氯睾酮人工抗原的合成与鉴定

采用琥珀酸酐法将氯睾酮(CLO)衍生化,再用碳二亚胺法(EDC)将氯睾酮的半抗原与BSA和OVA偶联,制备免疫原和检测抗原,紫外扫描和红外光谱鉴定表明人工抗原合成成功,CLO与BSA偶联比为16.5∶1.利用CLO-BSA免疫Balb/C小鼠制备多克隆抗血清,间接ELISA结果表明:3只小鼠抗体效价分别为1.6×104、3.2×104和1.6×104;间接竞争ELISA检测2号鼠抗血清的灵敏度为64 ng/mL.氯睾酮人工抗原的合成为开发ELISA试剂盒检测食源性动物产品中CLO残留奠定基础.     

抗重金属镉离子鼠源性多克隆抗体的制备与鉴定

制备并鉴定针对重金属镉离子的小鼠多克隆抗体.选取异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)做金属螯合剂,偶联Cd~(2+)及载体蛋白BSA、OVA,制备人工抗原并鉴定,配合佐剂乳化后以高、中、低剂量分别免疫Balb/C小鼠,以获得较好的抗重金属镉离子小鼠多克隆抗体血清.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定所获抗体的效价、敏感度、特异性.结果显示:小鼠抗血清效价均在10~(-3)～10~(-4),中剂量抗原免疫组小鼠抗体血清更加稳定、特异性强,利用该组多抗建立间接竞争ELISA(icELISA)标准曲线,M-3号小鼠敏感性最强,回归方程为y=0.1123x-0.1638,IC_(50)质量浓度为368.70μg/L,检测限质量浓度为25.53μg/L,该抗体除与汞离子螯合物的交叉反应率为72.58%之外,与Cu~(2+)、Zn~(2+)、Pb~(2+)、Cr~(3+)、Mo~(6+)、Fe~(3+)、Co~(2+)均无交叉反应.获得了能用于镉离子免疫检测的高效价Cd~(2+)多抗,为检测产品的开发打下基础.     

蒜氨酸抗原性探讨

用蒜氨酸、蒜氨酸与卵清蛋白偶联物免疫动物实验探讨蒜氨酸免疫原性.蒜氨酸抗原、蒜氨酸与卵清蛋白偶联抗原,常规免疫小鼠;用蒜氨酸包被"O"型人红细胞进行玻片与微量稀释法间接血凝试验检测蒜氨酸抗体;用蒜氨酸抗原片和蒜氨酸组织切片进行免疫荧光试验鉴定蒜氨酸抗体.研究结果表明,蒜氨酸免疫小鼠,没有产生蒜氨酸抗体;蒜氨酸与卵清蛋白偶联抗原免疫小鼠,获得蒜氨酸抗体,间接血凝效价达到1∶32;免疫荧光结果与蒜氨酸体内分布特点相符,蒜氨酸为半抗原物质.     

一种水溶性免疫佐剂应用于小分子化合物单克隆抗体制备的效果评价（英文）

目的:评价一种新型水溶性免疫佐剂在制备小分子化合物单克隆抗体(单抗)中的应用效果。创新点:采用一种新型水溶性免疫佐剂,快速制备了分别针对4种农药和1种海洋毒素的高亲合力单抗,且其性能与以往采用弗氏佐剂获得的相应单抗非常接近。方法:本研究以4种农药和1种海洋毒素为目标分析物,采用一种新型水溶性佐剂与小分子抗原相互混合,直接对Balb/c小鼠进行小腿肌肉注射免疫。经过2~3次免疫后进行腹腔注射常规末次免疫,细胞融合后筛选出了相应的杂交瘤细胞株,制备并鉴定了针对上述半抗原小分子的特异性单抗。结论:采用该水溶性免疫佐剂制备抗原注射溶液无需乳化过程,免疫操作简便,且对小鼠负面效应较小;虽然该处理小鼠产生的抗血清效价并没有像常规弗氏免疫佐剂带来的效价值高,但细胞融合后筛选得到有效细胞株的概率尚可;获得的针对目标分析物的单抗在灵敏度和特异性等方面都接近于以往采用弗氏佐剂获得的单抗。试验结果表明,该水溶性免疫佐剂适用于针对小分子化合物单抗的高效制备。     

