两种PCR增强剂对A27 Plex试剂盒和EX22 AGCU试剂盒的影响

目的采用直接提取的方法对1例女性全血样本进行PCR扩增,比较BSA(牛血清白蛋白,Albumin from bovine serum)和DMSO(二甲基亚砜,Dimethyl sulfoxide)两种PCR增强剂对A27 Plex试剂盒和EX22 AGCU试剂盒PCR扩增效率的影响。方法在A27 Plex试剂盒和EX22 AGCU试剂盒中加入不同体积的BSA和DMSO后对全血样本进行PCR扩增以及STR分型。结果经数据统计和T检验方法,得出AGCU Ex22试剂盒中加入BSA对全血样本PCR扩增起到抑制作用,而加入DMSO对全血样本PCR扩增起到一定程度促进作用;A27 plex试剂盒中加入BSA对全血样本PCR扩增起到促进作用结论在不改变加入试剂总体系,仅改变加入dd H2O体积的情况下,加入1μL BSA可以有效抑制血红素对PCR扩增左右的影响,加入0.2μL DMSO可有效减弱模板DNA局部二级结构对PCR扩增的抑制作用。     

Fc-23等四种中药提取物对诱发人体白细胞非程序DNA合成的作用

本文报道Fc-23、Rpm-5、Rrr-20和Fp-15等4种中药提取物对DNA损伤剂盐酸氮芥诱发的人体白细胞非程序DNA合成(UDS)的保护作用。结果显示,8.3—83.3mg/ml Fc-23、3.3—16.0 mg/ml Rpm-5,3.3—10.0 mg/ml Rrr-20和16.7—83.3 mg/ml Fp-15均能明显的降低盐酸氮芥诱发的UDS值,表明这4种中药提取物有抗诱发DNA损伤的作用。4种中药提取物的抗DNA损伤成分是耐热性的,中药提取物本身均无诱发UDS作用。本工作提示了应用传统中药成分用于抗诱发遗传毒害有可喜的前景。     

转基因棉花中棉41多重PCR体系的建立

利用多重PCR建立转基因棉花中棉41外源基因的检测体系.多重PCR技术的关键在于多重PCR反应条件的优化,本文从多重引物组合、PCR反应体系、PCR反应条件这三个方面对转基因棉花多重PCR反应进行优化,建立了扩增效率较高的中棉41的六重PCR反应体系,优化后的体系为HotstarTaq DNA聚合酶用量为1.25 U/50 μL,镁离子的终浓度为3.5 mM,dNTP的终浓度为400 μM,BSA(10mg/mL)的加入量为2μL,选取58℃为反应扩增的退火温度.利用优化的多重PCR体系特异性地检测到转基因棉花中棉41中的外源基因启动子CaMV 35S、终止子TNOS、报告基因NPTII和抗虫基因CrylAc.     

三种检验方法在接触性检材中比较及应用

目的:运用Chelex-100法、直接扩增法、磁珠法对日常案件中常见的接触性检材进行检验及比对,以获得最佳的方法。方法:运用三种方法提取接触性检材DNA,并对结果进行比对分析。结果:直接扩增法操作方便、快速,对无抑制物的检材检出率高;磁珠法对污染、有抑制物的检材效果最好;Chelex-100法检验效果不理想。讨论:直接扩增法和磁珠法在接触性检材DNA的检验中有各自的优势,可根据案件中检材的具体情况作出合适的提取方法。     

仙人掌提取物抑菌作用实验研究

目的：观察仙人掌提取物对各种不同细菌的抑菌作用。方法：以药敏试验管碟法检测三种不同浓度仙人掌提取物（250mg/ml；200mg/ml；100mg/ml）对10种细菌的抑菌效果。结果：三种不同浓度仙人掌提取物对金黄色葡萄球菌、宋内志贺菌、鲍氏志贺菌均有明显抑制作用。     

不同种类茶叶茶多酚对细菌生长的抑制作用

目的探讨不同种类茶叶中茶多酚对细菌生长的抑制作用。方法提取茶多酚,配成不同浓度的溶液;纸片法测定茶多酚(浓度为140mg/ml、120mg/ml、100 mg/ml、80 mg/ml、60 mg/ml、40mg/ml)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草杆菌的抑菌作用;比较抑菌效果。结果三种茶叶的茶多酚对供试细菌均有抑制作用,但不同茶叶的茶多酚对细菌的抑制作用不同,不同种类茶叶茶多酚对同一菌种的抑制作用亦不同。结论不同种类茶叶的茶多酚对细菌生长均有一定的作用。     

