南美白对虾健康养殖新技术

南美白对虾是我国重要水产养殖对象.介绍了南美白对虾的健康养殖新技术,包括新场的建设与清整工作,老池的清整工作,虾苗选择,虾苗的健康培育,成虾的饲料投喂,成虾的病害防治和日常管理等措施.     

南美白对虾人工育苗高产技术

通过对南美白对虾育苗工艺技术与生产设施的改进,提高无节幼体投放密度为100万只-120万只／立方米,使平均单t位水体出苗量达30．2万尾／立方米。     

南美白对虾的高产养殖技术

本文就池塘养殖南美白对虾的技术提出几个必备条件及相关的注意事项，总结出了一套较为实用的养殖经验。     

南美白对虾虾头的营养成分分析及评价

以南美白对虾虾头为原料,对虾头中的水分、脂肪、蛋白质等营养成分的含量及氨基酸组成进行了分析,结果表明:虾头的蛋白质质量分数为13．80％,脂肪质量分数为2．80％,富含脂溶性维生素E和A,矿物质中的Ca含量较高,甲壳质的质量分数为18．5％。虾头的氨基酸组成中,必需氨基酸质量占氨基酸总量的41％,氨基酸价为73,Asp、Glu等呈鲜味的氨基酸含量较高,蛋白质营养价值高。     

不同贮藏温度对南美白对虾黑变的影响

在低温条件下,微生物的生长会受到抑制,虾体内各种反应酶活力也处于一个较低的水平,能够在一定程度上维持对虾捕获时的品质.通过测定细菌总数和K值等生化指标,结合对南美白对虾的感官评价,对不同贮藏温度下南美白对虾的黑变进行研究.微生物增长、总挥发性盐基氮(TVBN)和K值变化与南美白对虾黑变的关系显示,南美白对虾在0℃、4℃、8℃条件下较适宜贮藏,时间分别不能超过36h、24h和12h.     

海产和淡水养殖南美白对虾肌肉中无机元素的含量比较

应用石墨炉和火焰原子吸收光谱法,对海产和淡水养殖南美白对虾中的13种无机元素进行了比较分析;探讨了基体改进剂对实验效果的影响及仪器工作的最佳条件;实验结果表明,海产和淡水产虾体中均未测出Co;Pb、Cd含量均低于国家水产品卫生标准;除Na外,淡水养殖南美白对虾中K、Ca、Mg、Fe、Cu的含量均高于海产．两者虾体中Zn、Cr、Mn、Ni的含量相当,火焰法的回收率为90．67—109．00％,RSD≤2．21;石墨炉法回收率为90．50—107．45％,RSD≤3．67（n=3）．     

南美动物园

2000万年前,南美洲一直是一个被隔离了的大岛,产生了许多独特的动物。     

南美斑潜蝇发生危害的特点观察

南美斑潜蝇是从国外传入的一重要害虫,已在国内数省发生,并对蔬菜和花卉生产造成了严重损失.通过室内研究和野外调查,初步掌握了南美斑潜蝇在莱阳一带发生危害规律和各个虫态的危害特点,发现不同寄主植物被幼虫危害后的症状有差异,化蛹部位在不同寄主植物上的分布也不一样.成虫在6月中上旬有个日活动高峰期,为5:30～7:30.     

临翔南美拉祜族迁徙史考析

综合流传于南美拉祜族民间的口承文化和相关史料,对其迁徙历史进行考辨,可以获知:如今临翔区政府所在地之"勐缅密缅"为其所开辟,其先民在此地曾处于以农耕为主的发展兴盛时期。在经历具体路线为:"今楚雄州——今大理州洱海地区——今临沧市临翔区即"牡缅密缅"——今临沧市双江县、思茅市澜沧县等地——部分迁徙至缅甸等东南亚国家"由北至南的迁徙后,南美拉祜族先民方开始出现分支和衰退的情形。     

南美蟛蜞菊在煤矿废弃地的栽培与应用研究

本研究以南美蟛蜞菊Wedelia trilobata为实验材料,选择煤矸石土进行栽培试验研究,选择普通有机土作对照,在栽培期间定期对南美蟛蜞菊的鲜重、生长速度、新芽数、新叶数、叶色等指标进行观察测定。实验结果表明：南美蟛蜞菊在煤矸石土生长40d时叶色深绿;新增茎节数与有机土植株之比为31：48,新叶数与有机土植株之比为96：182,生物量（鲜重）没有出现显著差异。说明南美蟛蜞菊在煤矸石土栽培有良好的生长适应性。适宜用于煤矸石土植被恢复和重建材料．     

