圈养大熊猫肠道致病菌的分离与初步鉴定

通过形态观察、选择培养、革兰氏染色和生理生化鉴定,对三只圈养亚成体大熊猫肠道致病菌进行了分离和初步鉴定.结果表明,分离到的19株菌分别属于大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、沙门氏菌(Salmonella)、志贺杆菌(Shigella)、变形杆菌(Proteus)、克雷伯氏杆菌(Klebsiella)、葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)等7个属,其中大肠埃希氏菌为优势菌.致病性试验结果显示,沙门氏菌、志贺杆菌、克雷伯氏杆菌、葡萄球菌和耶尔森氏菌对小白鼠有致病性.药敏试验结果表明,分离菌株对环丙沙星最敏感,高敏菌株占94.74%;其次是氧氟沙星和阿米沙星,高敏菌株分别占89.47%和42.11%;而对克林霉素、磺胺六甲氧嘧啶、罗红霉素、强力霉素等敏感性较差.该研究结果将为圈养大熊猫临床用药提供了科学参考依据.     

苹果皮孔斑点病的病原菌分离与鉴定

2010年2月下旬,从南阳市超市购买的苹果中,发现感染皮孔斑点病的病果,从病果上随机采集病斑,经表面消毒后将病斑置于PDA平板上进行病原菌分离.从19个病斑中共分离获得17株形态相同的链格孢属真菌,经单孢纯化后对代表性致病菌株AP-5-3进行病原学鉴定.根据病原菌的形态特征及其核糖体基因内转录间隔区(rDNA-ITS)序列分析,将菌株AP-5-3鉴定为细交链孢菌(Alternaria alternata).该菌的最适生长温度为28℃,最适合生长pH为6.5.本文对苹果皮孔斑点病的病因进行了讨论.     

青苹果竹芋的离体培养与快速繁殖技术研究

以青苹果竹芋带节的茎段作为外植体材料进行离体快繁研究,结果表明:芽启动诱导培养基以MS+6-BA(2.00 mg·L-1)+NAA(0.20 mg·L-1)为宜,增殖培养基以MS+6-BA(2.00 mg·L-1)+NAA(0.02 mg·L-1)为宜,青苹果竹芋无需生根培养即可获得较为健壮的小苗,移栽成活率可达95%以上.     

一种斜纹夜蛾新型病原菌的分离与鉴定

采用10倍系列稀释法从罹病斜纹夜蛾虫尸内分离出球状病原细菌IAM1218菌株,并按Kcoh规则进行侵染试验,同时,采用菌液PCR法扩增菌株的16S rDNA序列,在GenBank数据库中进行同源序列搜索,通过Bootstrap analysis法进行1000次重复抽样分析和Neighbor-Joining法构建分支系统树分析等,结果表明,该菌株各浓度处理的斜纹夜蛾幼虫死亡率均较高,最低达(83.22±4.72)%,LT50值最高为(24.50±1.08)h;罹病幼虫体色变黑,体壁易破裂流出粘稠状物质;IAM1218菌株(GenBank No.KC790981)和酪黄肠球菌Enterococcus casseliflavus的16S rDNA区序列完全相同,相似性为100%,且二者聚类在一组,概率100%。综合分析确定该菌株为酪黄肠球菌Enterococcus casseliflavus,属于一种新型的斜纹夜蛾致病病原细菌。这为斜纹夜蛾的生物防治提供了新的技术途径。     

一株珙桐内生细菌GT21的鉴定及系统发育分析

以从珙桐叶柄中分离得到的一株内生细菌GT21为出发菌株,对该菌株的形态学、生理生化特征等进行了系统研究,初步鉴定为芽孢杆菌（Bacillus）。通过PCR扩增16SrDNA并测序,用BLAST软件进行相似性比对,发现其相似性最高的菌株为BacilILlssp．SAP02-l,相似性97％。系统发育分析表明：GT2l单独一支,其余6株细菌聚为一支,GT21与Bacillussp．PKSWII和Bacillussp．LM6亲缘关系更近,而与Bacillussp．SAP02—1等亲缘关系较远。     

