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由O’Farrel等1975年建立的双向电泳技术是目前唯一能将数千种蛋白质同时分离与展示的分离技术。双向电泳的原理是，第一向进行等电聚焦(isoelectric focusing，IEF)，蛋白质沿pH梯度分离至各自的等电点；随后，再沿垂直的方向进行SDS—PAGE电泳，按分子量大小进行分离。样品经过电荷和质量两次分     

双向电泳技术

由O'Farrel等1975年建立的双向电泳技术是目前唯一能将数千种蛋白质同时分离与展示的分离技术。双向电泳的原理是,第一向进行等电聚焦(isoelectric focusing,IEF),蛋白质沿pH梯度分离至各自的等电点;随后,再沿垂直的方向进行SDS-PAGE电泳,按分子量大小进行分离。样品经过电荷和质量两次分离后,得到等电点和分子量的信息。电泳的结果不是蛋白质条带,而是点。在第一向等电聚焦电泳中,具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极,pH逐渐增大,由于蛋白质具有两性解离和等电点的特征,在碱性区域蛋白质分子带负电荷向阳极移动,直至某一pH位点时失去电荷而停止移动,此处介质的pH恰好等于聚焦蛋白质分子的等电点。同理,位于酸性区域的蛋白质分子带正电荷向阴极移动,直到在它们的等电点     

药物处理心肌缺血大鼠有效性的研究

现代生物学表明，所有生物性状的变化是基因表达变化的结果．双向电泳是目前蛋白质常规分析技术中分辨率较高的方法．采用双向电泳技术分析了正常大鼠、心肌缺血模型大鼠、药物处理后的大鼠的血清蛋白组的差异，从而探讨利用双向电泳技术分析药物处理的有效性．     

IEF/SDS PAGE双向电泳技术的建立

IEF／SDSPAGE双向电泳的高分离度是各种类型的单向PAGE无法比拟的．以Bio-Rad公司的PR0rrEANⅡxi2-D电泳系统为基础，初步研究了IEF／SDSPAGE双向电泳技术建立的条件．     

白质组学研究的相关技术进展

蛋白质组学的特点是采用高分辨率的蛋白质分离手段,结合高效率的蛋白质鉴定技术,全景式地研究在各种特定情况下的蛋白质谱。本文就蛋白质组学研究中的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳、质谱技术和蛋白质芯片技术的研究进展进行了综述。     

大肠杆菌可溶性蛋白质双向电泳条件的建立

本文研究的主要目的是建立大肠杆菌可溶性蛋白质组的双向电泳技术,以等点聚焦为第一向,SDS—PAGE为第二向进行双向电泳,并对样品处理方式、蛋白上样量和染色方法等关键因素和环节进行了比较研究,通过实验条件的筛选和优化获得了较满意的双向电泳图谱。采取的方法具有较高的分辨率和重复性,为进一步研究其蛋白质组学奠定了基础,成功地用于了本科实验教学中。     

一种适于本科实验教学的双向电泳技术体系

双向电泳技术是当前蛋白质组学研究中的重要技术。设计"双向电泳检测热休克处理对细菌蛋白表达谱的影响"的实验,以PGEX-4T-2大肠杆菌中可溶性总蛋白为研究对象,采用双向电泳技术筛选热休克处理后有差异表达的蛋白。实验获得了稳定性较高、分辨率和重复性较好的电泳图谱,建立了一种适于本科实验教学的双向电泳技术体系。通过该实验,学生可以掌握双向电泳技术的基本原理、实验方法以及蛋白提取的一般思路与方法。     

不同生境美洲商陆(Phytolacca americana L.)根系差异表达蛋白筛选

某铀尾矿区生长着大量美洲商陆(Phytolacca americana L.),目前还未见美洲商陆耐受及富集铀相关蛋白质组学研究报道。为了找到铀耐受及富集表达相关蛋白,建立了铀尾矿区和对照区2种不同生境美洲商陆根系蛋白质组研究技术。通过全蛋白质制备条件优化、2DE电泳条件摸索以及染色方法选择,得到了重现性好、分离效果和清晰度都很高的美洲商陆根系双向电泳差异凝胶图谱。经软件分析,筛选出了铀耐受及富集相关蛋白24个,上调表达11个、下调表达13个。     

蛋白质芯片

蛋白质芯片是一种研究蛋白质组学的新技术，是高通量、微型化和自动化的蛋白质分析技术。它可以用于构建蛋白质表达谱，进行受体一配体检测，靶目标和靶向药物筛选，蛋白质相互作用研究，肿瘤诊断等。     

层析教学实验的创新研究

在生命科学研究和生物制药过程中,存在着大量的蛋白质、核酸和多肽等生物大分子的分析、分离和纯化工作。高效快速的分析、分离和制备生物目标物技术是从事生命科学领域必须要掌握的基本技术。层析技术是目前生化分析中功能最为强大的分离纯化工具之一,它既可以用于少量物质的分析鉴定,又可用于物质的大量分离纯化和制备。因此,以培养学生掌握分离技术方法为主要目的的层析实验是高校生化实验必做实验之一。本研究针对传统层析实验技术存在的只能用单一波长（280nm或254nm等）对已知组分进行检测等问题进行讨论,提出实现双波长（如280nm和254nm）层析实验系统的方法。     

