胸腺淋巴细胞免疫血清制备的初步研究

试验研究以猪胸腺淋巴细胞为完全抗原,采用一定的免疫程序致敏兔,刺激兔产生抗猪胸腺淋巴细胞的特异性抗体,在30天后分离血清,免疫效价达到1：640,证明兔血清含有该特异抗体,免疫程序合理,抗体效价确实．     

自身蛋白作载体制备克伦特罗抗血清

本试验以偶氮法将克伦特罗连接到自身全血清和血红蛋白上制成佐剂苗分别免疫兔。免疫后用间接抑制ELISA、间接ELISA检测各组抗体特异性抗克伦特罗效价。结果表明,各组兔血清均含有抗克伦特罗的特异性抗体,显示自身全血清和血红蛋白能作载体,提示自身全血清因组分复杂作载体具有一定优越性。     

兔抗小鼠IgG-HRP酶标抗体的制备及应用

制备并纯化小鼠腹水IgG,鉴定IgG纯度;免疫新西兰大白兔制备兔抗小鼠IgG的抗血清并纯化血清IgG;用改良过碘酸钠法制备兔抗小鼠IgG酶标抗体,对其进行鉴定,并与市场上的同类产品对比。结果,纯化的小鼠腹水IgG,其纯度约为80%—90%;免疫新西兰大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价在1:32以上;用改良过碘酸钠法制备酶标兔抗小鼠IgG酶标结合物与市场同类产品相比质量优良,特异性较强,亲和力较好,并在较长时间内效价稳定。结果表明,制备的小鼠IgG抗血清和酶标抗体,适合于小鼠的血清学检测体系的建立。     

膝沟藻毒素GTX2,3完全抗原的HPLC及免疫学鉴定

通过醛化法将膝沟藻毒素(GTX2,3)分别与血蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)偶联制备完全抗原,高效液相色谱法(HPLC)检测醛化反应前后游离GTX2,3的浓度,完全抗原免疫Balb/C小鼠,间接酶免疫吸附试验检测免疫后血清中抗体效价。GTX2,3与KLH及BSA偶联反应前溶液中毒素的浓度分别为760μg·mL-1和660μg·mL-1,偶联反应后毒素的浓度分别为191μg·mL-1及256μg·mL-1,Balb/C小鼠经过5次免疫后血清的效价为1：500。结果表明,反应后游离的GTX2,3的浓度降低,制备的GTX2,3完全抗原免疫小鼠后小鼠产生抗GTX2,3抗体,说明GTX2,3与载体蛋白发生偶联反应,偶联物具有免疫原性。     

小鼠nulp1基因多克隆抗血清的制备及检测

为了在小鼠模型中更深入地研究nulp1蛋白在心脏发育中的功能,采用PCR技术扩增出小鼠nulp1基因的部分编码区并连接入pET-28a表达载体中,之后将重组质粒转入大肠杆菌(E.coli)通过IPTG诱导表达Hisnulp1融合蛋白,对该融合蛋白采用Ni-IDA凝胶柱层析纯化后,免疫新西兰兔制备了多克隆抗体,并用western blotting对抗体进行分析.结果表明,获得了高效价的特异性兔抗nulp1多克隆抗体.这为nulp1功能的进一步研究奠定了基础.     

美食的悲惨遭遇

2914年,由于环境的恶化,天气也变得十分怪异多变,让人捉摸不透. 这天,我正挥舞着手中的自动调味锅铲,烹调我的午餐—一玉米兔丁.金灿灿的玉米加上滑嫩的兔丁,真是让人垂涎欲滴呀!忽然,灶台上的各种厨具“啪啦啪啦”地冒出了火花.我向窗外看去,只见刚刚还是晴空万里,现在已是电闪雷鸣.还没等我反应过来,一道闪电已经直劈我的房顶.我赶紧按下“移动一步”的按钮,把房子挪开,避开了闪电的攻击.可就在一眨眼间,电闪雷鸣又变成了骄阳似火,温度计的数字一下子飙升到了82.3摄氏度!我立马穿上抗高温专用服,可顾得了人顾不了菜,玉米兔丁的火候眼看就要过了!     