凡纳滨对虾铁蛋白基因的克隆与表达

以凡纳滨对虾为研究对象,通过RT-PCR技术扩增出铁蛋白（Ferritin）基因,经特定的酶切（Notl,Smal）后插入到表达质粒pGEX-4T-2上构建表达载体,重组质粒转化大肠杆菌．经菌落PCR和质粒双酶切鉴定确认,证实成功地构建了对虾铁蛋白基因的原核表达载体．再对重组菌用IPTG诱导表达,采用Glutathione Sepharose4B亲和层析得到目的蛋白用于制备抗体,为研究铁蛋白在对虾抗病毒免疫中的作用奠定基础．     

辛基酚暴露对凡纳滨对虾NAGase的活力影响

以凡纳滨对虾为研究对象,让其暴露在含0,5,15,45,135μg/L辛基酚（OP）的养殖水体中,暴露24,48,72,96,120 h后取样,分析测定凡纳滨对虾壳膜与内脏 NAGase 比活力的变化．结果表明,水体 OP 对对虾壳膜 NAGase比活力基本起激活作用．暴露72 h内,壳膜 NAGase比活力无显著性变化;暴露96 h时,5,15,135μg/L OP均对虾壳膜 NAGase 比活力起极显著激活作用（P＜0．01）,45μg/L OP 对虾壳膜 NAGase比活力起显著激活（P＜0．05）;暴露120 h时,15,135μg/L OP 对虾壳膜 NAGase 比活力仍表现为显著性激活作用（P＜0．05）,但5,45μg/L OP 对壳膜 NAGase 的比活力影响无显著性．而水体 OP 对虾内脏 NAGase比活力基本起抑制作用．在15μg/L OP体系下暴露24 h,内脏NAGase极显著下降（P＜0．01）,其他 OP浓度下无显著性变化;不同浓度下暴露48 h,对虾内脏 NAGase比活力均出现极显著下降（P＜0．01）;5μg/L OP体系下暴露72 h,对虾内脏 NAGase比活力无显著性下降,其他 OP 浓度下的对虾内脏 NAGase 比活力均出现极显著下降（P＜0．01）;15,135μg/L OP 体系下暴露96 h,内脏 NAGase 比活力也分别出现极显著（P＜0．01）及显著性（P＜0．05）下降．可见,OP暴露对对虾生长发育会产生影响．     

凡纳滨对虾低盐度高产虾池理化因子研究

2002年9月至2003年9月,对珠海市凡纳滨对虾低盐度淡化高产养殖虾池环境理化因子及其变化进行调查研究,虾池水体盐度在1-6,平均水温28．2℃,透明度20 cm,溶解氧5．6 mg·L-1,pH值8．8,COD值23．38 mg·L-1;虾池无机氮含量相对低,氨氮平均含量为0．92 mg·L-1,亚硝基氮为0．11 mg·L-1,氨态氮为主要存在形式,无机磷含量较高,平均为7．7 mg·L-1．除水温外,虾池水体无机盐、溶解氧、pH的变化主要与人工调节有关．底质有淤泥的老化虾池水体pH、氨氮、COD值均比无淤泥虾池高,清淤可明显降低氨氮的含量．低盐度高产虾池环境理化因子的特点为高水温、高溶氧、高pH和高COD及低透明度,中后期养殖水体环境富营养化严重．     

对虾白斑综合症病毒囊膜蛋白Vp28基因的克隆、表达及蛋白纯化

以对虾白斑病毒DNA为模板扩增出Vp28基因,经限制性内切酶（SmaI,Not I）酶切后按正确的读码框顺序插入到pGEX-4T-2表达载体上,重组质粒转化大肠杆菌,经菌落PCR和质粒双酶切鉴定、序列测定确认,证实成功地构建了Vp28基因原核表达载体．转化菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示有与预期大小约52kD相吻合的融合蛋白带,18℃诱导24h后获得了可溶性表达的目的蛋白,采用Glutathione Sepharose 4B亲和层析对重组蛋白进行纯化,获得了纯度很高的目的蛋白．     

日本对虾Rab基因的克隆、结构分析与重组表达

通过3′RACE和5′RACE获得对虾Rab基因(命名为PjRab)的cDNA全长,其ORF为636bp,编码212个氨基酸.序列分析发现,PjRab具备Rab蛋白的基本特征,但在C-端与已知的Rab蛋白不同,可能是一种新的Rab蛋白,这是首次在海洋无脊椎动物体内克隆到该基因.对该基因进行了原核表达,并得到了有活性的表达产物.     

