HPLC法测定大鼠静脉注射色胺酮的血药浓度及其药代动力学研究

目的:建立HPLC法测定静脉注射色胺酮后大鼠血浆中色胺酮的浓度,研究其在体内的药代动力学过程。方法:色谱条件:色谱柱Agilent 5 HC-C18 (250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-水(53∶47,v∶v),流速1mL/min,紫外检测器检测波长251nm,柱温30℃。以4(3H)-喹唑酮为内标物。内标标准曲线法测定生物样品中色胺酮含量,研究其体内药代动力学。结果:色胺酮在0.06～2μg/mL线性关系良好(r=0.999 7);平均回收率大于85%,批内和批间的RSD均小于15%。大鼠静脉注射75 mg/kg的色胺酮后,其体内主要药动学参数t1/2α为0.133h,t1/2β为2.193h,AUC(0-t)为4.288mg/(L·h),MRT为1.934h。结论:试验结果表明本法操作简单,灵敏度高,重现性良好,结果准确可靠,可以用于色胺酮在大鼠体内的药代动力学参数研究。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测薯蓣皂甙元

建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测器(ELSD)快捷测定、控制黄姜薯蓣皂甙元产品纯度的方法。采用色谱柱:ZORBAX SB-C18(4.6mm×150mm,5μm),流动相V(水)∶V(乙腈)=10∶90(等梯度),柱温28℃,进样量10μL。ELSD:气流流速1.2mL/min,漂移管温度80℃。在0.1~0.4mg/mL范围内,薯蓣皂甙元峰面积与其质量浓度呈良好的线性关系,R2=0.996,5次RSD 1.2%。与常规应用的HPLC分析方法对比表明,利用HPLC-ELSD检测更简单、快速、准确,学生更加能理解HPLC测试方法。     

肉桂药材干燥前后挥发油化学成分差异及抗耐药菌活性比较

采用GC-MS法对干燥前后肉桂挥发油提取的化学成分进行鉴定分析,通过杯碟法对耐药菌的抗菌活性进行研究。结果表明:鲜、干肉桂挥发油的得率分别为2. 19±0. 16%、1. 41±0. 15%,气相色谱-质谱法分别鉴别出14和13种成分,主要抗菌活性成分肉桂醛在鲜品挥发油中比干品中高4. 63%,两者之间有明显的成分差异。鲜品和干品肉桂油对耐万古霉素金黄色葡萄球菌分别为(1. 02±0. 28)cm和(0. 98±0. 28) cm,MIC分别为(0. 27±0. 23) mg/mL和(0. 46±0. 12)mg/mL;对大肠杆菌的抑菌半径分别为(1. 53±0. 11) cm和(1. 46±0. 41) cm,MIC分别为(0. 27±0. 23) mg/mL和(0. 35±0. 14) mg/mL。鲜品肉桂油比干品肉桂油拥有更多活性成分,具有更好的抗菌活性,应加强对肉桂产地加工干燥过程的质量控制,保障药材的品质。     

高效液相色谱法测定山楂果中熊果酸和齐墩果酸

本研究建立了测定山楂果中熊果酸(UA)和齐墩果酸(OA)的高效液相色谱法方法。通过优化检测波长、流动相组成,确定了色谱条件：采用Aupos Classical C18柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),甲醇-甲酸水溶液(pH=3.0)(90∶10, V/V)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长210 nm。在此色谱条件下,熊果酸和齐墩果酸在14 min内实现良好分离,熊果酸和齐墩果酸峰面积与其浓度分别在0.005～0.1 mg/mL和0.0025～0.05 mg/mL范围内呈良好线性。平行测定6次混合标准溶液,熊果酸和齐墩果酸峰面积的RSD分别为0.81%和1.84%。平行测定6份山楂样品中的熊果酸和齐墩果酸,其峰面积的RSD分别为3.60%和4.35%。UA和OA的加标回收率分别为97.5%和98.0%。该方法具有流动相组成简单,分离效果好,分析时间短等优点,可用于山楂质量控制。     

女宝胶囊中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的HPLC分析

目的 :建立HPLC法同时测定女宝中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法。方法 :用甲醇提取女宝中吴茱萸碱和吴茱萸次碱 ,HPLC分析 ,紫外检测器检测。色谱柱 :YWG -C18(10 μm ,2 5 0mm× 4 .6mm)。流动相 :水 -甲醇 -乙腈梯度析脱。流速 :1.0ml/min。柱温 :30℃。检测波长 :2 2 5nm。结果 :吴茱萸碱的回归方程为Y =14 7.37X + 1186 .32 ,相关系数为0 .9999,线性范围为 5～ 10 0 0 μg/mL ,回收率为 99.83% ;吴茱萸次碱的回归方程为Y =10 1.19X + 2 79.81,相关系数为 0 .9999,线性范围为 4 .5～ 90 0 μg/mL ,回收率为 98.72 %。本文所用女宝胶囊中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量分别为 0 .0 82 % (0 .10 3mg/粒 )和 0 .0 5 5 % (0 .0 6 9mg/粒 )。结论 :本文方法稳定性高 ,重现性好 ,操作简单。是生产女宝胶囊质量监控较理想的方法。     

