四种从蒙古马全血中提取基因组DNA方法的比较研究

本实验分别采用酚———氯仿抽提法、快速抽提法、胍盐酸提取法和天为时代试剂盒法对蒙古马血样进行基因组DNA的提取,再利用琼脂糖凝胶电泳技术、紫外分光光度计和PCR扩增技术,对提取得到的DNA纯度、浓度及实用性进行检测,从而选择一种高效、快速、经济的从蒙古马血液中提取基因组DNA的方法。     

蜘蛛主壶腹线cDNA文库构建过程的优化

通过本实验得出采用简易CTAB法提取基因组DNA,利用总RNA试剂盒提取总RNA,提取效率和纯度较为理想。并利用生物软件学方法对老狡蛛丝蛋白基因引物进行了构建,为蜘蛛主壶腹线cDNA文库构建打下了基础。     

浙贝母DNA条形码技术研究

DNA条形码技术是一种新型的生物身份识别系统,能够利用鉴别物种内的一段标准的、具有足够变异性、并相对较短且易扩增的DNA片段对生物物种实现快速的自动鉴定。本研究首先采用试剂盒提取法从17个贝母种79个样品中提取了基因组DNA,并进行了纯度与浓度鉴定;然后采用ITS1、ITS2序列引物进行PCR扩增和产物测序,最后进行序列比对,以明确DNA条形码序列ITS1和ITS2在浙贝母种质资源中的鉴定效果。结果发现,浙贝母地方种间的ITS序列差异不大,ITS序列对浙贝母种内分辨率过于低下。由此表明DNA条形码ITS1、ITS2序列并不太适合用作浙贝母的DNA条形码技术。     

DNA的提取及其在猪育种中的应用

本文对原种猪场3头无血缘关系的台系杜洛克种公猪前腔静脉采血,以ACD抗凝,采用4种不同方法(苯酚-氯仿法、改良CTAB法、试剂盒法、Chelex-100法)对采取的猪血基因组DNA进行提取,并以所提取的基因组DNA为模板,采用紫外分光光度计对其进行浓度和纯度的定量检测;采用琼脂糖凝胶电泳法对其进行定性检测;并对RAPD反应体系进行优化设计,用优化后的RAPD体系进行PCR扩增。     

使用KingFisher Flex建数据库的探索

KingFisher Flex血液DNA提取试剂盒和KingFisher磁珠提取仪联合合作,可以从新鲜、冷冻血液和白细腻层中纯化基因组DNA(gDNA)提供高效解决方法,可最大限度节约人工的操作时间。但是在操作中,由于所采集生物样本存在不规范性或有不确定性,无法一次性获得完整数据,因此,数据库的建设就显得极为必要。本文就是在这样的背景下,探究了利用Thermo Scientific KingFisher Flex这台仪器,对一次未检出的口腔采集卡,进行复检,找到数据库的建立方法。     

芦苇床中芦苇内生菌群总DNA提取方法研究

本文对污泥干化芦苇床中芦苇内生菌总DNA的提取方法进行了研究,实验经过摸索后采用Soil DNA Kit提取基因组DNA对不同来源的芦苇内生菌群总DNA进行提取。利用PCR技术对不同来源的总DNA的提取方法进行了对比分析。以期应用分子生物学技术研究和评价芦苇共生菌群改变,从而为改善芦苇床工艺设计提供生物学证据。     

两种PCR增强剂对A27 Plex试剂盒和EX22 AGCU试剂盒的影响

目的采用直接提取的方法对1例女性全血样本进行PCR扩增,比较BSA(牛血清白蛋白,Albumin from bovine serum)和DMSO(二甲基亚砜,Dimethyl sulfoxide)两种PCR增强剂对A27 Plex试剂盒和EX22 AGCU试剂盒PCR扩增效率的影响。方法在A27 Plex试剂盒和EX22 AGCU试剂盒中加入不同体积的BSA和DMSO后对全血样本进行PCR扩增以及STR分型。结果经数据统计和T检验方法,得出AGCU Ex22试剂盒中加入BSA对全血样本PCR扩增起到抑制作用,而加入DMSO对全血样本PCR扩增起到一定程度促进作用;A27 plex试剂盒中加入BSA对全血样本PCR扩增起到促进作用结论在不改变加入试剂总体系,仅改变加入dd H2O体积的情况下,加入1μL BSA可以有效抑制血红素对PCR扩增左右的影响,加入0.2μL DMSO可有效减弱模板DNA局部二级结构对PCR扩增的抑制作用。     

一种通用的基因组DNA提取方法

高质量的基因组DNA是进行分子生物学实验的前提。为此,本研究通过从动植物组织和细胞中分别提取DNA,探索了一种通用的基因组DNA的提取方法。本方法所提取到的DNA纯度高、适合后续PCR扩增。     

HBV标志阳性患者血清HBV-DNA定量测定的探讨

近年来 ,HBV- DNA定量分析的价值受到越来越多研究者的重视。我们对部分 HBV标志阳性患者进行了血清 HBV- DNA定量测定 ,探讨患者血清携带 HBV- DNA检测结果的关系。1　材料与方法1 .1　标本来源375例 HBV标志阳性标本为我院门诊患者。1 .2　试剂和仪器HBV- DNA定量试剂盒购于深圳市达尔安生物有限公司 ,HBV核酸扩增 ( PCR)荧光检测试剂盒、操作严格按说明书进行。仪器为美国 PE公司产5 70 0基因扩增仪。2　结果1 0 2例血清 HBs Ag、抗 HBc及 HBc Ag阳性的患者 ,HBV- DNA定量测定结果 99例大于正常参考值 ( 4 .0× 1 0…     

猕猴桃中DNA的粗提取

通过查阅相关资料、请教老师,了解了DNA提取有关原理,并通过实验提取了猕猴桃的DNA。     

探讨柑橘黄龙病及其防治措施

对于柑橘种植,我们要高度重视黄龙病的防治工作,通过加强管理,加大投入,力求将黄龙病造成的损失降到最低程度.本文以广西农垦国有良丰农场成功控制黄龙病为例,通过分析了柑橘黄龙病的发病症状、条件、原因及途径,提出几点防治措施.     

