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相似文献
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1.
文章采用改良的异硫氰酸胍法提取南方红豆杉枝叶总RNA,通过甲醛变性凝胶电泳,可见3条比较明显的rRNA条带,其中28SRNA条带的亮度大约为18SRNA的2倍,说明总RNA样品的完整性良好。紫外吸收值测定,A260/A280比值介于1.7到2.0之间,A260/A230比值大于2.0,得到较为典型的RNA吸收值,说明酚类、蛋白质和无机盐等杂质已排除。此方法简便易行,能得到纯度高、质量好的RNA。  相似文献   

2.
目的:探索一种提高总RNA提取浓度的方法。方法 :用Trizol方法分别提取乳腺癌细胞和心肌组织中的总RNA。在提取过程中,分别把加入异丙醇后的混合液8等份,其中4个样品管分别在室温、4℃、-20℃、-80℃下放置10min,另外4个样品管在-80℃冰箱中分别放置0.5、1、2、4h;然后检测提取到的总RNA质量浓度、纯度及完整性。结果:均放置10min时,提取的总RNA质量浓度随放置温度的降低而增加(P≤0.01);放置于-80℃时,随放置时间的增加,提取的总RNA浓度增加(P≤0.01)。两种条件下提取的总RNA的纯度均无显著性差异(P>0.05),其完整性也无明显影响。结论:不同的放置时间和温度会影响RNA提取的质量浓度,但对RNA纯度和完整性无明显影响。  相似文献   

3.
植物组织总RNA提取的常用方法及优化策略   总被引:6,自引:0,他引:6  
讨论了植物组织总RNA提取的常用方法及检测技术,并对如何消除酚类物质、多糖、蛋白质等对RNA提取的干扰以及降低RNase对RNA的降解作用进行了较详细地阐述.  相似文献   

4.
以芸芥自交亲和系的柱头组织为试材,在常规异硫氰酸胍法的基础上,通过改变离心速度、离心时间、有些试剂的组分以及增加一些关键的提取步骤,探讨并提出了一种适合于芸芥柱头总RNA的提取方法.结果表明,用该方法提取的芸芥柱头总RNA完整性好、纯度高,可用于cDNA合成、mRNA差异显示和Northern杂交等分子生物学研究,而且操作技术简单,药品经济划算,实验结果稳定,重复性好.  相似文献   

5.
苹果RNA提取方法的探索   总被引:2,自引:0,他引:2  
文章采用TRIZOL试剂快速提取法、CTAB法、改良CTAB法、RNAisoTM试剂盒法等四种方法以苹果枝条形成层区组织为材料提取总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度仪检测来分析RNA质量。结果表明改良CTAB法是最适的苹果形成层组织的RNA提取方法,并得到高质量的总RNA,经反转录、PCR途径克隆到苹果生长素结合蛋白基因,为在基因水平上探索苹果生长发育机理奠定了基础。  相似文献   

6.
拟南芥总RNA的简便提取与效果分析   总被引:4,自引:0,他引:4  
以COL-0型野生型拟南芥菜为材料,使用枪头在1.5ml的Eppendorf管中直接捣碎的方式,用Trizol试剂提取总RNA。通过总RNA的纯度、浓度测定及琼脂糖凝胶电泳分析提取效果。测定结果表明样品纯度分别达到1.9843和1.9741,浓度分别为1.2061μg/μl和1.1187μg/μl,电泳结果显示总RNA的28SrRNA、18SrRNA和5SrRNA三条带清晰、无拖尾。与研钵研磨材料比较,此方法简便、需要材料少、降低了提取过程中RNA的降解几率。  相似文献   

7.
8.
选择Trizol法、热酚法、酵母RNA提取试剂盒法3种方法提取热带假丝酵母总RNA,通过对总RNA进行质量浓度和纯度分析,比较不同方法对热带假丝酵母总RNA提取的影响.结果表明:使用酵母RNA提取试剂盒法提取热带假丝酵母总RNA是较为有效且简便的方法.  相似文献   

9.
一种高质量蜜蜂核酸的快速提取方法   总被引:7,自引:0,他引:7  
基因组DNA的提取是蜜蜂分子生物学研究的一项基本而重要的技术,但由于蜜蜂样品具有脂肪、蛋白、几丁质含量很高的特点,所以用常规方法无法获得较高质量的DNA,文章研究对蜜蜂基因组DNA的提取方法作了重要改进,可以从不同发育时期的蜜蜂中快速、大量提取高质量的蜜蜂基因组DNA,此外,对蜜蜂总RNA的提取方法也进行了探索。  相似文献   

10.
张怡  李豪  杨松 《生物学教学》2012,37(5):44-45
本文介绍了一种安全高效的植物RNA提取方法.利用改良的Trizol法从番茄中提取RNA,所需实验器具灭菌后即可使用,操作简便安全.经实验提取得到的RNA经核酸蛋白测定仪检测,OD260/OD280在2.0左右,琼脂糖凝胶电泳清晰可见28S和18S,且28S的亮度约为18S的2倍.所提取的RNA可直接用于后续的反转录、cDNA文库构建等分子生物学实验.  相似文献   

