Monoclonal antibody-based ELISA and colloidal gold-based immunochromatographic assay for streptomycin residue detection in milk and swine urine

A protein conjugate of streptomycin (streptomycin-bovine serum albumin (BSA) conjugate) was prepared and used as immunogen to produce monoclonal antibodies (MAb). One hybridoma secreting anti-streptomycin MAb was obtained and then used to produce MAb. The MAb named 13H5 showed the 50% maximal inhibitory concentration (IC50) value of 4.65 ng/ml and the IC20 value of 0.21 ng/ml in phosphate buffered saline (PBS). At optimum conditions, an indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and a co...     

甘薯病毒的分子生物学研究进展

高能源作物甘薯的种植面积不断扩大,病毒的感染日趋严重.关于甘薯病毒的研究国内外已取得较大进展,但是其分子生物学的研究尚需进一步深入.本文对甘薯病毒的分子生物学分类、基因组学、蛋白质组学及致病分子机理的研究进展作一综述,并且提出了今后的研究方向.     

Development of a class-specific polyclonal antibody-based indirect competitive ELISA for detecting fluoroquinolone residues in milk

Modified 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC) method was employed to synthesize the artificial antigen of norfloxacin (NOR), and New Zealand rabbits were used to produce anti-NOR polyclonal antibody (pAb). Based on the checkerboard titration, an indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (icELISA) standard curve was established. This assay was sensitive and had a working range from 0.12 to 68.40 ng/ml, with the half maximal inhibitory concentration (IC₅₀) and limit of detection (LOD) values of 2.7 ng/ml and 0.06 ng/ml, respectively. The produced pAb exhibited high cross-reactivity to fluoroquinolones (FQs) tested, and the IC₅₀ values to enoxacin, ciprofloxacin, and pefloxacin were 3.1, 3.4, and 4.1 ng/ml, respectively. It also indicated that the concentrations of NaOH and methanol in assay buffer should not be higher than 10% and 30%. When spiked in milk at 5, 20, and 50 ng/ml, the recoveries for NOR, enoxacin, ciprofloxacin, and pefloxacin ranged 90.5%–98.0%, 84.0%–95.2%, 94.0%–106.0%, and 89.5%–100.0%, respectively. The results suggest that this class-specific pAb-based icELISA could be utilized for the primary screening of FQ residues in animal-original products.     

一种快速检测水稻条纹病毒的胶体金免疫层析试纸条的研制（英文）

目的:制备一种检测水稻植物和传毒介体灰飞虱中水稻条纹病毒(RSV)的胶体金免疫层析试纸条,为水稻条纹叶枯病的田间调查和检测以及预测预警提供快速、实用的检测试剂。创新点:利用制备的RSV单克隆抗体,首次制备了能在5～10 min内快速、准确、灵敏、特异地检测水稻植物和灰飞虱体内RSV的胶体金免疫层析试纸条。方法:以差速离心方法提纯的RSV病毒粒子作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了高度特异和灵敏的RSV单克隆抗体。采用柠檬酸钠还原氯金酸的方法制备胶体金并标记一个RSV单克隆抗体,另一个RSV单克隆抗体和羊抗鼠抗体分别包被到硝酸纤维素膜的检测线和质控线,将吸水滤纸制成的样品垫、RSV免疫胶体金垫、结合有RSV单抗和羊抗鼠抗体的硝酸纤维素膜和吸水纸依次粘贴到聚氯乙烯(PVC)胶板上研制检测水稻植物和传毒介体灰飞虱中RSV的胶体金免疫层析试纸条。对田间样品进行RSV检测,分析试纸条检测RSV的有效性。结论:利用杂交瘤技术获得了2株RSV单克隆抗体(16E6和11C1),胶体金标记16E6单克隆抗体包被在聚酯膜制成的结合垫上,以11C1单克隆抗体和羊抗鼠抗体分别包被到硝酸纤维素膜的检测线和质控线,制成能在5～10 min内快速、特异、灵敏、准确地检测田间水稻及单头灰飞虱样品中RSV的胶体金免疫层析试纸条。试纸条检测感染RSV的水稻植株和灰飞虱呈阳性反应,而检测健康水稻和感染其它5种常见水稻病毒的植株及其传毒介体呈阴性反应,且试纸条检测RSV感染水稻植物组织的灵敏度达到1:20 480倍稀释(w/v, g/mL),检测携带RSV单头灰飞虱的灵敏度达到1:2560倍稀释(单头灰飞虱/μL)。田间样品检测结果发现,试纸条检测结果与反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的检测结果一致,表明制备的试纸条可有效地用于田间RSV的检测,从而为水稻条纹叶枯病的诊断、监测预警、抗病育种、流行病学研究及科学防治提供技术和物质支撑。     

