线检测频率变化,判断LAMP反应是否发生,进而判断体系中是否存在O157特异基因。结论:该方法检测O157特异基因特异性强、灵敏度高,并且操作简便,有望发展成为快速检测O157特异基因的有效手段。     

T-Linker PCR技术

1993年凯利·穆利斯因为发明PCR技术而荣登诺贝尔颁奖台。什么是PCR?它是指“DNA聚合酶链式反应”(polymerase chain reaction, PCR), 其原理是:在存在DNA模板、引物、dNTP、适当缓冲液的反应混合物中,在热稳定DNA聚合酶的催化下,对一对寡核苷酸引物所界定的DNA片段进行扩增。说得简单些,就是一种DNA分子的特异扩增技术,即将微量的特异DNA分子进行成倍扩增。PCR技术最大的优点在于它能     

植物病毒病与生物技术的应用

尽管基于分子生物学的新技术有助于植物病毒性疾病的检测和控制,但是哪里生长作物,这类疾病就会给哪里造成损失。单克隆抗体技术和核酸杂交技术为鉴别病毒提供了有效的新方法。而遗传工程正在创造抗病毒病的崭新性质,这些性质可以被整合到现存农作物的变种中。