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克百威单克隆抗体的制备及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验以人工合成的克百威免疫原免疫BALB/CF1小鼠,采用杂交瘤技术制备了5株能稳定分泌抗克百威单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用培养扩增后的各建株细胞诱导小鼠生长腹水.腹水效价达10^-6~10^-7。琼脂双扩试验表明各单抗蛋白均为IgG,抗体蛋白均为IgG2a亚类。用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单克隆抗体腹水,并测定抗体蛋白含量为3~8mg/mL;用SDS—PAGE进行纯度鉴定,电泳图谱均显示了IgG抗体及其重链和轻链条带,分离的抗体纯度在90%以上。对纯化的单抗5E2进一步做交叉反应试验,与其他氨基甲酸酯类杀虫剂残杀威、速灭威、灭多威、甲奈威、异丙威、仲丁威的交叉反应率分别为7.2%、4.5%、2.8%、7.9%、9.5%、8.9%,结果表明单抗5E2有较好的特异性。 相似文献
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为探不同离心力(转速)对抗体效价检测结果的影响,文章中以检测鸡新城疫抗体效价为验证试验,用100份鸡血液经不同离心力分离血清开展检测,结果表明抗体效价检测结果和离心力(转速)相关性不大,不同离心力分离动物血清对抗体效价检测结果影响不显著。 相似文献
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目的研究适合的蛋白纯化和病毒灭活工艺,制备静脉注射用人SARS特异性免疫球蛋白.方法采用低温乙醇和离子交换层析相结合的工艺进行分离纯化,在分离纯化过程中对血浆进行S/D病毒灭活,对原液进行纳米膜过滤去除病毒.对产品的SARS抗体效价、灭活剂残余含量进行检测,对血浆S/D病毒灭活工艺进行验证.结果产品的各项质量指标符合静脉注射要求,产品中SARS抗体效价经ELISA法检测为183,产品中灭活剂TNBP和Triton-X100的残余含量均<5.0 ug/ml.病毒灭活方法经验证可以有效灭活指示病毒.结论本蛋白纯化工艺可操作性强、产品质量稳定,为从突发病毒性疾病患者康复期血浆中小规模提取特异性免疫球蛋白提供了一种适合的方法. 相似文献
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目的:研究适合的蛋白纯化和病毒灭活工艺,制备静脉注射用人SARS特异性免疫球蛋白。方法:采用低温乙醇和离子交换层析相结合的工艺进行分离纯化,在分离纯化过程中对血浆进行S/D病毒灭活,对原液进行纳米膜过滤去除病毒。对产品的SARS抗体效价、灭活剂残余含量进行检测,对血浆S/D病毒灭活工艺进行验证。结果:产品的各项质量指标符合静脉注射要求,产品中SARS抗体效价经ELISA法检测为1:83,产品中灭活剂TNBP和Triton-X100的残余含量均〈5.0ug/ml。病毒灭活方法经验证可以有效灭活指示病毒。结论:本蛋白纯化工艺可操作性强、产品质量稳定,为从突发病毒性疾病患者康复期血浆中小规模提取特异性免疫球蛋白提供了一种适合的方法。 相似文献
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讨论了白云石的粒径、煅烧温度和时间对氧化镁产率的影响,以及硫酸铵浓度、反应温度和时间对钙离子去除效率的影响,并对联产硫酸钙(石膏)作了较深层的探究.实验结果表明:白云石为100目、煅烧温度为800°C、煅烧时间为1h时,得到的氧化镁纯度、转化率较高;利用14%硫酸铵溶液与煅烧产物在90°C条件下,反应1h,氨循环量为初始铵氨比为1:1.5,制备得到的.氢氧化镁的堆积密度为0.29g/cm3,纯度为98.06%颗粒呈片状结构,形貌规则,分散性较好。 相似文献
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本文对5种分泌抗霍乱肠毒素单克隆抗体的生物学性质作了较详细的研究。研究表明,4株抗CT-McAb细胞株经鉴定3 A_(10)株为抗AB单克隆抗体,而3H_7、3C_7、1F_8为抗B亚单位单克隆抗体。4株细胞株对数增殖期的群体倍增时间为19~21h。双扩散证明,上述单抗为IgG_1型抗体。腹水抗体经-30℃贮存5年,仍保持原有的各种抗体特性。细胞通过体外连续传代30代以上,复经液氮冻存2年后,仍能恒定地分泌单克隆抗体。腹水抗体经硫酸铵纯化,IgG_1纯度经PAGE电泳分离及CS-910双波长薄层扫描技术,并以电子计算机算出IgG_1纯度为95.063%,酶标记抗体对CT的检测具有较高的特异性和敏感性。 相似文献
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美国红鱼免疫球蛋白的分离纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
对灿烂弧菌灭活疫苗接种后的美国红鱼提取血清,采用硫酸铵沉淀和SephadexG-200凝胶层析结合的方法分离纯化出美国红鱼血清免疫球蛋白,并且通过SDS-PAGE对纯化蛋白的部分特性进行分析。结果表明,通过硫酸铵沉淀法可以沉淀血清中大部分的蛋白,电泳条带比较丰富,但仍然含有较多的杂蛋白,经过SephadexG-200凝胶柱层析方法分离,获得纯度较高的免疫球蛋白,经β—巯基乙醇处理后解离形成重链和轻链两个亚单位,分子量分别为69.2 kDa,29.5 kDa,表明美国红鱼血清IgM的分子量与硬骨鱼IgM的分子量范围(H链60~81kDa,L链20-30kDa)是一致。 相似文献
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本实验采用凝胶法来纯化人表皮生长因子,并定量测定了人表皮生长因子(hEGF)。人表皮生长因子与经过离子交换柱、SDSPAGE及凝胶图象扫描分析系统的标准品相互对比。结果表明,在SDS-PAGE凝胶上能够得到与标准样品hEGF一样清晰的单条带,得到的产品纯度可高于94%,检出限能够达到1ug/mL。本实验方法能够很好的在线检测出人表皮生长因子,同时本方法对其它蛋白质分离的在线检测也具有参考价值。 相似文献
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J. Pramanik A. N. Lodam C. M. Badole M. V. R. Reddy K. R. Patond B. C. Harinath 《Indian journal of clinical biochemistry : IJCB》2000,15(1):22-28