RP-HPLC法同时检测石榴皮3种多酚类提取物含量研究

采用RP-HPLC法,Symmetry C18(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长272 nm同时检测安石榴苷、鞣花酸和没食子酸含量。采用SPSS 17.0对测定结果进行分析,比较不同品种石榴皮中各成分的含量差异。结果表明,安石榴苷、鞣花酸、没食子酸分别在13.120～209.92μg/mL,13.325～213.20μg/mL和13.275～212.40μg/mL与峰面积呈线性关系,平均加样回收率为97.58%(RSD:1.02%,n=6),99.31%(RSD:0.94%,n=6)和98.63%(RSD:0.70%,n=6)。白玉石榴皮中安石榴苷、鞣花酸的含量分别为7.13%和1.00%,比红酸石榴皮中的含量高。安徽地区石榴皮中安石榴苷、鞣花酸、没食子酸3种成分含量同时检测方法的灵敏度高、准确度好、重现性一致,可用于安徽本地石榴皮部位中安石榴苷、鞣花酸、没食子酸成分含量同时检测。     

HPLC-荧光法测定中成药中厚朴酚与和厚朴酚含量

建立了一种用高效液相色谱(HPLC)荧光检测法同时测定中成药中厚朴酚与和厚朴酚含量的新方法.使用BDSC18(100mm×4.0mm,i.d.,3μm)色谱柱,流动相为乙腈0.3%-H3PO4(50∶50,V/V),荧光激发波长为220nm,发射波长为380nm.厚朴酚在0.08～246.0μg/mL范围内线性关系良好,检出限为18.4ng/mL,平均回收率为90.2%￣102.7%,日内RSD为0.80%～4.36%,日间RSD为2.18%～5.92%(n=5);和厚朴酚在0.1～231.0μg/mL范围内线性关系良好,检出限为8.7ng/mL,平均回收率为90.0%～98.1%,日内RSD为0.43%～5.53%,日间RSD为3.97%～6.50%(n=5).该法灵敏度高、选择性好、简便、易重复,为香砂养胃丸、藿香正气软胶囊、国公酒中厚朴酚与和厚朴酚的含量测定提供了有效方法.     

高效液相色谱法测定中药延胡索炮制前后延胡索乙素的含量

目的:测定延胡索中有效成分延胡索乙素的含量.方法:采用美国Agilent ZORBAX SB- C18(4.6×150mm,5μm)色谱柱,流动相甲醇-0.1%磷酸(85∶15),检测波长λ=280nm.结果:延胡索乙素在0.02～0.2mg/mL范围内线性关系良好,回收率为100.4%,RSD为1.0%.结论:醋制后延胡索中延胡索乙素的含量明显高于醋制前延胡索中延胡索乙素的含量,测定方法简便、可靠,适合延胡索的质量控制.     

菊花脑花活性成分提取工艺及挥发油成分分析

以滁州本地菊花脑花作为实验材料,通过单因素和正交实验对常规水提法和超声波辅助提取菊花脑花中黄酮和总酚的工艺进行优化;并利用水蒸气蒸馏法提取菊花脑花中的挥发油,对其成分进行GC-MS分析.研究发现:常规水提取法对菊花脑花黄酮和总酚进行提取的最优的条件是料液比1:35、水浴温度80℃、提取时间100min,此时黄酮和总酚的得率分别为12.41mg/g和7.58mg/g;超声波辅助提取法对菊花脑花黄酮和总酚进行提取的最优条件是料液比1:35、提取剂浓度60%、超声功率200W、超声时间20min,此时黄酮和总酚的得率分别为20.34mg/g和7.97mg/g;蒸馏法所得挥发油的GC-MS分析出约50种成分,其中含量较高的有樟脑(9.92%)、β-倍半水芹烯(7.75%)、石竹烯(5.98%)和檀香醇(5.87%).     

