提高细胞融合率的实验方法探讨

提出了通过调整p H值的方法,成功将PEG8000作为诱导剂应用于细胞融合过程提高细胞融合率,效果优于PEG4000作细胞融合的诱导剂,使用不同细胞验证并提供了最佳细胞浓度。采用PEG8000诱导,GKN缓冲系统,蟾蜍红细胞为原料,在p H8.0环境下进行细胞融合,融合率最高。实验验证,此方法稳定可靠,重复性好,具有操作简便,快速、准确可重复等优点,为细胞融合实验提供了新方法。可用于细胞融合实验教学,也可为科研、生产提供参考。     

鸡血细胞体外融合的影响因素研究

实验研究了鸡血细胞密度、PEG浓度、PEG作用时间、鸡血细胞悬液放置时间、钙离子浓度等因素对鸡血细胞体外融合的影响．结果表明：细胞密度为1×107个/mL ,PEG浓度为50％,PEG作用时间为10 min ,细胞悬液放置时间为10 min ,钙离子浓度为50.0 mmol/L时细胞融合率最高．     

原生质体形成及融合因素分析

本实验以经过青霉素筛选后的两株絮凝菌为对象,分别测定其溶菌酶处理前总菌数、溶菌酶处理后总菌数和原生质体再生菌数,计算原生质体形成率和再生率,并对PEG的作用浓度和时间进行优化。实验结果：F2原生质体形成率为99.97%,F6原生质体形成率为99.96%,F2原生质体再生率为0.4225%,F6原生质体再生率为0.5423%,初步判断溶菌酶处理后得到的原生质体在质量和数量上满足细胞融合需求,确定了原生质体融合PEG最佳作用浓度为30%,最佳作用时间为10 min,以保证原生质体融合的完成。     

鱼类细胞融合

人工诱导鱼类细胞融合是细胞工程中的一项重要技术 .鱼类细胞是一种比较理想的融合材料 .概述了鱼类细胞融合研究的发展和主要成果 ,鱼类细胞融合技术主要包括病毒法、PEG法、电融合法、激光微束法 .同时指出了鱼类细胞融合中的值得继续探讨的问题     

PEG诱导鸡红细胞融合影响因素探讨

细胞融合技术是近年来迅速发展起来的一项新兴细胞工程技术,本研究以鸡红细胞为材料,以PEG（Mw=4000）为诱导剂,研究不同的PEG体积分数（0%、25%、50%、75%、100%）,不同的融合时间（5 min1、0 min、15 min2、0 min2、5 min）,不同的融合温度（20℃、30℃、35℃、38℃、40℃）对鸡红细胞融合率的影响.结果显示：PEG的体积分数为50%,融合时间为15 min,温度为38℃时融合的效果最好.     

鱼类细胞融合

人工诱导鱼类细胞融合是细胞工程中的一项重要技术，鱼类细胞是一种比较理想的融合材料。概述了鱼类细胞融合研究的发展和主要成果，鱼类细胞融合技术主要包括病毒法，PEG法，电融合法，激光微束法。同时指出了鱼类细胞融合中的值得继续探讨的问题。     

聚乙二醇包覆的醋酸泼尼松龙纳米脂质体的制备及性能研究

用聚乙二醇(PEG)包覆脂质体来提高脂质体的稳定性．先用反相蒸发法制备醋酸泼尼松龙脂质体,然后将PEG溶液与醋酸泼尼松龙脂质体混合即可制得PEG包覆的脂质体,原子力扫描探针显微镜照片与粒径证明PEG在脂质体外形成了一层膜,相比较于未包覆的脂质体,PEG包覆的脂质体的包封率和粒径都有所增加,泄漏率降低,其泄漏率随时间和温度的增加而增加,但低于未包覆的脂质体．通过测定粒径和泄漏率的变化说明包覆PEG的脂质体要比未包覆的稳定．     

细胞融合技术研究进展

细胞融合技术作为细胞工程的一项核心基础技术已在农业、医药、环保等领域得到了迅速发展和应用.综述细胞融合技术中的常用方法:仙台病毒(H VJ)诱导法、聚乙二醇(PEG)化学诱导法、电融合诱导法、激光诱导法及此技术的最新研究进展:空间细胞融合技术、离子束细胞融合技术、非对称细胞融合技术等,并对它们的优缺点进行讨论.     