高效液相色谱法测定设备淋洗液中头孢噻肟残留含量

目的：测定设备最终淋洗液中头孢噻肟残留含量。方法：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以0.05mol/L磷酸盐缓冲液（取7.1g无水磷酸氢二钠至1000ml量瓶中,,加水溶解并稀释至刻度,用磷酸调解pH值至6.25）为流动相A,以甲醇为流动相B,流动相A：流动相B（85：15）,检测波长235nm,流速1.0ml/min,柱温40℃,进样量10μL,结果：头孢噻肟0.005658mg/ml-0.01320mg/ml范围有良好的线性关系（r为0.9995）,检测限为5.568＊10-5 mg/ml,平均回收率为98.5%;RSD为0.65%。结论：该方法简便,重现性好,专属性强,为检测设备最终淋洗液中头孢噻肟残留含量提供了可靠的方法。     

头孢尼西钠细菌内毒素检查法研究

目的:建立头孢尼西钠细菌内毒素检查法.方法:按<中国药典>2005年版二部附录Ⅺ E进行试验和结果判断.结果:用两个不同生产厂家,不同标示灵敏度鲎试剂进行研究,头孢尼西钠的最大不干扰浓度为3.2mg/ml,并对3批样品进行检查,均无干扰作用,其细菌内毒素均小于0.15EU/mg.结论:本品细菌内毒素检查法(凝胶法)控制细菌内毒素的量合理可靠.     

PCR技术快速鉴别牛、羊、猪皮革的初步探讨

提取牛、羊、猪3种动物皮革组织中的DNA,设计了3对特异性引物,PCR扩增,初步建立了这4种动物皮革成分的鉴定方法。DNA的提取的质量及其后的PCR鉴定依赖于皮革的加工程度,如何从皮革成品中提取有效的核酸信息需进一步研究。     

曲马多替代芬太尼用于剖宫产术后PCEA的临床研究

目的—将曲马多用于剖宫产术后的硬膜外自控镇痛(patientcontrolledepiduralanalgesia,PCEA),观察曲马多的镇痛效果及对产妇的产后恢复的影响。论证曲马多替代芬太尼用于剖宫产术后PCEA的可行性。方法—选择90例ASAI—Ⅱ级足月产妇,在硬膜外麻醉下施行剖宫产手术。术毕随机分为三组:非PCEA组(Ⅰ组),用芬太尼的PCEA(Ⅱ组),用曲马多的PCEA组(Ⅲ组)。Ⅰ组术毕拔除硬膜外导管回病房用传统的肌注哌替啶镇痛;Ⅱ组:0.15%罗比卡因 芬太尼2ug/ml 氟哌利多0.05mg/ml;Ⅲ组:0.15%罗比卡因 曲马多2mg/ml 氟哌利多0.05mg/ml。两组设置都为负荷量5ml,持续量为2ml/h,PCA为1ml/次,锁定时间为15分钟。记录术后24h、48h两时间点疼痛视觉模拟评分(VAS,0—10分),子宫高度,泌乳量。记录满意视觉模拟评分(VCS,0分为不满意,10分为最满意),初乳时间,肠蠕动恢复时间,PCA次数及病人主观不适。结果Ⅱ、Ⅲ组与Ⅰ组镇痛效果有显著性差异(P<0.05),Ⅱ组与Ⅲ组镇痛效果无差异(P>0.05);Ⅱ、Ⅲ组与Ⅰ组在满意视觉模拟评分、初乳时间、24h泌乳量、肠蠕动恢复时间等四项的比较,Ⅱ、Ⅲ组明显优于Ⅰ组,均有显著性差异(P<0.05)。Ⅱ组的嗜睡发生率为4例(13.3%),Ⅲ组且未发现,两者有显著性差异(P<0.05)。而48h泌乳量,三组无明显性差异(P>0.05);Ⅱ、     

注射用硫酸头孢匹罗含量测定方法研究

采用高效液相色谱法分析测定注射用硫酸头孢匹罗的含量。该方法在0.03mg/ml～0.07mg/ml范围内头孢匹罗面积与浓度呈良好的线性关系。回收率为99.7%,RSD=0.20%。结果表明该方法简便,快速,结果准确,适用于该产品的质量控制。     

胶原酶浓度及消化时间对屠宰猪胰岛分离纯化的影响

本试验为确定分离猪胰岛的最佳胶原酶浓度,以屠宰猪胰腺为试验材料进行猪胰岛分离纯化研究。结果表明,猪胰岛获取量与不同浓度胶原酶1.0 mg/ml、1.5 mg/ml、2.0 mg/ml各组间均差异显著(P0.05);在相同的消化时间(15 min)条件下,猪胰岛分离1758±125个/g,纯化后1485±119个/g,纯度为84%存活率为92%。由此可知,屠宰猪胰岛分离的最佳胶原酶浓度为1.5mg/ml,而最佳消耗时间为15 min。     