实验室间比对病原菌分离鉴定质控考核分析

目的通过参加实验室间比对病原菌分离鉴定质控考核,提高实验室检测水平和对突发公共卫生事件处置的技术应对能力,保证检测结果准确、可靠。方法依据WS271-2007《感染性腹泻诊断标准》及GB/T 4789-2008《食品卫生微生物学检验》对模拟肛拭样品进行病原菌分离鉴定。结果检出小肠结肠炎耶尔森氏菌0：3型和福氏志贺氏菌2b亚型,考核结果为符合要求。结论实验室间比对质控考核病原菌菌株的鉴定应结合革兰氏染色镜检、生化试验和血清学分型综合判断结果。     

不同线粒体基因作为DNA条形码鉴定按蚊的比较分析

蚊虫是最为重要的医学昆虫之一,准确鉴定其种类是防控的重要基础,但基于形态学鉴定困难较多。线粒体基因组序列获取便捷、已公布数据全面,作为DNA条形码开展分子鉴定具有突出优势。为进一步评估不同线粒体基因序列作为DNA条形码在蚊科昆虫鉴定中的作用,本研究以按蚊属为例,选取在GenBank数据库中线粒体全基因组序列公布最多的5种,每种随机下载5条序列,通过进化速率、遗传距离、条形码间隙和系统发育分析,比较了线粒体全部13个蛋白质编码基因分别作为DNA条形码鉴定种类的可靠性。结果表明按蚊线粒体的13个蛋白质编码基因中,ND5基因进化速率最快,而COI基因最为保守。除COIII基因外,其余基因均可作为DNA条形码开展分子鉴定,但其中ND4L基因的条形码间隙不显著,可能存在鉴定不准确的情况。剩余线粒体基因中,ATP8、COI、COII、CytB和ND5基因间隙显著且在种内和种间均具有较强的稳定性,优先推荐选用为DNA条形码,ATP6、ND1、ND2、ND3、ND4和ND6基因则存在种内或（和）种间不保守的情况,可以作为备选序列。研究结果为科学选用DNA条形码序列进行蚊科昆虫的鉴定提供了参考依据。     

瑞香内生真菌的研究I菌种分离及其分类鉴定

从瑞香(Daphne odora Thunb)的茎、叶分离获得植物内生真菌共20株，经显微形态观察将其中16株分类鉴定的8个属，结果表明，瑞香具有丰富的内生真菌资源，不同部位内生真菌的分布是不同的。     

鹅副粘病毒的分离与鉴定

采用鸡胚接种法从安徽凤阳某患病鹅群中分离到一株病毒。经HA与HI试验、血清中和接种鸡胚试验、病毒回归试验确认为鹅副粘病毒，并命名为WF00G株，参照新城疫病毒毒力的判定的标准及其方法，测定该分离株的鸡胚最小致死量平均死亡时间（MDT）、1日龄鸡脑接种致病指数（ICPI）和6周龄鸡静脉内接种致病指数（IVPI）分别为44.8h、1.81和2.32，结果表明该分离株具有与新城疫病毒（NDV）速发型相类似的毒力，属强毒力毒株。     

土壤微生物分离纯化和分子鉴定实验研究

通过微生物学实验项目“微生物分离纯化和分子鉴定”的实施,在生物技术专业本科生中开展了土壤细菌的分离、纯化和鉴定实验。学生在老师的带领下从太行山采集了土壤样品,利用平板法进行了土壤中细菌、真菌和放线菌的分离、纯化,对分离纯化的细菌进行了16SrDNA序列分析,结果表明：该细菌为假单孢杆菌。学生通过野外采集土样,实验室分离纯化的实验过程,既锻炼了学生的实验动手能力,又培养了学生的学习兴趣,激发了学生的学习热情,加深了学生对微生物理论知识的理解,提高了学生的创新能力。     

鹅副粘病毒的分离与鉴定

采用鸡胚接种法从安徽凤阳某患病鹅群中分离到一株病毒。经HA与HI试验、血清中和接种鸡胚试验、病毒回归试验确认为鹅副粘病毒 ,并命名为WF0 0 G株。参照新城疫病毒毒力判定的标准及其方法 ,测定该分离株的鸡胚最小致死量平均死亡时间 (MDT)、1日龄鸡脑接种致病指数 (ICPI)和 6周龄鸡静脉内接种致病指数 (IVPI)分别为 4 4 8h、1 81和 2 32 ,结果表明该分离株具有与新城疫病毒 (NDV)速发型相类似的毒力 ,属强毒力毒株。     