水分胁迫对水稻膜脂过氧化几个生理指标的影响

研究水分胁迫条件下水稻幼苗膜脂过氧化过程中生理变化,结果表明,PEG浓度在10%内,随着胁迫的加深SOD、POD、CAT活性逐渐增加,超过10%开始逐步下降;MDA含量随着胁迫的加深逐渐上升;Vc含量在PEG浓度小于10%时,随胁迫加深含量逐渐上升,当PEG浓度大于10%后,随胁迫加深呈下降趋势.     

聚乙二醇对乌塌菜种子发芽特性的影响

目的:明确乌塌菜种子在发芽初期对不同浓度聚乙二醇(PEG)溶液的耐受性.方法:以乌塌菜种子为试验材料,研究不同浓度PEG溶液(0、50、100、200、300、400 mmoL/L)对种子的相对发芽率、发芽势、相对发芽指数、相对萌发活力指数、相对伤害率、主根长、下胚轴长、叶绿素含量及根系活力等相关指标的影响.结果:乌塌菜种子在PEG浓度为50 mmol/L,其相对发芽率、发芽势、叶绿素含量、根系活力等指标分别为108.7％、70％、3.8 mg/g·FW和0.132 μg/g·FW·h,均显著高于对照,而100 mmol/L PEG溶液处理其相应指标分别为95.6％、61％、3.0 mg/g·FW和0.125μg/g·FW·h,均与对照差异不显著.结论:随着PEG浓度的逐渐升高,对各指标的抑制作用也逐渐增强.乌塌菜种子可耐100 mmol/L的PEG胁迫.     

浅析民办高等教育发展的制约因素与对策

民办高等教育作为高等教育的重要组成部分,在高等教育大众化进程中发挥了重要的作用,但还存在着一些问题,这些问题如果不能及时地得到解决,将会影响我国高等教育整体质量的提高。因此,积极转变观念,提高对民办教育地位与作用的认识,加大政府的政策支持和资金投入,重视民办教育的理论研究,突出民办教育的办学特色,夯实办学基础,是促进民办高等教育不断发展的基本对策。     

神经癌细胞PC12对二甲基亚砜耐受剂量的分析

通过观察不同剂量二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide DMSO)作用下PC12细胞形态和生长状态的变化,确定PC12细胞对DMSO的耐受剂量.按照一定浓度梯度(V/V)将DMSO加入培养液干预后的24、48和72 h于倒置相差显微镜下观察AO/EB染色前后细胞的形态特征,同时用四甲基偶氮唑蓝(MTT)显色法检测细胞的生存率和计算半数抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC50).结果表明:DMSO浓度为14 mL/L时,24 h内90%的PC12细胞生长正常,形态完整,活力与对照组比较无差别,浓度提高到20 mL/L时,24 h时细胞生存率可下降27%,随着作用时间延长,细胞生存率进一步降低;24、48和72 h对应的IC50值分别为31.4、23.9和19.2 mL/L.因此,对PC12细胞而言,24 h内的应用终浓度应低于14 mL/L,干预时间如需延长,DMSO的应用剂量应相应降低.     