土壤DNA提取与纯化方法的研究

土壤DNA提取与纯化成为研究土壤微生物微生态的首要前提,本文系统总结了国内外提取和纯化土壤DNA的方法。     

利用指印、DNA协同合作破获特大盗窃案的技术探讨

侦破中,指纹和DNA技术起到技术导侦的作用,指印与DNA物证都发挥直接破案的作用。勘查技术人员不能只注重发现指印、足迹等传统的痕迹物证,而忽视了对DNA物证的提取。现在DNA物证在案件侦破的过程中的作用越来越重要,所以技术人员应更加注意发现并提取现场中的DNA物证。     

大学学报

槟榔基因组DNA提取及ISSR反应体系的优化Extraction of Genomic DNA of Areca catechu L.and Optimization of Its ISSR-PCR System摘要以槟榔为试验材料,用改良的CTAB法提取基因组DNA,并设置不同梯度分别对每个PCR反应因子做了相应的试验.结果表明：     

大花黄牡丹总DNA的提取初探

本文经过反复实验摸索,在没有液氮的情况下,改良了常用的总DNA的提取方法～SDS法和CTAB法,用这两种方法成功的提取了大花黄牡丹（Paeonia ludlowii）的总DNA。并通过琼脂糖凝胶电泳、分光光度计进行紫外检测发现,提取到的DNA纯度及含量均适合分子生物学操作的要求,为进一步遗传多样性分析、遗传图谱构建等研究奠定基础：     

SDS法和CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA用于SSR分析

选用8个西藏黄籽油菜干种子作材料,分别采用SDS和CTAB的微量法提取基因组DNA,取适量的该DNA进行琼脂糖凝胶电泳,并利用uv1100型紫外分光光度计测定所提取的DNA在260nm、280nm的光密度值及比值,并进行SSR标记。结果表明,2种方法均能从西藏黄籽油菜干种子中提取出一定量的比较完整且纯度较高的DNA,用琼脂糖凝胶检测时,表现带型清亮,每个样品带型较一致,利用SDS法CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA,均适用于SSR分析。但用CTAB法提取的干种子DNA的纯度更高、量多、质量更好,更适于制备SSR分子标记的模板DNA。     

基因敲除小鼠不同部位提取DNA方法的比较

目的:建立简便、快捷、稳定可靠的鉴定小鼠基因型方法,维护动物伦理福利。方法:基因敲除小鼠后代鉴定时,分别从鼠尾,鼠耳,趾甲三个部位提取DNA,通过优化DNA提取技术,经分光光度计检测,PCR扩增等技术,比较分析DNA纯度、提取时间,及基因型鉴定结果。结果:取组织提取DNA,经分光光度计检测,发现DNA浓度尾尖最高,耳尖次之,趾甲浓度最低,但是纯度最好。经PCR扩增技术发现不同基因型的不同部位提取DNA鉴定结果一致。结论:剪趾甲提取DNA操作方法相对于其他常规方法,操作简单,耗时最短,基因型鉴定结果可靠,对小鼠本身伤害更小,可用于规模化的小鼠基因型鉴定实验中。     

PCR技术快速鉴别牛、羊、猪皮革的初步探讨

提取牛、羊、猪3种动物皮革组织中的DNA,设计了3对特异性引物,PCR扩增,初步建立了这4种动物皮革成分的鉴定方法。DNA的提取的质量及其后的PCR鉴定依赖于皮革的加工程度,如何从皮革成品中提取有效的核酸信息需进一步研究。     

D6S1043基因座检出三带型等位基因2例及遗传分析

目的:在亲子鉴定案件中检出D6S1043基因座三带型。方法:提取个体不同组织DNA样本,经复合荧光PCR扩增和毛细管电泳分析2716个案例(共6246名个体)的STR分型。结果:在1个父子单亲鉴定案例中,2名个体的D6S1043基因座上出现三带型等位基因。用Power Plex?21荧光标记复合扩增试剂盒对包含D6S1043在内的21个STR基因座进行检测,父亲D6S1043基因座分型为17/18/21,儿子分型为10/17/18,电泳峰高和峰面积之比均为1∶1∶1,用SinofilerTM试剂盒复核检测结果相同。结论:在本文发现的案例中,父亲的等位基因17和18均遗传给了儿子,导致儿子表现为三带型等位基因。D6S1043三带型非常罕见,在分析时应采用不同方法或者试剂盒进行验证,保证鉴定结果的可靠性。     

我们为何不能复制恐龙

经常有这样的报道,考古学家发现了某种生物的化石,也从中提取出了这种生物的DNA。这确实是一个大好消息,因为现在的生物科技越来越发达,人类已经能够利用动物的皮肤细胞复制出那个动物出来。如果按现在生物科技的发展趋势,科学家是不是可以利用某种动物的DNA来复制出这种动物来?如果科学家提取出了恐龙的DNA,