不同肥料处理下茶园土壤细菌和古菌群落的时间变化研究

研究目的：研究化学肥料和有机肥处理条件下,茶园酸性土壤细菌和古菌群落结构,以及氮素转化相关功能酶基因丰度的时间变化规律。 创新要点：研究肥料、土壤温度及土壤含水量对茶园酸性土壤细菌和古菌群落结构,以及氮素转化相关功能酶基因丰度的影响。 研究方法：应用末端限制性片段长度多态性（T-RFLP）技术分析茶园酸性土壤中细菌和古菌群落结构随时间的变化规律,应用荧光定量聚合酶链式反应（PCR）技术,研究茶园酸性土壤细菌、古菌、硝化作用功能酶基因（细菌和古菌amod基因）和细菌反硝化作用功能酶基因（narG、nirK、nirS和nosZ基因）丰度的时间变化规律。 重要结论：茶园土壤细菌和古菌群落结构受到肥料的影响,并随着取样时间有显著的变化。细菌、古菌和古菌的amoA基因的丰度在7月份最小,而细菌的amoA基因和反硝化作用功能酶基因（除nirK基因）的丰度在9月份最小。有机肥处理增加了细菌、古菌和氮素转化相关功能酶基因的丰度,但化学肥料的施用对菌群及功能酶基因丰度的影响较小。土壤温度显著影响了土壤细菌和古菌的群落结构。土壤含水量与细菌反硝化作用功能酶基因有显著的相关性。土壤有机碳含量与细菌、古菌及功能酶基因丰度之间有显著的相关性。     

毒死蜱胁迫下土壤细菌和真菌群落演替及其降解菌群的分子鉴定(英文)

研究目的:评价毒死蜱施用后对土壤细菌和真菌群落结构的影响,并对降解功能菌株进行分析。创新要点:通过聚合酶链式反应–变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)方法,揭示了毒死蜱施用后土壤细菌和真菌群落结构动态变化,并对试验土壤中的降解菌群进行分子鉴定。研究方法:将农田土壤用终质量分数5 mg/kg和20 mg/kg毒死蜱处理,同时以不施用毒死蜱为对照,定期采集土样进行毒死蜱残留测定并提取土壤DNA。将提取的土壤总DNA作为PCR反应模板,细菌群落结构分析采用对大多数细菌16S rRNA基因V3区具有特异性的引物GC-341F和517R,真菌群落结构分析采用ITS区特异引物对GC-ITS1f和ITS2f。DGGE图谱经Quantity One软件进行数字化分析,各泳道中的条带经标准化处理之后,条带的相对光密度构成一个矩阵,用Matlab软件进行主成分分析(PCA),用Dice法计算相似性指数CS,用MEGA 4.1软件构建系统发育树,进行聚类分析。之后,采用LB、察氏和高氏三种培养基结合的纯培养分离方法,从毒死蜱处理土样中分离具有降解功能的菌株。分别提取纯培养物的染色体DNA,利用ERIC-PCR对分离到的降解菌进行基因组指纹图谱分析,将典型肠杆菌基因间的重复共有序列–聚合酶链式反应(ERIC-PCR)指纹图谱类型的代表菌株进行16S rRNA基因(细菌和放线菌)或ITS区(真菌)扩增并测序,测序结果提交GenBank基因库,并进行BLAST比对,初步确定降解菌株的分子地位。重要结论:本实验条件下,毒死蜱降解符合一级动力学,5 mg/kg和20 mg/kg毒死蜱浓度下的降解方程分别为y=5.252e-0.09x和y=19.41e-0.08x。DGGE指纹图谱显示,毒死蜱施用后土壤真菌群落结构与对照相比发生很大改变,且毒死蜱处理样品真菌群落结构保持基本稳定,多样性指数明显提高(见图2b);主成分分析显示,毒死蜱处理样品与对照明显分在2个不同的区域,充分表明毒死蜱对土壤真菌群落结构影响迅速且持久(见图3b)。毒死蜱处理样品细菌群落结构只在试验前30天与对照相比明显不同,60天时已经恢复对照水平(见图2a),同时主成分分析图上,毒死蜱处理样品与对照也越来越靠近,最后聚在一起(见图3a),说明毒死蜱对土壤细菌群落结构影响短暂。最后,获得了9个典型的ERIC型毒死蜱降解菌株。     

基于事件相关电位的不同时间压力和数量下的图标记忆(英文)

为获取人机交互数字界面中图标元素生理评估的相关脑电成分和神经学依据,基于事件相关电位技术,采用改进的样本延迟匹配任务实验范式,研究在不同时间压力(4 000 ms,2 000 ms)和不同图标数量(3个图标,5个图标,10个图标)下图标记忆.实验结果表明:在图标认知过程中,P300有显著波幅差异,并在PZ电极附近存在最大波幅;P200在FCZ附近有明显波幅变化;P300和P200的波幅随任务难度的增加呈增大趋势;P300的潜伏期和任务难度呈现负相关现象.图标记忆特征的事件相关电位研究,对用户神经认知行为和界面可用性生理评估有非常重要的参考价值和指导意义.     

酪蛋白磷酸肽-无定形磷酸钙、不同玷污层的处理和储存时间对牙本质粘接的影响(英文)

研究目的:评价含有酪蛋白磷酸肽-无定形磷酸钙(CPP-ACP)的再矿化剂Tooth Mousse(TM)的使用、不同玷污层的处理以及样本储存时间对牙本质粘接微拉伸性能的影响。研究方法:将牙本质样本分成保留玷污层组和用15%乙二胺四乙酸(EDTA)处理90秒去除玷污层组。每组根据是否使用TM处理再分亚组。每个亚组分别用三种不同的粘结剂(两步法自酸蚀Clearfil SE Bond(CSE)、一步法自酸蚀G-Bond(GB)和全酸蚀Adper Single Bond 2(SB))与牙本质样本粘接,分别经过3天和6个月的去离子水储存。样本进行切割微拉伸测试并通过扫描电镜分析断裂界面模式。重要结论:经过再矿化剂TM预处理,可以减少牙齿的敏感性,并且对于这三种粘结系统经过长时间储存后的粘结性能没有影响。EDTA的处理对于长期储存的粘结性能没有显著影响。额外的TM和EDTA对短期(3天)粘接力会有效应,但对长期(6个月)的粘接力没有影响。