提高离体蛙心灌流实验成功率的方法研究

离体蛙心灌流实验是生理学中一个重要的实验项目.近年来的教学实践表明,插管过程导致蛙心受损、插管内血液凝固堵塞、动脉切口位置不当等是易导致该实验失败的主要原因.选择合适的实验动物及插管,以及插管方法的改进、控制灌流液温度等措施可有效提高离体蛙心灌流实验的成功率.     

动物生理学实验中的一蛙(蟾)多用的探讨

本文针对人体及动物生理学实验所面临的内容多、课时少、实验材料紧缺等问题,研究探讨了生理学综合性实验用一只蛙(蟾蜍)做多个实验的内容、方法、步骤。     

骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化及临床应用前景

骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）具有自我更新和多向分化潜能,在一定的诱导条件下可以向心肌细胞（cardiomyocytes,CM）分化。BMSCs能通过取代缺血坏死区的心肌细胞,在损伤区域形成毛细血管,修复损伤的细胞外基质,分泌多种细胞因子等作用机制来治疗心血管疾病。目前BMSCs在实验与临床的研究方面取得了初步的成果,为各种心血管疾病的治疗提供了一种全新的选择 并且在基因组织工程和分子生物学方面对BMSCs的应用与治疗心血管疾病做了更深层次的研究。为探索BMSCs成为治疗心血管疾病最有前途的＂种子＂细胞打下了基础。     

H2S对兔左心室心肌细胞电生理特性的影响

目的:探讨硫化氢(H2S)对兔左心室心肌细胞电生理特性的影响.方法:用标准微电极细胞内记录技术,观测硫化氢对兔左心室心肌细胞电生理特性的影响.观测指标:静息电位(resting potential,RP)、超射值(over-shoot,OS)、动作电位幅值(amplitude of action po-tential,APA)、0相最大除极速率(maximal rate of depolarization,Vmax)、复极20%、50%和90%时间(20%、50%and 90% of duration of action potential,APD20、APD50and APD90)及复极化平均速度(average rate of repolarization).结果:(1)用50μmol/L NaHS 灌流时,和正常对照组相比,APD50、APD90缩短(P＜0.01),复极化平均速度增快(P<0.05).(2)100μmol/L NaHS与对照组比较,APD50、APD90缩短(P＜0.01),复极化平均速度增快(P<0.05).和50μmol/L NaHS相比APD50缩短(P＜0.01)、APD90缩短(P＜0.05)、复极化平均速度增快(P<0.05).(3)200μmol/L NaHS、400μmol/L、1 000μmol/L NaHS可浓度依赖性的使 APA、RP、OS减小(P<0.01),APD20、APD50、APD90缩短(P＜0.01),复极化平均速度增快(P<0.01).结论:H2S可浓度依赖性的影响兔左心室心肌细胞电生理特性.     

蚌蛙蛭抗凝血蛋白的分离及抗凝血特性分析

以超速离心和肝素琼要和层析从蚌蛙蛭（Ｂａｔｒａｃｏｂｄｅｌｌａ ｋａｓｍｉａｎ）的粗提取液中分离到２抗凝血蛋白,抗凝血活性分析证明,这２种蛋白具有显著抑制凝血酶的活改天则不具有抑制凝在子Ｘａ的活性,亲和层析的蛋白洗脱峰与抑制凝血酶的活力峰相吻合,因此,蚌蛙蛭的抗凝血蛋白是属于凝再生产划笥的悌 血蛋白。本项研究结果为进一步进行蚌蛙蛭抗因蛋白抗凝血及其应用要下了基础,这是蚌蛙蛭抗凝血蛋白研究的首次报道     

仙茅多糖对离体蛙心生理功能的影响

为了研究仙茅(Curculigo orchioides Gaertn)多糖的药理作用,应用斯氏蛙心灌流法研究了仙茅粗多糖对离体蛙心功能的影响.结果表明,5μg/m L的仙茅粗多糖溶液对青蛙心脏无明显影响,浓度增加到10μg/m L时,心肌收缩幅度开始缓慢增大,二者呈现显著的量效关系;浓度继续增加到500μg/m L时,心率开始出现加快的现象,加至1000μg/m L时,心率随之加快到正常值的1.58倍;振幅稳定后,用任氏液冲洗,出现明显的心机能衰竭现象;推测仙茅粗多糖的作用类似于肾上腺素.结论:适当浓度的仙茅粗多糖可加强青蛙心脏收缩功能.     