人铁蛋白基因的克隆与原核表达

通过PCR技术扩增出人铁蛋白基因,经酶切后与表达载体质粒pGEX-4T-2连接,重组质粒转化感受态大肠杆菌,利用菌落PCR、质粒双酶切、测序,证实成功地构建了人铁蛋白基因表达载体,利用IPTG对重组菌进行诱导表达,通过尿素洗涤纯化目的蛋白用于制备抗体．     

假单胞茵产弹性蛋白酶基因的克隆与表达

从假单胞菌（Pseudomonassp．）XZG36中克隆弹性蛋白酶基因,构建原核表达载体,实现其在大肠杆菌（Escherichiacoli）中的高效表达,并对表达产物进行酶学性质分析,为微生物发酵生产弹性蛋白酶奠定基础．以假单胞菌基因组DNA为模板,PCR扩增弹性蛋白酶基因,并将其开放阅读框（0RF）克隆至融合表达载体pET30a（＋）进一步IPTG诱导表达;表达产物经His·Bind亲和层析纯化后对弹性蛋白酶进行酶学性质分析．实验成功克隆了弹性蛋白酶基因,DNA基因片段为1672bp、编码497个氨基酸残基的多肽,与预计长度相符合;实现了其在E．coli中的高效表达,表达量约占菌体总蛋白的20％;经SDS-PAGE分析,相对分子质量为48000,与预期的一致;提纯后的表达蛋白SDS-PAGE分析可见单一条带,纯度可达92％以上．表达蛋白具有良好活性．     

肉鸡IGF-I基因mRNA的时空表达模式

采用实时荧光定量PCR技术,以β-actin为内参,检测了白羽AA肉鸡在4周龄时其胸肌、腿肌、脂肪、心、肝、脾、肺、肾、腺胃、肌胃、肠、脑共12个组织和在1日龄及1、2、3、4、5、6、7周龄时腿肌、肝脏、脂肪中类胰岛素生长因子-I（IGF-I）的表达量变化。结果显示,除肾外其余组织均表达一定量的IGF-I mRNA表达,且在肝脏中表达量显著高于其他组织;腿肌6周时IGF-I mRNA表达量达到最大值,其余各时期也都高于1日龄时的表达;肝脏中表达量最高时期是3周,然后又呈下降趋势;脂肪中在3周时表达量最高,然后其表达量随年龄增长而逐渐下降。本实验结果揭示了生长早期肉鸡IGF-I基因mRNA的时空表达特征,为进一步研究生长轴相关基因对肉鸡早期生长发育的调控作用奠定了基础。     

赤眼鳟Myf5基因的克隆、序列和表达分析

生肌调节因子（MRF）基因家族的表达决定着肌细胞的命运,并控制其增殖和分化．Myf5是生肌调节因子MRF基因家族中的一个成员．本文提取赤眼鳟肌肉总RNA,采用RT—PCR技术获得赤眼鳟Myf5基因的部分cDNA序列,共338bp,编码112个氨基酸,含有部分bHLH结构．通过同源性分析发现赤眼鳟Myf5基因编码区与草鱼的同源性高达97．34％．半定量RT—PCR分析表明赤眼鳟Myf5基因在心脏和肾脏中表达量较高,鳃和肌肉中表达量次之,肝脏、脑和肠中表达量较弱．本结果为进一步研究该基因对肌肉生长发育的作用机理奠定了基础．     

绿僵菌Argonaute基因片段原核表达载体的构建及其表达

绿僵菌是一类广泛应用于生物防治的昆虫病原真菌.研究表明小RNA能够调控基因的表达,其中Argonaute基因在整个小RNA通路中发挥重要的作用.本研究通过RT-PCR的方法从绿僵菌中获得了Argonaute基因的部分功能片段,构建了其重组原核表达载体,将重组载体转化至大肠杆菌进行诱导表达;采用镍柱亲和纯化重组的目的蛋白并通过Western blot技术鉴定.结果发现：通过RT-PCR的方法获得长度约为950bp的基因片段;重组原核表达载体经诱导表达后,SDS-PAGE检测发现分子量约为34kDa的目的蛋白条带;诱导5h后蛋白的表达量最高,采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白,经Western blot技术检测,重组蛋白可与His-tag抗体发生特异性反应.该纯化重组蛋白的获得为将来绿僵菌Argonaute蛋白抗体的制备,并进一步通过该抗体获得绿僵菌体内的小RNA及其靶基因提供了基础.