建立测定注射用头孢孟多酯钠聚合物的方法

目的:建立注射用头孢孟多酯钠聚合物的测定方法。方法:采用葡聚糖凝胶Sephadex G-10不锈钢柱(10mm×300mm),流动相A:磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钠17.10g,与磷酸二氢钠0.39g,加水使溶解成1000ml);流动相B:水;流速为0.8ml/min;检测波长为254nm;进样量为200μL;柱温为室温;对照品采用头孢孟多酯钠。结果:注射用头孢孟多酯钠在11.10~40.83mg/mL,(r=0.9999)浓度范围内与聚合物的峰面积呈良好线性关系。结论:方法简便,结果可靠,可以用于注射用头孢孟多酯钠中高分子聚合物杂质的检测。     

大孔吸附树脂吸附槐耳多糖的工艺优化研究

目的:选择DM301大孔吸附树脂对槐耳提取液中的多糖进行富集纯化,优化影响树脂吸附多糖的多个因素,提高树脂的吸附量。方法:运用正交实验对影响多糖吸附的条件进行优化。结果:得到了最佳的吸附工艺参数,即:在浓度为0.5mg/m L,PH5.0,吸附温度40℃,吸附流速1BV/h下,多糖吸附量达到了10.9mg/g。结论:提高了树脂的吸附量,树脂可重复使用,有很好的应用前景。     

大孔吸附树脂吸附熊果酸的工艺优化研究

目的:选择DM130大孔吸附树脂对锁阳提取液中的熊果酸进行富集纯化,优化影响树脂吸附熊果酸的多个因素,提高树脂的吸附量。方法:运用正交实验对影响熊果酸吸附的条件进行优化。结果:得到了最佳的吸附工艺参数,即:在浓度为1.6mg/mL,PH 5.5,吸附温度40℃,吸附流速3BV/h下,熊果酸吸附量达到了48.1mg/g。结论:提高了树脂的吸附量,树脂可重复使用,有很好的应用前景。     

氨苄西林钠氯唑西林钠含量测定方法研究

采用高效液相色谱法测定氨苄西林氯唑西林钠的含量。该方法在0.06mg/ml～0.6mg/ml范围内两主峰的峰面积与浓度呈良好的线性关系 分离度大于1.5 其回收率分别为99.3%、99.5% 取不同的供试品进行试验,结果表明该方法重现性好,操作简洁,快速,可同时检测双组分的含量,适合于该产品质量控制。     

一种通用的基因组DNA提取方法

高质量的基因组DNA是进行分子生物学实验的前提。为此,本研究通过从动植物组织和细胞中分别提取DNA,探索了一种通用的基因组DNA的提取方法。本方法所提取到的DNA纯度高、适合后续PCR扩增。     

注射用氢化可的松琥珀酸钠细菌内毒素检查方法学验证

目的对注射用氢化可的松琥珀酸钠细菌内毒素的检查方法进行验证。方法采用《中国药典》2010年版二部附录ⅪE的凝胶法。结果注射用氢化可的松琥珀酸钠在稀释至浓度为0.83mg/ml时对试验无干扰。结论注射用氢化可的松琥珀酸钠在稀释至浓度为0.83mg/ml时,采用凝胶法可行,可用于此品种的细菌内毒素检查。     

匙羹藤总皂苷抗氧化活性研究

目的:研究匙羹藤总皂苷对大鼠肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、和脂质过氧化物(LPO)作用的影响。方法:通过硫代巴比妥酸(TBA)分光光度法测定大鼠肝脏脂质过氧化(LPO)的二级分解产物丙二醛(MDA)的含量,以考察匙羹藤总皂苷对实验大鼠肝脏LPO的作用影响,采用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力,钼酸铵显色法测定CAT的活力,考察匙羹藤总皂苷对实验大鼠肝脏SOD和CAT的作用大小。结果:与对照组比较匙羹藤总皂苷在1.0mg/ml~6.0mg/ml浓度范围可抑制大鼠肝脏LPO作用;在1.0mg/ml~6.5mg/ml浓度范围内可提高大鼠肝脏SOD和CAT的活性。结论:匙羹藤总皂苷可以提高大鼠肝脏SOD和CAT的活性,降低MDA的产生。     

循环水阻垢剂配方优化试验研究

通过旋转挂片腐蚀试验、静态试验、动态模拟实验等方法得出原配方满足缓蚀要求的最小加药量为8mg/l,原配方的加药量为10mg/l,循环水浓缩倍率为3.3;通过静态试验对优化配方进行筛选,再通过动态模拟试验得出优化配方为原配方加药量为8mg/l的基础上再添加1mg/l PBTCA,循环水的浓缩倍率为3.4较原配方提高了0.1,加药量却降低了1mg/l,起到了节水降耗的效果,同时加药量的减少也为企业节约了成本。