UPLC-Q-TOF-MS测定赣南脐橙中的硒代氨基酸

建立了测定赣南脐橙中硒代胱氨酸(SeCys_2)、甲基-硒代半胱氨酸(MeSeCys)和硒代蛋氨酸(SeMet)的UPLC-Q-TOF-MS分析方法.样品通过超声水提取,选取AccQ·Tag^(TM)氨基酸色谱柱(3.9 mm×150 mm),以水-甲醇(90∶10)为流动相进行分离,经电喷雾离子源(ESI)正离子化后,采用多反应离子监测方式(MRM)和外标法定量.实验结果表明,SeCys_2、MeSeCys、SeMet在5 ng/mL～100 ng/mL范围线性良好,相关系数R(TM)氨基酸色谱柱(3.9 mm×150 mm),以水-甲醇(90∶10)为流动相进行分离,经电喷雾离子源(ESI)正离子化后,采用多反应离子监测方式(MRM)和外标法定量.实验结果表明,SeCys_2、MeSeCys、SeMet在5 ng/mL～100 ng/mL范围线性良好,相关系数R²≥0.997;3种硒代氨基酸的加标回收率在78.8%～92.2%之间,相对标准偏差在2.1%～7.5%之间;SeCys_2、MeSeCys、SeMet的检出限分别为6 ng/mL、10 ng/mL、1 ng/mL.因此,该方法可以用于富硒脐橙中3种硒代氨基酸的准确和高效检测.     

超声提取-高效液相色谱测定滁菊中的木犀草素

为建立超声波提取-高效液相色谱法测定滁菊中木犀草素的方法。采用purospher star RP-18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以0.1%磷酸溶液(pH=2.6)-甲醇(40:60)为流动相;流速为1 mL/min;检测波长为327 nm。结果表明,木犀草素在10 min内实现快速基线分离,且在0.002~0.05 mg/mL范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为99.22%,RSD为1.7%(n=3)。该方法简便快速,可作为滁菊原药材的质量标准。     

离子色谱法测定黑炭标志物苯多羧酸的含量

基于苯多羧酸的阴离子特性,建立了离子色谱电导检测器测定黑炭标志物——苯多羧酸含量的方法。采用IonPac AS11-HC阴离子色谱柱(4×250 mm),以KOH为淋洗液进行梯度洗脱,进样量为25μL、流速1.0 mL/min的条件下,测定热解碳经硝酸氧化后的产物中苯多羧酸的含量。结果表明6种苯多羧酸质量浓度在0.1～40.0 mg/L内线性良好,r~2≥0.997 9,检测限在0.016 50～0.069 08 mg/L之间,加标回收率在75.2%～101.0%,方法准确可靠。     

高效液相色谱法同时测定奶粉或饲料中的三聚氰胺和三聚氰酸

食品或饲料中三聚氰胺和三聚氰酸经乙腈水萃取、提纯后,采用高效液相色谱(HPLC)法测定,外标法定量.对色谱分离条件进行了优化,三聚氰胺在0.1156～11.56 mg/L范围内线性良好,复相关系数r2=0.9997,平均加标回收率在95.59％～105.97％之间,相对标准偏差为0.14％～0.29％,检出限(S/N=3)为0.012 mg/L.三聚氰酸0.1020～10.20mg/L范围内线性良好,复相关系数为r2=0.9995,平均加标回收率在77.44％～88.77％之间,相对标准偏差为0.32％～0.86％,检出限(S/N=3)为0.051 mg/L.该法能满足食品或饲料中三聚氰胺和三聚氰酸检验工作的需要.     

高效液相色谱法快速测定饮料中苯甲酸的方法研究

采用反相高效液相色谱法(HPLC)测定了饮料中的苯甲酸含量,建立了快速测定苯甲酸的方法.色谱条件为:流动相体系为甲醇与乙酸铵溶液(0.02mol/L),体积比为5:95,流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为230 n m,柱温为25℃,进样体积为10μL.采用外标法定量,在5～100μg/ml范围内,回归方程相关系数为0.99999,检出限为0.38μg/mL.饮料中苯甲酸的加标回收率在97.80%～102.41%.按上述色谱条件平行测定样品5次,峰面积相对标准偏差(RSD)为0.1357%.说明方法的精密度高,重现性良好.     

高效液相分析法在实验教学中的应用

通过2则具体实例讨论了高效液相色谱(HPLC)分析法在实验教学中的应用。一则是在实验选修课中应用HPLC分析法分析学生自己合成的六苄基六氮杂异伍兹烷(HBIW)的纯度;另一则是在本科生的实践课中,引导学生参与课题研究,应用HPLC分析法建立六硝基六氮杂异伍兹烷(HNIW)的标准曲线,HNIW线性浓度范围为0.08～1.5 mg/mL,同时,采用内标法分析不同HNIW样品的纯度,进行了方法重复性的比较。结果表明,该方法标准偏差小于1%,满足实验要求。最后,针对HPLC分析法的影响因素,如柱温、流动相和内标物进行了讨论。     