大肠癌的差异蛋白质组学研究

文章通过初步观察大肠癌患者癌组织与正常成人肠黏膜蛋白质的差异表达,为进一步探讨大肠的分子机制奠定基础。应用蛋白质组学的双向电泳技术,对大肠癌患者与正常成人肠黏膜蛋白质表达进行比较,观察其差异点。得到分辨率和重复性均好的大肠癌患者与正常成人直肠黏膜蛋白的双向凝胶电泳图谱,发现二者之间在表达上有明显差异,差异表达蛋白质点数共26个差异点,其中在大肠癌组织中表达上调点11个,下调的点15个。共分析了10个差异蛋白点,在10个蛋白质点中有5个蛋白质点得到鉴定。结论是大肠癌原发灶和正常肠黏膜蛋白质组表达有显著差异,HSP27蛋白、S100A9蛋白和GST-π蛋白表达上调,GRP75蛋白表达下调有可能与大肠癌发生相关。     

例析电泳条带相关问题

<正>一、电泳条带与蛋白质结构例1为了研究蛋白质的结构与功能，常需要从生物材料中分离纯化蛋白质．某同学用凝胶色谱法从某种生物材料中分离纯化得到了甲、乙、丙3种蛋白质，并对纯化得到的3种蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，结果如图1所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）．已知甲的相对分子质量是乙的2倍，且甲、乙均由一条肽链组成．回答下列问题：     

双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究进展

双向聚丙烯酰胺凝胶电泳按等电点和分子量对蛋白质进行分离,具有很高的分辨率,已经成为蛋白质组研究中的核心技术之一。本文对双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的原理、检测步骤进行介绍,并对其存在问题与发展进行简要介绍。     

利用贝类废弃物制造水解动物蛋白

以扇贝加工废弃物——扇贝边为原料，采用枯草杆菌蛋白酶、胰蛋白酶、Flavourzyme对其进行深度水解；然后应用超滤技术对酶解液进行分离，除去未水解的蛋白质、细菌、微细的颗粒成分等物质，得到富含氨基酸和小分子肽的超滤透过液；再应用反渗透技术进行预浓缩，以除去其中过多水分；最后，对该浓缩液进行减压浓缩或喷雾干燥，即得到浓液状或粉状的水解动物蛋白产品。其粗蛋白含量为66．88％，氨基酸态氮含量为6．96％，氨基酸态氮／总氮65．05％，均优于国外同类产品。     

双杂交系统的改进及其应用

自从Field和Song1989年初步建立了酵母双杂交系统以来，双杂交技术特别是酵母双杂交技术得到了长足的发展，衍生出了单杂交系统，三杂交系统，双诱饵系统等一系列相关的技术，使其真正成为分子生物学研究中广泛应用的技术手段，这些技术的应用有力地推动了蛋白质与蛋白质，蛋白质与小分子多肽，蛋白质与DNA分子间相互作用的研究，特别是在后基因组时代，对生命活动中蛋白质相互作用的网络信息研究，双杂交系统将发展更重要的作用。     

蛋白质芯片技术在肿瘤蛋白质组学研究中的应用及进展

蛋白质芯片技术是一种快速、高效、高通量、微型化和自动化的蛋白质分析技术。目前，它已成为肿瘤蛋白质组学研究的重要工具之一。它能洞察肿瘤细胞、组织和生物体蛋白质含量的细微变化，且能精确分析某一特定蛋白质的理化性质。就近年来蛋白质芯片的发展及其在肿瘤蛋白质组学研究中的应用做了简要的叙述，提出了该技术存在的问题，并对其发展前景进行了展望。     

离心技术在高中生物学实验中的应用

离心技术是现代生物学技术中常用的一种方法,用于细胞、血清、蛋白质、核酸及细胞亚显微结构的分离、提纯或浓缩等,尤其是超速冷冻离心法已经成为各大分子生物学实验室研究人员最常用的技术方法。根据离心原理的不同,常见离心法为差速离心法、密度梯度区带离心法。     

微波膨化大豆分离蛋白的工艺研究

本文以微波膨化产品的膨化率作为指标，对大豆分离蛋白的微波膨化工艺，如蒸煮时间、揉捏时间、物料的几何形状及尺寸，以及微波的功率以及处理时间等因素进行了深入的研究。另外，还就蛋白质物料的微波膨化和加热媒介共同作用进行了研究。     

生物技术实践新颖试题解析

生物技术实践是生物选修内容,高考全国新课标卷中有一道选做题,其主要内容有：微生物的分离和培养技术;酶在食品制造和洗涤方面的应用;果酒、果醋的制作方法与应用及腐乳的制作;花药离体培养技术及植物组织培养;生物材料中某些特定成分的提取,蛋白质的分离等．相关的高考试题与生产生活联系密切,     

现代酶工程技术概述

通过介绍酶的改造、分离、纯化以及酶催化工程等现代常用的酶工程技术,认识蛋白质工程和催化工程在酶制剂生产中的作用,以期为相关内容的教学提供参考。