植物病毒抗血清的制备及IgG纯化与酶标技术研究

以烟草花叶病毒（TMv）为例研究了制备植物病毒抗血清的一般方法．以家兔和小白鼠为免疫动物，运用饱和硫酸接沉淀法制备出高效价的兔和瓦抗TMV血清，并运用先进的ELISA方法测定了抗血清中抗体IgG的效价；用醋酸纤维凝胶电泳技术分析了抗血清中抗体的lgG纯度，应用免疫双扩散法检测了提纯的IgG的生物活性．同时还运用成二醛一步法制出高结合率的IgG与过氧化氢酶（HRP）标记的抗体，形成了一整套制备抗血清、纯化IgG并对IgG进行酶标的技术，为植物病毒检测提供了快速简便的方法．     

抗链球菌溶血素“O”抗体的免疫结合测定法

本文用点免疫结合法测定103份血清标本的抗链球菌溶血素“O”抗体,与微量法测定结果比较,两种方法测定的抗“O”抗体效价相符合。当血清浓度为1:200,并以邻苯二胺为底物时,ou、200 u 400 u、800 u效价的血清的消光值分别为0.10以下、0.11～0.15、0.16～0.25、0.26以上,与以盐酸联苯胺为底物时阳性反应点上形成的蓝褐色沉淀的颜色深浅的目測结果相吻合。试验结果证明:此法简便、迅速、准确,可作为急性风湿活动的协助诊断方法之一。     

日本血吸虫压电免疫传感器的研究

在压电石英晶体金电极表面形成MPA（疏基丙酸）单分子膜,经NHS和EDC活化后固定血吸虫抗原（SjAg）,研制成血吸虫抗体（SjAb）压电免疫传感器．研究了包被抗原浓度、抗原抗体结合时间,TSM声波免疫传感的响应特性、重现性等实验条件的影响．压电晶体的频移值与IRS浓度在0－36μg／ml范围内有良好的线性关系．将此传感器用于兔抗血吸虫抗体血清样品的测定,结果令人满意．     

日本血吸虫压电免疫传感器的研究

在压电石英晶体金电极表面形成MPA(疏基丙酸)单分子膜,经NHS和EDC活化后固定血吸虫抗原(SiAg),研制成血吸虫抗体(SjAb)压电免疫传感器。研究了包被抗原浓度、抗原抗体结合时间,TSM声波免疫传感的响应特性、重现性等实验条件的影响。压电晶体的频移值与IRS浓度在0～36μg/ml范围内有良好的线性关系,将此传感器用于兔抗血吸虫抗体血清样品的测定,结果令人满意。     

高等教育中的“生态位现象”解析

在自然界存在着一种生态位现象 ,它是由俄罗斯的一位叫格乌司的生态学家发现的 ,所以也称之为格乌司原理。这种现象是指在大自然中 ,亲缘关系接近的具有同样生活习性或生活方式的物种 ,不会在同一地方出现。如果它们在同一区域出现 ,大自然将会用空间把它们各自隔开。在动物世界里没有两种物种的生态位是完全相同的 ,有些物种亲缘关系接近或相似而使生态位部分重叠 ,这时就会出现严酷的竞争。如果强者进入弱者的生态领域就会出现“龙陷浅滩受虾戏 ,虎落平阳遭犬欺”的情况 ;如果弱者进入强者的生态领域中就会出现大鱼吃小鱼、小鱼吃虾米的状…     

鸡兔问题趣解

一天,爷爷考了我一个问题:“有一个喜欢动物的人,养了一笼鸡和兔,从上面看有30个头,从下面看有100只脚,问鸡、兔各有多少只?”小时候,爷爷曾教过我用画图的方式解答这类问题:用一个“○”代表一只动物的头,再在每个“○”下添上两条短竖线,使它变成“○”,这就代表鸡。先把所有的鸡和兔都当成鸡来算,这样,题中脚的数目就会多出来一些。再把多出来的这些脚添到一些“鸡”身上去,使它们变成兔,问题就解决了。当时我还不会列综合算式,现在我知道,按这种思路来解决上面的问题,综合算式应是:(100-2×30)÷2,算出的20就是兔的只数,所以答案是:有鸡…     

果蝇EF-1α蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

为进一步研究延长因子-1（elongationfactor-1α,E-1α）在调控心脏发育和果蝇心脏功能中发挥的作用,制备延长因子-1的抗体．利用生物信息学选择果蝇EF-1α基因抗原亲水区,并设计出特异性引物,PCR扩增出的片段克隆到原核表达pET-28a载体中,转入E．coli中后通过IPTG诱导融合蛋白表达,将His—EF-1α融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,再用WesternBlot检测抗体的效价和特异性．研究结果表明,获得了EF-1α原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗EF-1α多克隆抗体．EF-1α多克隆抗体的效价可以达到1比1500,并且有很强的特异性,为后续研究EF-1α基因在心脏发育和心脏功能中的作用奠定了基础．     