Trichloroacetic acid (TCA) solubilized and DEAE fractionatedMycobacterium tuberculosis H37Ra excretory-secretory (ES) antigen viz., Mtb EST DE1 and affinity purified goat antibodies to the TCA solubilized ES antigen
(Mtb EST) were explored in detecting tubercular antibody and antigen respectively in sera of bone and joint tuberculosis by
indirect and sandwich ELISA. Out of total 36 bone & joint tuberculosis cases, tubercular antibody was detected by indirect
ELISA in 30 patients (sensitivity 83%), while circulating tubercular antigen was detected by sandwich ELISA in 27 patients
(sensitivity 75%). Out of 34 non tubercular disease control cases, 10 patients showed positive reaction for antibody while
only 4 patients showed positive reaction for antigen. In another group of 34 healthy subjects who were screened, 4 individuals
showed positive reaction for tubercular antibody and 2 cases for antigen. This study shows that antigen detection assay using
affinity purified anti Mtb EST antigen antibody is superior with overall specificity of 91% as compared to antibody detection
assay with 75% specificity in bone & joint tuberculosis. 相似文献
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Swati Banerjee E Raji Nair Satish Kumar M. V. R. Reddy Bhaskar C. Harinath 《Indian journal of clinical biochemistry : IJCB》2001,16(2):203-206
Analysis of tubercular antibody, circulating free and immune complexed antigen (CIC-Ag) was done in confimed pulmonary tuberculosis
sera by ELISA, using ES-31 antigen and affinity purified anti ES-31 antibody. Twenty three of 25 (92%) tuberculosis sera were
positive for IgG antibody to ES-31 antigen. Using anti ES-31 antibody, free tubercular antigen could be detected in 20 of
25 (80%) cases whereas circulating immune complexed antigen (CIC-Ag) in 18 of 25 (72%) cases by sandwich ELISA. Of the two
sera showing absence of antibody, one showed presence of free and CIC-Ag whereas the other showed the presence of free antigen.
Thus antigen assay may be used as an adjunct tool for confirmation of pulmonary tuberculosis. 相似文献
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采暖季北京大气PM10中硫酸盐与硫氧化率的观测研究; 总被引:3,自引:0,他引:3
SO42-是PM10中的重要组成成分,其形成过程受到多个因子的影响。本文利用高频的自动在线分析系统连续观测了采暖季北京大气中的SO42-与硫氧化率,并探讨了它们与气态前体物、氧化剂、气象因子等的关系。结果表明在采暖季SO42-仍然是PM10中的重要组成部分,并且与SO2显著线性相关,燃煤仍然是采暖季的主要污染来源;非污染期的SO42-来源于远距离输送的老化气团,硫氧化率高,O3浓度的增加对SO2的转化有促进作用;污染期SO42-来源于局地的一次排放,硫氧化率低;整个观测期内风速对颗粒物中SO42-浓度影响较大,温度、相对湿度与SO42-和硫氧化率无明显相关关系。 相似文献
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利用电解沉积技术制备出高纯度、高致密度的块状纳米Cu样品。在室温下冷轧Cu样品可得到延伸率超过 51 0 0 %的超塑延展性 ,切冷轧过程中无加工硬化效应产生。从微观结构方面研究讨论了纳米晶Cu样品的变形机制。 相似文献
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电解沉积纳米晶体Cu的热稳定性及机械性能研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用电解沉积技术制备出无孔隙、无污染、微观应变很小的 理想 "纳米晶体单质Cu样品.对电解沉积纳米晶体Cu进行冷轧处理,首次发现纳米晶体材料具有室温下的超塑延展性,在冷轧过程初始阶段样品有少量的加工硬化,当变形量达到一定程度时(ε >80 0 % ),加工硬化效应消失。恒定的晶粒尺寸,恒定的位错密度,以及恒定的硬度值,说明纳米晶体Cu的塑性变形机制由晶界行为所控制,并非位错运动机制。系统的研究了纳米晶体中微观应变对其热稳定性的影响,发现随纳米晶Cu样品中微观应变的增加,晶粒长大的起始温度升高,而微观应变释放的起始温度下降 相似文献