果树组织培养脱毒技术和病毒检测技术研究进展

病毒病对果树的危害日趋严重,各国对病毒病害的研究和防治极为重视.作者着重论述当前果树生产上主要应用的果树组织培养技术、脱除病毒技术和病毒检测技术,包括其原理、操作过程和特点,并简要探讨了病毒检测与脱毒的关系.     

豫薯品种茎尖组织培养脱毒技术研究

以豫薯4号、豫薯5号、豫薯7号、豫薯12号、豫薯14号为材料,以MS为基本培养基对甘薯茎尖分生组织进行不同激素种类和浓度试验,结果表明,最佳诱导分化培养基为:MS+6-BAl.0mg/L+NAA0.1mg/L+GA30.05mg/L;继代培养与生根培养用·MS+NAA0.2mg/L为好.在28℃、光照14h/d条件下培养效果好.试管苗株系经指示植物、NCM-ELISA法检测,获得了5个品种的脱毒苗.     

重金属镉超富集、富集植物筛选的研究进展

利用超富集植物修复重金属污染土壤是一种可靠经济安全的技术,对我国在植物修复重金属镉污染方面的研究进展进行分析和总结,总结12种超富集植物与17种富集植物的富集特征、适生环境。指出目前研究中存在的问题和今后研究的方向。     

食用型甘薯数量性状遗传参数对单株鲜薯产量选择效果的研究

估算了食用型甘薯7个数量性状的主要遗传参数.结果表明,性状之间遗传力存在较大差异,应据此掌握不同性状的选择标准.单株大中薯率遗传力高,与鲜薯产量遗传相关密切,由该性状参与的指数方程选择效率高,是相关选择的关键性状.对鲜薯产量的直接选择也应给予足够重视.食用型甘薯育种应用选择指数方法进行综合选择,比直接选择鲜薯产量相对效率提高3.19～192.65个百分点,具有较高的应用价值.     

甘薯中清除不同自由基的活性物质提取条件的优化

在单因素试验基础上,利用正交试验,分别对甘薯中清除羟自由基和超氧阴离子自由基的两类活性物质的提取条件进行优化。结果表明,甘薯中清除羟自由基活性物质的最佳提取条件为：以水作为提取溶剂,提取剂用量45 mL/g,提取温度为45℃,提取时间2.5 h;甘薯中清除超氧阴离子自由基活性物质的最佳提取条件为：以无水乙醇作为提取溶剂,提取剂用量35 mL/g,提取温度为45℃,提取时间3.0 h。在以水作为提取溶剂的条件下,各提取因素对活性物质羟自由基清除效果的影响顺序由大到小依次为：提取温度、提取时间、提取剂用量,各因素对羟自由基清除率的影响均极显著（p〈0.01）;在以无水乙醇作为提取溶剂的条件下,各提取因素对活性物质超氧阴离子自由基清除效果的影响顺序由大到小依次为：提取温度、提取剂用量、提取时间,各因素对超氧阴离子自由基清除率的影响均极显著（p〈0.01）。     

马铃薯淀粉生产自动化控制中的物料平衡算法

分析了马铃薯淀粉生产中旋流工段的物料平衡条件,建立了物料平衡方程,结合实际工程应用提出了设计阶段的配管算法,采用计算机辅助计算生成了自动化控制所需的决策函数.     

cDNA cloning and sequence analysis of genome segments S8 from rice black-streaked dwarf virus

Genome segments S8 of two Chinese isolates of rice black-streaked dwarf virus (RBSDV), one from Zhejiang Province and another from Hebei Province, were amplified by RT-PCR and sequenced. Both segments consisted of 1936 nts in full length (EMBL accession numbers were AJ297431 and AJ297432, respectively) and contained only one big open reading frame which encoded a polypeptide with molecular weight of 68kD. The two Chinese isolates shared 94.0% and 96.5% identity at nucleotide and amino acid level, respectively. They shared 94.5-94.9% and 92.5-92.9% homology with S8 of RBSDV Japanese isolate at nucleotide and amino acid level, respectively; shared 85.1-87.6% and 91.7-91.9% homology with S7 of Italian MRDV (maize rough dwarf virus).     