抗雌激素多克隆抗体的制备及效价鉴定

为了快速安全地检测动物性食品中是否含有过高浓度雌激素,本研究将半抗原雌二醇(Estradiol, E₂)合成为雌二醇-3-羧甲基醚(E₂-3-CME),再通过碳二亚胺(EDC)法与牛血清白蛋白(BSA)结合,合成完全抗原(E₂-BSA).将1 mg/只的E₂-BSA免疫雌性家兔,制备出抗雌激素的抗体.通过用酶联免疫吸附(Elisa)实验对产生的抗体进行效价鉴定.实验结果表明,第三次免疫后E₂-BSA产生的抗体光密度值(OD)最高,且与对照组,免疫一次和两次产生的抗体的OD值均具有明显差异,显示通过抗原免疫三次的家兔产生的抗体效价最高,可为后期通过此方法制备抗体和Elisa试剂盒奠定基础.     

离子色谱一脉冲安培法快速测定白酒中的游离氰化物

本文采用离子色谱-脉冲安培检测法,对白酒中的游离氰化物进行测定.结果表明:该方法在线性范围为1～100μg·L-1内,相关系数R=0.99997;对应白酒样品的方法检出限为12.5μg·L-1;精密度RSD为1.6％(n=6);回收率范围102％～107％.该方法快速、准确、精密度高,适用于白酒样品分析.     

碘- 四氯化碳萃取光度法间接测定痕量维生素C

试样处理后, 用偏磷酸- 乙酸体系浸提出维生素C (Vc) , 在一定的反应条件下,维生素C 与单质碘反应产生HI , 过量的I2 弃除后, HI 与Fe3 + 反应释放出一定量的I2 , 据此建立了碘- 四氯化碳萃取光度法间接测定痕量维生素C 的方法. 反应的酸度控制在pH110～310 ,共存离子基本不干扰测定, 维生素C 的最低检测限为0109μg·mL - 1 , 通过方法的回收率试验,并与其它测定方法进行比较, 得到了较为满意的结果, 回收率在95～98 %之间.     

兔化高免褪黑激素抗血清的制备

运用Ｍａｎｎｉｃｈ反应,将褪黑激素与ＢＳＡ联结起来制备完全抗原,用ＵＶ－２６０紫外仪测定ＭＬＴ与ＢＳＡ的联结比为１２∶１。用此抗原免疫新西兰大耳兔５只,经过６次免疫后,发现抗体效价平均１∶１００００（ＥＬＩＳＡ）。将抗血清经Ｎａ２ＳＯ４沉淀、Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－２００过柱层析、收集纯化抗体,用分光光度计７２１测其蛋白浓度。经５－羟色胺等阻断试验发现抗体特异性较高。     

新试剂2-[3-羧基-2,4,5-三氮唑偶氮]-5-二甲氨基苯甲酸与钯显色反应的研究

研究了2-[3-羧基-2,4,5-三氮唑偶氮]-5-二甲氨基苯甲酸(简称CTZADMB)与钯的显色反应。结果表明,在pH6.00的乙醇水溶液中CTZADMB与钯形成稳定蓝色络合物,其最大吸收波长位于585.2nm处,表现摩尔吸光系数为4.85×10~4l·mol~(-1)·cm~(-1),络合物的组成为pd:CTZADMB=1:2,钯浓度在0-1.6μg·ml~(-1)范围内服从比尔定律。所拟方法用于钯催化剂中微量钯的测定,结果满意。     

茜素红S标记分光光度法测定微量人血清白蛋白

研究有机染料茜素红S（alizarin red S,ARS）与牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）、人血清白蛋白（human serum albumin,HSA）的结合反应,选择实验的最佳条件：PH=5．10的B—R缓冲溶液3．00mL,4．00mL5．0×10-4mol／L茜素红S溶液．反应20min后,体系的吸光度很稳定,在入λ=420nm处有最大吸收峰,并且随着牛血清白蛋白（BSA）,人血清白蛋白（HSA）的加入,茜素红S的吸收峰下降．因此以茜素红S为标记物,根据其在波长420nm处吸收峰下降的程度,可用于定量测定BSA和HSA．测量BSA的线性响应范围为0～32．0μg／mL,相关系数为0．9987,测量BSA的线性响应范围为0～28．0μg／mL,相关系数为0．9968．该方法具有较高的灵敏度和选择性,用于实际试样分析,实验结果令人满意．