番茄髓部坏死病病原菌分离鉴定及药剂筛选

该研究对2020年浙江设施栽培的番茄进行病害调查,利用柯赫氏法则进行病原菌的致病性测定,采用形态观察、革兰氏染色法、脂肪酸含量测定及16Sr RNA-gyr B-rpoB-rpo D四基因联合系统发育分析等方法对分离的病原菌进行种属鉴定,并进行药剂室内毒力测定。该研究表明番茄髓部坏死病有明显的发病中心,设施大棚中易传播扩散;经形态学、生理生化和分子鉴定等方法确认该病原菌为绿黄假单胞菌（Pseudomonas viridiflava）;中生菌素对番茄髓部坏死病菌的抑制效果较好,其EC50仅0.106 mg/L,是较为理想的杀菌剂。     

常见微生物的分离与鉴定

在发酵工程中，首先要选育优良菌种，但由于微生物在自然条件下都是杂居混生的，因此要选育良种，就必须对其中的纯种微生物进行分离或鉴定。根据各类微生物的形态结构和新陈代谢类型，利用选择性培养基和鉴别性培养基，结合显微镜的镜检以及菌落的特征，可以把混杂在一起的微生物分离或鉴定出来。假若某一样品中含有大肠杆菌、硝化细菌、酵母菌、光合细菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌、乳酸菌微生物，你如何根据上述原理或方法，从理论上一一将其中的纯种微生物分离出来呢?     

苯酚降解菌株JY04的筛选、分离与鉴定

以绝缘材料厂活性污泥作为研究材料,以期获得一些酶活较高的苯酚降解菌.试验采用苯酚为唯一碳源的培养基进行筛选、16S rDNA序列扩增与序列测定以及构建系统发育树的方法进行细菌的分离与鉴定.结果表明:菌株JY04与葡萄球菌属的菌株聚为一簇,与Staphylococcus nepalensis E3菌株在同一分支中,且16S rDNA核苷酸序列相似性高达99%以上,因此,命名为Staphylococcus sp.JY04.     

根结线虫分类鉴定的原理和方法

根结线虫(Meloidogyne spp.)是严重危害植物的病原物,其种类繁多,常常造成毁灭性的危害.根结线虫的分类是防治其病害的基础和前提,形态学特征和分子生物学特征鉴定是主要的分类方法.根结线虫的形态学鉴定主要依据虫体的外部形态特征和内部结构特点进行分类鉴定.其根结线虫的分子生物学鉴定方法是通过分析核酸DNA、线粒...     

奶牛急性乳房炎病原的分离与鉴定

安徽某奶牛场奶牛发生了一起急性乳房炎，选择其中两头病牛乳汁样品，分别对其病原进行分离与鉴定。经细菌学检验表明，该场奶牛的急性乳房炎是由不溶血性金黄色葡萄球菌、溶血性革兰氏阳性停乳链球菌和不溶和不溶血性革兰氏阴性的大肠杆菌共同引起。     

奶牛急性乳房炎病原的分离与鉴定

安徽某奶牛场奶牛发生了一起急性乳房炎,选择其中两头病牛乳汁样品,分别对其病原进行分离与鉴定.经细菌学检验表明,该场奶牛的急性乳房炎是由不溶血性金黄色葡萄球菌、溶血性革兰氏阳性停乳链球菌和不溶和不溶血性革兰氏阴性的大肠杆菌共同引起.     

陆英中乌索酸的分离与鉴定(Ⅰ)

目的：分离和鉴定陆英中抗肝炎主要成分乌索酸．方法：采用“醉提凝析法”提取乌索酸．结果：产品经理化常数和光谱学鉴定，确征为乌索酸，其提取率达90．2％，纯度达99．72％．结论：本工艺技术具有先进合理、实用可行、有利于工业化生产的特点．     

高效秸秆发酵剂优良菌种的分离筛选与鉴定

用ＳＬ选择性培养基从青贮饲草中分离出１０株乳酸菌,并从革兰氏染色特性、形态特征、培养特性和生化反应等方面进行了初步鉴定。结果明串株菌２株、片球菌２株、植物乳杆菌３株、发酵乳杆菌３株。按不同菌株搭配制成发酵剂。经发酵剂处理的秸秆喂牛增重效果显著。