放射免疫法与FQ—PCR法检测乙型肝炎病毒相关性探讨

目的:探讨乙型肝炎病毒检测放免法、聚合酶链反应法两者的相关性.方法:323份血清标本分别采用放免法、聚合酶链反应法进行检测.结果:放免法两对半大三阳中,HBV-DNA定量阳性率为100%;两对半小三阳中,HBV-DNA定性阳性率为44.92%;两对半HBsAg、HBcAb、HBeAg、HBeAb阳性中,HBV-DNA定性阳性率为98.08%;两对半HBsAg、HBcAb阳性中,HBV-DNA定性阳性率为50%;两对半HBsAb、HBcAb、HBeAb阳性中,HBV-DNA定性阳性率为0%;两对半HBcAb、HBeAb阳性中,HBV-DNA定性阳性率为12.12%;两对半HBcAb阳性中,HBV-DNA定性阳性率为0%;两对半五项全阴性中,HBV-DNA定性阳性率为0%.结论:荧光定量PCR法检测HBV-DNA是乙型肝炎病毒复制最直接的可信指标,可反映HBV真实感染和复制状态,特别是低复制状态,结合RIA法检测HBV-m,具有重要临床意义.     

乙型肝炎患者血清HBV-DNA、PreS1、HBeAg之间的相关性分析

目的:分析乙型肝炎患者血清病毒DNA(HBV-DNA)与前S1抗原(PreS1)及e抗原(HBeAg)的关系,评价PreS1的临床检测意义。方法:筛选179例实时荧光定量PCR HBV-DNA水平阳性患者血清,采用ELISA法检测PreS1和HBeAg。结果:179例HBV DNA阳性血清中,HBeAg总阳性率为66.5%,随着HBV-DNA水平的升高,HBeAg的检出率大幅升高。PreS1总阳性率为83.8%,在三组不同的HBV DNA水平中,1组与2组、2组与3组间无差别(P>0.05),仅1组与3组间存在一定的差异(χ2=9.38,P<0.05)。结论:PreS1与HBV-DNA密切相关,PreS1检测可反映其体内HBV病毒的复制情况,具有一定的临床价值。     

荧光定量聚合酶链反应检测尿中乙肝病毒DNA的意义

目的:研究乙肝携带者尿液HBVDNA含量及传染性.方法:用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测50例患者血清乙肝病毒DNA含量大于104拷贝/ml患者尿液中乙肝病毒DNA含量比较.结果:尿中HBV-DNA含量与血清中HBV-DNA含量存在正相关关系(r=0.797,p0.01).结论:血清中HBV-DNA含量拷贝数越大,尿液中HBV-DNA含量拷贝数也越大,HBV-DNA拷贝数高的患者注意尿液的传染性.     

一种嵌合式DNA聚合酶的表达及功能验证

为了建立一套基于大肠杆菌表达系统的嵌合式高保真DNA聚合酶的重组表达与纯化的工艺,首先将含有目的基因的质粒转化至大肠杆菌BL21中,通过高压破碎仪进行细胞破碎,再用离子交换层析方法获得嵌合型高保真聚合酶。优化反应条件显示在28℃自动诱导下表达的嵌合DNA聚合酶蛋白产量较高。利用高压破碎仪将细胞破碎获得可溶蛋白,然后利用硫酸铵沉淀将蛋白粗纯,并采用离子交换层析柱纯化,最终获得较纯的DNA聚合酶。通过对获得的嵌合DNA聚合酶进行活性分析,证实该聚合酶具有高效的活性,为以后大规模生产高保真DNA聚合酶奠定基础。     

HBV-DNA与HBVM检测的临床意义探讨

目的:选择我院门诊及传染科病房174例乙型肝炎病例.同时检测HBVM和HBV-DNA,以探讨HBV-DNA检测在乙型肝炎病毒复制和传染性高低方面的意义。方法:分别用聚合酶链反应(PCR)法测HBV-DNA,用ELISA法检测HBsAg、HBsAbHBcAb,用全自动酶免分析仪检测HBeAg、HBeAb。结果:乙肝患者HBVM不同模式血清HBV-DNA阳性率有较大差异;小于40岁患者组血清HBV-DNA阳性率明显高于40岁以上组;男性患者血清HBV-DNA阳性率高于女性患者,但差异无显著性意义。结论:对不同HBVM模式均应检测血清HBV-DNA,以判断其病毒复制情况和传染性高低。     

乙肝两对半ELISA试剂盒性能证实实验

用新、旧试剂盒(分别为Kit B、Kit A)检测了同一批标本(170份患者标本)、临界值质控品和标准质控品,初步确定新试剂盒的灵敏度、特异性和准确度,再通过室内质控、室间质评的结果进一步研究新试剂盒的精密度和准确度,最后通过分析临床标本阳性率以及临床反馈资料来综合证实新试剂盒的性能满足要求.结果表明,Kit B试剂盒可以更换原来的Kit A试剂盒,为临床实验室更换乙肝两对半试剂盒提供了可行性方案.     