当归对蛙心脏活动的影响

为了研究当归对蟾蜍在体心脏活动功能的影响,以蟾蜍为实验动物,利用BL-410生物机能实验系统,以蟾蜍心率、心搏最大收缩力、心搏平均收缩力和心肌电为指标,该药分设四个实验组进行实验.结果表明:当归片对蟾蜍心率没有显著影响,对蟾蜍心搏最大收缩力、心搏平均收缩力和心肌电产生显著影响,随当归片灌胃量的增加,先增大后减小.心搏收缩力与心肌电表现出显著的正相关性.由此获得基本结论:当归对心率基本无显著影响,但对心脏的收缩力和心肌电有影响,适当的用量有利于改善心肌功能,在心肌缺血损伤、心力衰竭情况下,有利于保护心脏.     

大鼠心室肌细胞的分离及其单通道钙电流的记录

采用Langendorff灌流、Worthington胶原酶法分离大鼠心室肌细胞,应用膜片钳制技术单通道模式记录大鼠心室肌细胞的钙电流,并进行膜片钳电生理学研究.     

蛙的栖息生境及保护

本文通过对三种蛙类的生境及营养生态位的初步分析,提出了保护蛙类资源的相应对策。     

科学家发现心脏肌体可自行修复

英国医学研究人员借助实验鼠实验发现,人工激活成年心脏内一种心外膜细胞,可实现受损心脏肌体的自行修复功能。     

茶多酚、茶多糖、红菇多糖对离体蛙心的作用

用6只牛蛙制备离体蛙心灌流,灌流液中添加1％的茶多酚、茶多糖、红菇多糖50～200μl,结果使蛙心收缩力分别增加84％（40％～169％）、46％（28．6%～70％）、89％（15．4％～289％）（P〈0．05或〈0．01）;三者对蛙心以正性变力作用为主,对心率无显著影响（P〉0．05）。     

瓯柑橘和柑橘皮类黄酮、水、醇提取液对离体蛙心的作用

以1mg/ml的柑橘和瓯柑橘皮类黄酮溶液、1%的柑橘皮和瓯柑橘皮水、乙醇提取液各0.1mL加入离体蛙心灌流液,结果使蛙心收缩力分别提高101.3±49.6（%）,94.0±25.2（%）,81.4±38.5（%）,93.9±34.0（%）,150.3±117.8（%）,165.1±113.5（%）;心率分别降低19.8±31.9（%）,22.1±22.3（%）,28.0±16.2（%）,28.5±20.8（%）,19.3±14.2（%）,23.0±24.3（%）（均P〈0.05）。说明柑橘和瓯柑橘类黄酮、柑橘皮和瓯柑橘皮的水、醇提取液对离体蛙心均有增强心肌收缩力和减慢心率作用,各药物的持续时间在2～12min之间。     

猪肺脏巨噬细胞的分离培养

提取分离猪肺泡巨噬细胞(PAM)、猪肺血管巨噬细胞(PIM)、猪肺间质巨噬细胞(IM)三种细胞并进行体外培养,采用免疫组化和流式细胞术进行细胞的异质性研究。无菌条件下通过支气管肺泡灌洗获取PAM,右心室插管经心脏行肺血管原位灌注的方法分离得到PIM,肺组织机械处理结合酶消化法(胶原酶IA)分离IM。显微镜下观察三种细胞的形态上的不同;免疫组化和流式细胞术检测细胞表型。三种巨噬细胞形态有明显的不同,PAM较大,表面粗糙,PIM和IM较小,并且细胞光滑;PAM细胞大多为CD163阳性,IM和PIM则CD86阳性较多。PAM、PIM、IM在形态和表型上存在异质性。     

低电压细胞破碎的微型装置设计与工艺

为减少样品的污染,简化样品提纯的步骤,提高细胞破碎率,设计并制作了一种低电压微型装置实现了细胞破碎。根据细胞破碎原理,设计了梳状微型装置电极模型,利用计算流体力学(Computational Fluid Dynamics,CFD)分析软件,对微型装置电极产生的电场进行模拟分析,运用了剥离工艺的标准光刻胶处理方法,在玻璃基底上制备了6对Ti/Pt微电极。采用幼仓鼠肾细胞(BHK21)对微型装置进行了实验测试。实验表明,BHK21细胞破碎的最佳电压为3 V。该装置采用微细加工技术,功耗低、体积小,低电压实现细胞破碎。     