甘薯根茎多糖研究进展

目前，国内外对甘薯活性物质的研究大都是以甘薯块根和甘薯茎蔓为对象，而对于甘薯生产的另外一批资源——甘薯根茎的研究却极为少见．其实，这是一部分生物量较大而又极具潜在价值的生物资源．用水作溶剂，采用破壁效果好的超声波技术提取甘薯根茎中的多糖，具有省时、环保、经济且不破坏功能成分结构等诸多优点，有着良好的发展前景．     

糖类及其衍生物对马铃薯块茎形成的影响

采用可溶性单、双糖模拟高浓度蔗糖,并使用糖的吸收代谢抑制剂对氯汞基苯磺酸、根皮苷、葡萄糖胺和糖类衍生物的添加等方法探讨高浓度糖在马铃薯（Solarium tuberosum L．）块茎形成中的作用．结果表明,高浓度蔗糖诱导块茎发生,不是通过其产生的渗透胁迫因子实现,葡萄糖和蔗糖诱导结薯不是因为膜两端的浓度差引起,可能是跨膜运输或胞内代谢引起．对氯汞基苯磺酸能阻断蔗糖诱导结薯作用,但对葡萄糖诱导作用无显著影响．根皮苷能部分阻断蔗糖诱导结薯作用,可完全阻断葡萄糖诱导结薯作用．蔗糖诱导块茎形成主要通过蔗糖本身来实现．葡萄糖胺对蔗糖和葡萄糖诱导结薯作用无显著影响．2-脱氧葡萄糖、3-氧-甲基葡萄糖、L型葡萄糖不能诱导块茎形成．     

高等植物体内的物质运输

高等植物所需的水分和矿质营养主要由根部供给,叶片光合作用制造的有机物也要输送到各部分,高等植物通过复杂的维管系统来完成这些物质的运输。本文仅就高中生物学中涉及植物体内物质运输的问题进行归纳总结,以期达到对植物“生命体系的整体性”有一个深入的认识。     

马铃薯酪氨酸酶评价美白产品测定体系的建立

从马铃薯中提取酪氨酸酶,以儿茶酚为底物,研究酪氨酸酶的动力学性质,用正交实验建立和优化一种酪氨酸酶活性抑制的测定体系,用此体系测定6种美白产品对酪氨酸酶活性的抑制率。结果表明,酪氨酸酶促反应产物的最大吸收波长为410nm,动力学参数为Km为0.486 mmol/L,Vmax为9.17 U/min,测定美白产品对酪氨酸酶抑制作用的最佳实验条件为:底物为0.3mL,酶为0.3mL,样品为1.5mL。用此体系测定8种美白产品对酪氨酸酶抑制率分别达到32.5%、36.7%、34.5%、31.0%、32.6%、28.6%、38.2%、35.6%。为美白产品功效提供了一种客观评价体系。     

定西地产“黑美人”马铃薯中花青素提取工艺研究

研究了定西地产"黑美人"马铃薯中花青素的提取工艺,比较不同的提取溶剂对花青素提取率的影响.结果表明,用0.5%盐酸乙醇作为提取溶剂,提取"黑美人"马铃薯中花青素的提取率最高,为3.55mg/100g鲜重.     

紫外分光光度法测定土豆中的抗坏血酸含量

在pH=6.0的醋酸-醋酸钠的缓冲体系中,Cu(Ⅱ)可以催化氧化维生素C,在267nm处紫外吸收可用于直接测定土豆中的维生素C含量,Vc含量在0~25ug/ml服从朗伯比尔定律,而且这一方法具有快速、稳定、试剂易得、易保存等特点。文章探讨不同加工方法对土豆中Vc含量及稳定性的影响。     

定西地产“黑美人”马铃薯中花青素提取工艺研究

研究了定西地产"黑美人"马铃薯中花青素的提取工艺,比较不同的提取溶剂对花青素提取率的影响.结果表明,用0.5%盐酸乙醇作为提取溶剂,提取"黑美人"马铃薯中花青素的提取率最高,为3.55mg/100g鲜重.