三种不同包被抗原用于RF的测定与比较

分别用人、兔、鼠IgG作包被抗原,检测244份血清标本(类风湿性关节炎72份,系统性红斑狼疮74份,慢性肾病50份,其它内科疾病33份,健康体检者15份)。类风湿因子RF,发现以AgHIgG作为包被抗原时,方法最敏感,AgRIgG次之,而AgMIgG最差。以AgRIgG为包被抗原(间接法)与以AgHIgG、AgRIgG为包被抗原(双抗原夹心法)所测RF有较好一致性,P分别为0.01,P<0.05,P<0.01。     

临床145份血清标志HBsAg,HBeAg,Anti－HBc与HBV－DNA的检测结果分析

本通过145份乙型肝炎血清标本免疫测定乙肝病毒抗原抗体及PCR检测结果进行统计分析，研究两种测定结果的临床意义及相关性。     

2008年阳泉市食品及公共卫生从业人员健康检查结果分析

食品行业及公共场所从业人员每年都要进行预防性健康体检,对不合格人员不予发放健康证,不准上岗,这是保证广大消费者不被传染病传染的一项重要措施.     

急性脑梗死患者血清TNF-α变化

为了研究急性脑梗死患者血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的变化,我们采用病例对照的研究方法,选择急性脑梗死患者为病例组,健康体检者为对照组,用酶联免疫吸附法定量检测血清中TNF-α的含量,现报告如下:1资料与方法1·1一般资料病例组选取2008·1~2008·6月在我院住院急性脑     

2500例门诊患者肝功能及血清HBV感染指标检测结果分析

目的 :了解乙肝患者肝功能、乙肝五项及HBVDNA的变化及其相关性。方法 :收集门诊患者血清标本 ,同时检测肝功能、HBVELISA和HBVDNA三个不同水平。结果 :在收集的2 5 0 0例标本中 ,肝功能异常率为 6 2 .8% ,HBs -Ag阳性率为 71.2 % ,HBVDNA定量阳性率为 90 .4 %。当病毒拷贝数在 10 5～ 10 6之间时 ,肝功能异常率为 4 .2 85 % ,HBV拷贝数增加肝功能也不同程度加重 ;HBs -Ag阴性的标本中 ,FQ -PCR检出率为 30 .5 6 % ;单独HBs -Ab阳性的FQ -PCR检测的阳性率为 2 2 .35 %。结论 :HBVDNA的FQ -PCR是目前检测乙肝最为敏感的方法     

乙肝血清学指标与腮腺组织HBsAg、HBcAg和HBVDNA的相关性研究

目的通过观察乙型肝炎病毒感染者腮腺组织中HBsAg、HBcAg和HBVDNA的表达情况,研究乙肝血清学指标与它们的相关性。方法免疫组化检测乙肝血清指标与腮腺组织中HbsAg、HbcAg和HBVDNA的相关性。结果23例腮腺组织中HBsAg阳性11例,阳性率为47．83％;HBcAg阳性10例,阳性率为43．48％。其中HBsAg和HBcAg同时阳性8例,占34．78％。14例免疫组化阳性患者检出HBVDNA9例,阳性率为64．29％,乙肝血清学指标与腮腺组织中HBsAg、HBcAg检测结果高度正相关（x^2=3．305,P〉0．05）,其Kendall等级相关系数rs=0．661（P〈0．05）。结论腮腺组织对HBV有较强的亲和力．唾液中HBV的出现可能源于受染的唾液腺组织,含HBV的唾液是乙型肝炎生活接触性传播的媒介。     

双抗体ELISA检测鸡传染性法氏囊病病原

用单克隆抗体双抗体ＥＬＩＳＡ法检测自然发病鸡和人工感染鸡的法氏囊及其它脏器和ＩＢＤＶ细胞毒，病鸡的法氏囊ＩＢＤＶ检出率约１００％，其它脏器较低，ＩＢＤＶ细胞毒毒公明显低于组织毒。     