流动注射微型电化学发光池的研制及性能研究

报道了一种自行设计和研制的新型流动注射电化学发光（EcL）池,并对该流动注射电化学发光池的结构和性能进行了优化,在发光试剂鲁米诺浓度5×10^-10mol／L-5×10^-8mol／L范围内,检测池ECL强度随浓度呈现良好的线性关系,相关系数为0．9998,检测下限可达10^-10mol／L．该器件可用于H2O2的流动注射检测,测定线性范围为1×10^-4至5×10^-3mol／L,相关系数为0．9993,检测下限为5×10^-5mol／L．考察该器件在评估葡萄（美国进口红提）籽核和肉质的抗氧化性能方面的应用,经换算得出它们的抗氧化性能;红提籽为121mg H2O2／g,红提肉为5．1mg H2O2／g．即红提籽的抗氧化能力明显强于红提肉．在实际样品测定中,该流动注射电化学发光池具有较好的重现性,它结合了电化学发光的高灵敏度和流动注射的实用性,操作方便．     

魔芋葡甘聚糖/聚乙烯吡咯烷酮水凝胶的制备及缓释性能研究

以魔芋葡甘聚糖（KGM）和聚乙烯吡咯烷酮（PVP）为原料,戊二醛（GA）为交联剂,合成了KGM／PVP半互穿网络水凝胶。通过红外光谱、X-衍射、SEM扫描电镜对水凝胶的结构进行了袁征,并且研究了KGM与PVP质量比、交联剂含量对水凝胶的溶胀度影响。在p14=2．2和pH=7．4条件下分别研究了交联度对溶胀动力学特性的影响,以及载药凝胶的体外释放行为。实验结果表明,KGM与PVP质量比对该凝胶的溶胀性能有一定的影响：KGM：PVP为1：1时,凝胶的溶胀度最大;随着交联剂含量的增加,凝胶的溶胀度、溶胀速率、药物的释放速率均逐渐降低;凝胶在pH=2．2时的溶胀度较高,溶胀速率、药物的释放速率均较快。     

H2S对兔离体心脏心率的影响

目的:探讨硫化氢(H2S)对兔离体心脏心率的影响.方法:用标准微电极细胞内记录技术,观测硫化氢对兔右心房心肌细胞动作电位频率的影响.观测指标:自发放电频率(rate of pacemaker firing,RPF).结果:(1) 用200μmol/LNaHS 灌流时,和正常对照组相比,RPF显著减小(P<0.01).(2) 400μmol/L NaHS与对照组比较, RPF显著减小(P<0.01).和200μmol/LNaHS相比,RPF显著减小(P<0.01).(3)以上使RPF减小的效应在NaHS灌流3～5min出现,10min时已经有显著减小(P<0.01),25～30min达到高峰.结论:H2S可浓度依赖性的影响兔离体心脏的心率.     

铜电极制备实验中电源装置的改进

介绍一种电源改进的装置，阐述其设计的原理、组装及使用方法等。该设备操作简便，省时省料。提高铜电极制备的效率。     

POE-g-MAH的制备及对铝的粘结机理分析

以聚烯烃弹性体(POE)为主体树脂,过氧化二异丙苯(DCP)为引发剂,马来酸酐(MAH)为主要单体进行熔融接枝反应制备了POE-g-MAH接枝物;该接枝物与其它材料和助剂等进行熔融共混,制备出粘接强度高的热熔胶。讨论了基体树脂、苯乙烯(St)与DCP质量比对接枝率的影响;采用扫描电子显微镜(SEM)和能谱(EDS)分析了剥离断面的形貌和化学组成,探讨了该热熔胶的粘结作用机理。结果表明:POE更容易与MAH进行接枝,当m(DCP)∶m(St)=1∶3,POE-g-MAH的接枝率最高;适量的POE-g-MAH接枝物能促使MAH基团向粘结面迁移,提高粘结强度。     

龙须菜抗氧化肽的制备及其体外抗氧化活性

为优化碱性蛋白酶酶解龙须菜蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,以二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基的清除率为指标,单因素试验考察了酶解温度、酶解时间、酶底比([E]/[S])和pH值对制备抗氧化肽工艺的影响,并在此基础上应用正交实验进行优化.结果表明,碱性蛋白酶酶解龙须菜蛋白制备抗氧化肽的最佳工艺条件为:酶解温度65℃、酶解时间150min、[E]/[S]9 000U/g、pH 8.0,在此条件下制备的龙须菜抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为77.44%±0.12%.体外抗氧化活性研究表明,抗氧化肽具有一定清除DPPH自由基、羟自由基、超氧自由基的能力,也有一定的还原力,但均弱于同浓度下的抗坏血酸.