HPLC法测定猪血浆中土霉素

本文研究和发展了高灵敏度测血浆中土霉素含量的HPLC方法.用VP-ODS(5um,150×4.6 mm)色谱柱,以乙腈:PBS=20:80(PBS:0.05mol/LK2HPO4、0.01mol/LEDTA、30mmol/L三乙胺再用HCl调节溶液pH为6.5该溶液即为PBS溶液)为流动相,流动相流速1mL/min,以353nm为检测波长.土霉素在0.01ug/mL～3.00ug/mL范围内呈良好的线性关系,检出限为0.01ug/mL,平均回收率为97.28%,平均相对标准偏差为1.98%.本方法简便,分离度高,重现性好,检出限低,适用于血浆中土霉素检测和含量测定.     

离子色谱法测定美司钠注射中2-巯基磺酸钠的含量

基于2-巯基磺酸钠的离子性,首次建立了离子色谱法测定美司钠注射液中2-巯基磺酸钠含量的新方法。采用阴离子色谱柱IonPac AS19(4mm×250mm)以60mmol/L的KOH为淋洗液,进样量为25μL、流速为1.0mL/min的条件下,测定美司钠注射液中2-巯基磺酸钠的含量,结果在0.5~20.0mg/L范围内线性关系良好,相关系数为0.999 6,检出限为0.065 3mg/L,加标回收率在95.4%~101.0%之间,方法准确可靠。     

吴茱萸不同提取物对铜绿假单胞菌的体外抑菌作用研究

目的:研究吴茱萸乙醚提取物、正丁醇提取物、挥发油、水提物对绿脓杆菌的抑菌作用.方法:用乙醚脱脂,得乙醚提取物;将乙醚脱脂后的吴茱萸用70%乙醇提取,正丁醇萃取,得正丁醇提取物1、2、3;用挥发油提取器提取挥发油;用蒸馏水加热回流法提取水提物.用以上提取物分别进行抑菌试验.测定吴茱萸正丁醇提取物1、2中的总皂苷、总黄酮的含量.结果:试验表明正丁醇提取物1、2、3和残渣均在31.25mg/mL时对临床绿脓杆菌仍有抑菌作用;挥发油在1.25%时对临床绿脓杆菌仍有抑菌作用;乙醚提取物对标准绿脓杆菌的MIC为250mg/mL,对临床绿脓杆菌的MIC为125mg/mL;水提物对标准绿脓杆菌无抑制作用,对临床绿脓杆菌的MIC为125mg/mL.正丁醇提取物1、2的总皂苷含量测定结果为28.71%、31.27%;总黄酮的含量分别为43.25%、44.31%.结论:研究提示正丁醇提取物1、2、3和残渣及挥发油对绿脓杆菌有明显的抑菌作用,四者之间的抑菌作用没有显著性区别.水提物和乙醚提取物对绿脓杆菌有抑制作用,抑菌作用比正丁醇提取物、残渣和挥发油的作用弱.     

HPLC法同时检测刺五加叶中原儿茶酸、绿原酸、刺五加苷E、金丝桃苷及槲皮苷的含量

建立HPLC同时定量刺五加叶中原儿茶酸、绿原酸、刺五加苷E、金丝桃苷及槲皮苷五种主要成分的方法。方法:色谱柱:Agilent Extend C18(4.6mm×25mm,5μm),柱温:30℃;流速1 mL/min;进样量:10μL;流动相A:0.3%磷酸-水溶液,流动相B:0.3%磷酸-乙腈;梯度洗脱,洗脱条件:0～3 min,95%A;3～10 min,95%～80%A;10～35 min,80%～70%A;35～40 min,70%～10%A;40～50 min,10%A;紫外检测波长:265 nm。结果:金丝桃苷和槲皮苷在20～240μg/mL,原儿茶酸、绿原酸、刺五加苷E分别在5～60μg/mL、167.2～2010μg/mL及6～72μg/mL下与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率在99.6%～103.1%,RSD为1.5%～2.7%。结论:本方法简便可靠,适用于刺五加叶中的多成分含量测定。     

高效液相色谱法测定化妆品中四种雌激素

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定化妆品中的4种雌激素(雌酮、雌三醇、炔雌醇、己烯雌酚)的方法。方法:色谱柱Inertsil ODS-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比为60:40),流速1mL/min,检测波长279nm,柱温:25℃。结果:4种雌激素成分在0.05～500μg/mL浓度范围内与其对应分峰面积线性关系良好。样品的平均加标回收率为97.3%～110.6%,RSD为2.9%～4.0%,化妆品中四种雌激素的检出限为0.02～0.03mg/kg。该方法操作简便、灵敏度高,能够同时检测化妆品中4种雌性激素的含量。