兔化高免褪黑激素抗血清的制备

运用Ｍａｎｎｉｃｈ反应,将褪黑激素与ＢＳＡ联结起来制备完全抗原,用ＵＶ－２６０紫外仪测定ＭＬＴ与ＢＳＡ的联结比为１２∶１。用此抗原免疫新西兰大耳兔５只,经过６次免疫后,发现抗体效价平均１∶１００００（ＥＬＩＳＡ）。将抗血清经Ｎａ２ＳＯ４沉淀、Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－２００过柱层析、收集纯化抗体,用分光光度计７２１测其蛋白浓度。经５－羟色胺等阻断试验发现抗体特异性较高。     

果子狸杂谈

新华社消息,粤港两地专家研究最新成果证实“非典”病毒源白果子狸。人类既然能够感染上SARS,这种动物一定与人有亲缘关系,因此,哺乳动物的可能性最大。鉴于这是一种人类新发现的病毒,科研人员又推断源头动物平时应很少出现在人类的生活圈子里,从     

外毒素、内毒素、类毒素和抗毒素辨析

细菌毒素分为外毒素和内毒素。外毒素经甲醛溶液处理可成为类毒素,将类毒素免疫大型动物,从其血清中可分离出能中和细菌毒素的抗毒素。     

中国科学院培育成吐荧光“蜘蛛丝”的转基因蚕

据近日国内媒体报导 ,中国科学院研究员陆长德等利用“电穿孔”法 ,将荧光蛋白基因及蜘蛛拖牵丝基因注入蚕卵 ,获得了吐出荧光“蜘蛛丝”的转基因蚕。蜘蛛丝中的拖牵丝是强度十分高、弹性十分强的天然蛋白纤维 ,若制成防弹衣则“刀抢难入” ,织出降落伞牢固耐用 ;而可以产生荧光的蚕丝则可用以开发天然夜光衣及各种防伪标签等。这是我国动物基因工程领域的又一重大成果中国科学院培育成吐荧光“蜘蛛丝”的转基因蚕     

鸡白痢沙门氏菌胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制及初步应用

为了建立一种适合基层现场的鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)抗体检测方法,以S.pullorum的基因组为模板,利用PCR方法扩增inv A基因并进行原核表达后,用Ni-NTA纯化inv A融合蛋白,Western-blot和ELISA进行分析;采用30 nm的胶体金溶液标记山羊抗鸡Ig Y,并对金标抗体的质量浓度和p H值进行优化;在NC膜上分别包被inv A融合蛋白和鸡Ig Y作为检测线和质控线,评估其特异性、灵敏性和稳定性.用该方法对临床的195份血清进行检测,平板凝集试验验证其准确性.结果表明:构建的inv A重组蛋白质粒在大肠杆菌BL21中成功高效表达,获得的蛋白纯度较高,经Western-blot和ELISA方法证实具有良好的反应原性.该试纸条最佳胶体金标记的p H值为7.6,抗体质量浓度为1.3 mg/m L,方法的灵敏性与平板凝集试验的灵敏性一致,与其他病原菌无交叉反应.对195份临床样本进行检测,其结果与平板凝集试验的符合率为96.43%.研究建立的S.pullorum胶体金免疫层析检测试纸条具有方便、快捷、安全和灵敏度高等优势,可用于S.pullorum抗体的早期检测和流行病学筛查.     

溃疡性结肠炎免疫学发病机理探讨及血清自身抗体检测

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是一种原因不明主要发生在结肠粘膜层的炎症性病变，以溃疡糜烂为主。其病因及发病机制目前尚无定论，但倾向性意见是UC与自身免疫紊乱有关，所涉及到的自身抗体主要归纳为两类，一类是抗结肠抗体(ACA)，另一类是抗人中性粒细胞胞质抗体(ANCA)。本文就溃疡性结肠炎免疫学发病机理及血清自身抗体检测的临床应用加以阐述，以便为UC病因学和诊断学的研究提供客观依据。     

酶标免疫测定HCG的临床应用

酶标免疫测定绒毛膜促性腺激素(HCG)的方法是一种快速而灵敏的单克隆免疫分析方法,能够定性或半定量测出血清或尿中人绒毛膜促性腺激素的含量,其单克隆抗体对HCG的特异性高,同时有五种抗体混合敏感性强。用HCG酶标免疫目力测定盒测定HCG技术简单易于掌握不需特殊设备,结果迅速,可及时为临床提供可靠的诊断依据。