聚乙二醇活化酯修饰重组人白细胞介素-2

目的研究单甲氧聚乙二醇三聚氯氰(Methoxypolyethylene Glycol activated with cyanuric chloride,CC-mPEG)和单甲氧聚乙二醇硝基苯基碳酸盐(Methoxypolyethylene Glycol p-nitrophenyl carbonate,NC-mPEG)两种PEG活化酯修饰重组人白细胞介素-2(rhIL-2)的修饰条件和修饰后的性质。方法在不同反应条件下用CTLL-2细胞/MTT法测定rhIL-2修饰后的生物学活性。结果随着PEG活化酯的摩尔比提高,修饰率增加,用CC-mPEG修饰rhIL-2后生物学活性损失很大,PEG400的加入可以降低CC-mPEG的投料摩尔比;NC-mPEG修饰的rhIL-2后生物学活性基本保留。     

Effect of small bowel preparation with simethicone on capsule endoscopy

Background: Capsule endoscopy is a novel non-invasive method for visualization of the entire small bowel. The diagnostic yield of capsule endoscopy depends on the quality of visualization of the small bowel mucosa and its complete passage through the small bowel. To date, there is no standardized protocol for bowel preparation before capsule endoscopy. The addition ofsimethicone in the bowel preparation for the purpose of reducing air bubbles in the intestinal lumen had only been studied by a few investigators. Methods: Sixty-four participants were randomly divided into two groups to receive a bowel preparation of polyethylene glycol (PEG) solution (Group 1) and both PEG solution and simethicone (Group 2). The PEG solution and sime-thicone were taken the night before and 20 min prior to capsule endoscopy, respectively. Frames taken in the small intestine were examined and scored for luminal bubbles by two professional capsule endoscopists. Gastric emptying time and small bowel transit time were also recorded. Results: Simethicone significantly reduced luminal bubbles both in the proximal and distal small intes-tines. The mean time proportions with slight bubbles in the proximal and distal intestines in Group 2 were 97.1% and 99.0%, respectively, compared with 67.2% (P<0.001) and 68.8% (P<0.001) in Group 1. Simethicone had no effect on mean gastric emptying time, 32.08 min in Group 2 compared with 30.88 min in Group 1 (P=0.868), but it did increase mean small intestinal transit time from 227.28 to 281.84 min (P=0.003). Conclusion: Bowel preparation with both PEG and simethicone significantly reduced bubbles in the intestinal lumen and improved the visualization of the small bowel by capsule endoscopy without any side effects observed.     

酿酒酵母转化方法的新探索

在现有电转化和聚乙二醇/醋酸锂(PEG/LiAc)诱导的化学转化的基础上,进一步研究和探索了酿酒酵母感受态细胞不同预处理及相应的转化条件对转化效率的影响。结果表明:处于对数生长早期(OD600=0.6)的酵母细胞的转化效果最佳;电转化中分别以120 mmol/L的DTT和300 mmol/L的LiAc预处理感受态酵母菌10 min,可以得到较高的转化效果;联合使用120 mmol/L DTT和300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到7.15×105cfu/μg,PEG/LiAc诱导的化学转化中使用300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到2.75×105cfu/μg,远高于文献报道的水平。同时证明了改进后的转化方法同样能够提高外源DNA同源重组转化效率。     

试论企业应如何加强公关危机管理

随着市场竞争的日趋激烈，公关危机犹如病毒一般，随晨都有可能侵蚀企业的机体，但企业只要保持高度的警觉和采取积极果断的措施，就能将其危害控制在最小范围内，本从危机发生前、发生时和发生后这三个阶段分别阐述企业应采取的相应管理措施，为现代企业预防和处理公关危机事件提供一些有益的参考。     

Effective extraction of elastase from Bacillus sp. fermentation broth using aqueous two-phase system

INTRODUCTION Aqueous two-phase system (ATPS) is widely used in biochemistry and biotechnology for purifica- tion of proteins (Diamond and Hsu, 1992; Balasubramaniam et al., 2003), enzymes (Pan et al., 2001; Bim and Franco, 2000), amino acids (Li et al., 2002), antibiotics (Yang et al., 1994; Guan et al., 1994), nucleic acids (Ohlsson et al., 1978; Kimura, 2000), aroma compounds (Marco et al., 2000) and lactic acid (Planas et al., 1998). ATPS is mainly composed of two-incompatible p…