2006-2009年新生HBV感染调查分析及对策

本文以2006-2009年的入校新生为检查对象,用酶联免疫法对血清中的HBV的五项标志物进行检测,并对检测数据进行统计分析。调查发现我校新生中虽然HBV感染的阳性率低于全国水平,但其中大三阳和小三阳所占比例偏高,男生高于女生,农村学生高于城市学生,HBV感染的状况不容乐观,应在校园内有针对性地做好乙型肝炎的防治工作。     

HBV核酸光敏生物素探针的制备

利用设计合成的特异性引物，通过PCR扩增获得乙肝病毒的S区621个bpDNA片段．该扩增产物经EcoRI与BamHI双酶切后直接克隆进入PSK载体进行表达，再通过扩增重组菌株，以获得大量的S区DNA片段，对它们进行光敏生物素标记，制成探针，对乙肝病毒进行检测灵敏度高，特异性强，其灵敏度可达到4pg水平。     

云南保山地区契丹后裔乙肝危险因素分析

目的：调查研究云南保山地区契丹后裔人群生活习惯与乙型肝炎之间的关系,找出其中的危险因素或保护因素,为开展保山地区契丹后裔人群乙型肝炎的防治工作提供科学依据。方法：采用对保山契丹后裔人群发放统一编制调查问卷,调查其生活习惯,并采集静脉血5 mL检测乙肝血清学指标,同时采用χ^2检验和Logistic回归分析契丹后裔人群生活习惯与乙型肝炎之间的关系。结果：325名契丹后裔中有10例HBsAg阳性,阳性率为3.07%,其中感染者均为男性。经单因素分析,性别、乙肝疫苗接种史、家庭年收入的差异具有统计学意义（P〈0.05）,共用牙具、剃须刀（P=0.061）和文化程度（P=0.093）差异接近于有统计学意义。多因素分析表明,接种乙肝疫苗为保护性因素（P〈0.05）,而家庭年收入高为HBV感染的易感因素（P〉0.05）。结论：应该加强对契丹后裔人群的健康教育,采取免疫预防措施,普及疫苗接种,保护易感人群,控制乙肝的感染和传播。     

乙肝歧视的成因与救济

乙肝弱势人群所受到的歧视主要来自于社会的封闭、人们观念的误区以及隐藏在其后的功利主义观。要消除乙肝歧视。必须建立立法、行政、司法三位一体的救济体系。     

金属配合物与DNA相互作用研究手段和进展

本文以金属配合物DNA的作用为主要内容,阐述了光谱学和电化学等多种仪器分析方法在研究金属配合物与相互作用中的应用以及金属配合物与DNA的作用近年来的研究情况,并对今后的发展趋势进行了展望.     

Enhancing cellular immune response to HBV M DNA vaccine in mice by codelivery of interleukin-18 recombinant

Objective: To investigate the effect of interleukin-18 (IL-18) on immune response induced by plasmid encoding hepatitis B virus middle protein antigen and to explore new strategies for prophylactic and therapeutic HBV DNA vaccines. Methods: BALB/c mice were immunized with pCMV-M alone or co-immunized with pcDNA3-18 and pCMV-M and then their sera were collected for analysing anti-HBsAg antibody by ELISA; splenocytes were isolated for detecting specific CTL response and cytokine assay in vitro. Results: The anti-HBs antibody level of mice co-immunized with pcDNA3-18 and pCMV-M was slightly higher than that of mice immunized with pCMV-M alone, but there was not significantly different (P>0.05). Compared with mice injected with pCMV-M, the specific CTL cytotoxity activity of mice immunized with pcDNA3-18 and pCMV-M was significantly enhanced (P<0.05) and the level of IFN-γ in supernatant of splenocytes cultured with HBsAg in vitro was significantly elevated (P<0.05) while the level of IL-4 had no significant difference (P>0.05). Conclusion: The plasmid encoding IL-18 together with HBV M gene DNA vaccines may enhance specific TH1 cells and CTL cellular immune response induced in mice, so that IL-18 is a promising immune adjuvant.     

Enhancing cellular immune response to HBV M DNA vaccine in mice by codelivery of interleukin-18 recombinant

INTRODUCTIONChronicinfectionwithHBVaffectsmorethan250millionpeopleworldwide.Therearemorethan120millionchronicHBVcarriersinChina;appro-ximately10percentofthemremaininstateofchronichepatitisandhaveahighriskofdevelop-mentofcirrhosisandhepatocellularcarcinoma.ButthereisnoeffectivemethodtocontrolchronicHBVinfectionatpresent.Recentdataindicatedthatim-munotherapeuticstrategiesstimulatingbothcellularandhumoralimmuneresponsestoHBVantigensareessentialforcuringchronicHBVinfection(ChisariandFe…