11.
目的:探讨高质量提取血小板蛋白的方法。方法:比较传统与改进后的提取血小板蛋白量,并进行蛋白定量和免疫蛋白印迹实验。结果:改进后的方法提取蛋白量平均为1.86g/L,传统方法为1.21g/L。免疫蛋白印迹实验表明,改进后的方法提取蛋白量高于传统方法,并且APP检测的结果好于传统方法。结论:通过实验可以得出改进后的提取蛋白方法,更有利于进行后续Alzheimer病的机理研究。  相似文献   

12.
福尔马林保存的龟鳖类动物基因组DNA的提取方法   总被引:2,自引:0,他引:2  
运用一种改进的DNA提取方法,从长期保存在福尔马林溶液中的龟鳖类动物的肌肉组织中成功地提取了基因组DNA。用12sRNA基因的通用引物进行PCR扩增,并对部分扩增结果进行测序,以检验提取效果:结果证明改进的提取方法效果较好,所得产物可以满足分子生物学研究的要求。  相似文献   

13.
Appressorium formation is an important event in establishing a successful interaction between the rice blast fungus, Magnaporthe oryzae, and its host plant, rice. An understanding of molecular events occurring in appressorium differentiation will give new strategies to control rice blast. A quick and reliable method to extract total RNA from appressorium is essential for studying gene expression during appressorium formation and its mechanism. We found that duplicate film is an efficient substratum for appressorium formation, even when inoculated with high density conidia. When inoculated with conidia at 1×106ml-1, the percentages of conidium germination and appressorium formation were (97.98±0.67)% and (97.88±0.45)%, respectively. We applied Trizol before appressorium collection for total RNA isolation, and as much as 113.6 pg total RNA was isolated from the mature appressoria at 24 h after inoculation. Functional analysis of two genes, MNH6 and MgATG1, isolated from the cDNA subtractive library, revealed that the quantity of RNA was good enough to construct a cDNA (complementary DNA) library or a cDNA subtractive library. This method may be also applicable for the appressorium RNA isolation of other pathogenic fungi in which conidia differentiate into appressoria in the early stages of host infection.  相似文献   

14.
1前言在生物学教科书中,编者已设计了DNA提取的操作方法,让学生了解到最基本的且最简单、粗略的提取过程,但是中学生物教学中没有一本教材做过RNA提取实验,因为RNA在真核生物中的含量相对较少,且难以提取,其提取需要非常精密的仪器(如超  相似文献   

15.
16.
甲醛是室内装修材料中重要的污染源.为了有效控制甲醛的释放,对茶叶有效成分进行提取,所得提取物配成除醛剂,可以用于去除甲醛.选择加液量、反应温度和反应时间为提取因素,采用正交实验方法得到最佳提取工艺,所得产品对甲醛去除率可以达到61.77%.为了能够充分提取茶叶有效成分,还对茶叶进行多次提取,发现多次提取物除醛效果明显下降.3次后提取物几乎不再有除醛效果.  相似文献   

17.
目的:探索用微型磁笔进行动植物DNA快速提取与电泳鉴定的实验研究。方法:取菜叶0.1g或人类全血0.1mL、磁珠悬液0.25mL,选择性结合DNA、洗涤、洗脱、电泳即得。本法不需离心,不用大量检材,用微型磁笔在离心管中微量操作,分离纯化DNA只需30min,电泳只需50min。结果:可以观察到清楚明亮的DNA条带,使学生同时掌握了正规DNA提取和琼脂糖电泳二项技能。结论:本方法是对分子生物学、医学遗传学实验的一大改进,它操作简捷直观、降低了实验成本,提升了实验水平,使得高纯度DNA的提取实验今后可以在大学、中学的生物学、遗传学实验室进行,给更多的学生和教师、科研人员参与生命科学的研究提供了机会。  相似文献   

18.
银杏叶中提取黄酮类化合物的最佳工艺条件   总被引:4,自引:0,他引:4  
从银杏叶中提取黄酮类化合物,并对这些提取物的精制工艺进行探索,进而在实验室最佳工艺条件下提取出有效成分.其最佳工艺参数是:银杏叶的浸泡时间为5h,粒度大小在50~70目之间,浸提温度为70℃,提取次数为3次.  相似文献   

19.
冬青叶叶绿素提取工艺研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
以冬青叶片叶绿素提取量为衡量指标,通过单因素实验确定提取剂、提取剂用量、提取温度以及提取时间,再利用正交实验,优化提取的工艺条件.结果表明,以丙酮、乙醇(体积比2:1)混合液为提取剂,提取时间24h,提取剂用量20 mL,提取温度60℃是提取冬青叶片叶绿素的最佳工艺条件.  相似文献   

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