PCR技术研究进展

PCR技术是近年发展起来的一种体外特异性扩增DNA片段的新技术,在分子生物学检测与研究中得到广泛应用.本文扼要介绍了PCR技术的基本原理,对PCR技术的方法及特点作了详细阐述,特别是PCR技术在分子生物学的理论研究,遗传病的产前诊断、突变基因的检测、法医学鉴定以及病毒和癌症检测等应用研究的新进展作了综述.预测PCR技术在分子生物学的各个领域的应用具有广阔的前景.     

FQ-PCR技术在小儿患者巨细胞病毒感染检测中的应用

目的:探讨荧光定量检测在小儿患者巨细胞病毒(HCMV)感染中的诊断价值.方法:对102例小儿患者,取尿液用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测.结果:102例标本中28例阳性,阳性率为27.5%.结论:荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏、特异等优点,在HCMV感染的早期诊断、治疗方案选择以及疗效观察方面具有广泛的应用前景.     

聚合酶链式反应技术及应用简介

聚合酶链式反应（PCR）又称为无细胞分子克隆系统,或特异性DNA序列体外走向酶促扩增法。该技术是由美国GetuS公司和加尼福利亚大学子1985年联合创建的。1988年,随着耐热聚合酶的商品化,PCR技术的应用得到了突飞猛进的发展,并因此在1989年被世界著名的《Science》杂志列为世界重大科学发明。PCR是90年代分子生物学领域的一项革命性突破,由于该技术敏感性高,特异性强,使用方便快捷,对原始材料质量要求低,现已在遗传性疾病、传染病及肿瘤诊断研究等领域得到广泛运用。1993年,PCR的发明人MSlliS因发明了PCR技术而获得诺贝尔…     

柑橘黄龙病诊断方法的研究进展

对于柑橘黄龙病的诊断方法主要有田间诊断和实验室诊断两种方法,而实验室诊断是最可靠的确诊技术,包括显微镜观察病原、DNA-DNA杂交、PCR技术等.本文针对国内外柑橘黄龙病诊断的主要方法和技术手段进行了系统阐述和比较分析,旨在为柑橘黄龙病诊断提供理论参考和技术支撑.     

PCR技术在家畜胚胎性别鉴定中的应用

聚合酶链反应(Polymerose chain reaction,PCR)是近年来发展起来的一项分子生物学新技术。由于该方法能在细胞外迅速将特异的DNA片段放大百万倍左右,而且具有敏感、特异、快速和操作简单等优点,自1985年首次应用以来,已广泛地应用于遗传性疾病的产前诊断、传染病的快速诊断,分子肿瘤学、分子克隆、法医学、考古学,器官移殖配型、性别鉴定等研究领域,本文主要对PCR在家畜胚胎性别鉴定中的应用现状作一简要概述。     

关于“利用PCR技术扩增目的基因”的教学建议

正PCR技术是生物学研究上一项非常重要的技术,它是体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,只需在eppendorf离心管中建立反应,经数小时后,就能将极其微量的目的基因或某一特定DNA片段扩增数十万倍,甚至千百万倍.这项技术不仅可以用于获取和扩增目的基因,而且在癌症治疗的监控、临床医疗诊断以及法医学等众多领域都有着重要的用途,如此一项有重要作用的技术,笔者认为高中生必要理解和掌握这项技术.但是实际情况是学生对于PCR技术的掌握情况并不是很理想,对PCR技术原理和过程的掌握不够到位.究其原因,一方面由于PCR扩增DNA技术所需设备昂贵,一般中学很少具备动手操作的条件,另一方面PCR技术在高中教材中仅有少     

PCR结核菌检测中引物的选择

自1985年Mullis等首创聚合酶链反应(plolymerase chain reaction,PCR)技术以来,作为体外扩增DNA的新手段因具有快速、简便、灵敏和特异性高等优点,已迅速在分子生物学、遗传学、临床医学诊断、法医学和考古学等领域得到广泛应用。特别对结核病细菌学诊断的研究和应用更为广泛。     

聚合酶链反应检测儿童急性呼吸道流感嗜血杆菌感染的研究

目的 :建立儿童急性呼吸道感染的PCR检测方法 ,并与常规方法进行比较。方法 :选择编码外膜蛋白P6基因作为靶片段设计引物 ,分别用PCR方法及常规培养法检测 78例急性呼吸道感染儿童。结果 :建立的PCR检测法可以检测 10～ 5 0个流感嗜血杆菌 ;78例急性呼吸道感染儿童中PCR方法检出 4 2株 (5 3.8% ) ,常规培养方法检出 33株 (4 2 .3% ) ,培养法检测阳性者PCR方法均为阳性。PCR方法较培养法有显著性差异。结论 :PCR方法检测呼吸道流感嗜血杆菌感染比常规方法更快速 ,更简便 ,更敏感。PCR方法检测流感嗜血杆菌有可能成为临床流感嗜血杆菌感染诊断的一种实用、理想的方法。     

在食品检验中应用PCR技术

PCR技术(Polymerase Chain Reaction)自问世一来,已在医学工程、疾病诊断、遗传工程、考古学及法医学等领域得到了广泛应用.1989年被称为“分子年”,PCR技术被列为十项重大科学发明之首,这种PCR技术也称为体外基因复制过程.在引物指导下,在体外通过DNA聚合酶将目的基因快速而可靠地进行多次反复合成的技术.由于此方法具有灵敏特异、产量高、快速、操作简便和容易自动化等突出优点.因此也被应用于食品检验.     

实时荧光定量PCR应用技术

实时荧光定量PCR(real- time quantitative PCR)由Higuchi等人在1992年第一次报告,是一种新兴的分子生物学技术,这项技术灵敏、简便、快速、不需使用放射性同位素.它将EB加入PCR反应体系,再通过改装的带有CCD的PCR仪检测样品的荧光强度,这不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法,同时也可以对核酸分子进行精确定量.而且随着PCR技术的不断发展,使得实时荧光定量PCR日益成熟,极大的推动了分子生物学的发展,更是在疾病诊断中发挥了很重要的作用.     

与PCR技术有关的常见问题答疑

PCR(polymerase chain reaction多聚酶链式反应)是一种在生物体外迅速扩增特定DNA片段的核酸合成技术,这项技术是由穆里斯(K.Mullis)等人于1988年发明的,为此,穆里斯于1993年获得诺贝尔化学奖。本文针对一些学生有关PCR技术的常见问题予以解答。1PCR所需原料是普通的四种脱氧核苷酸吗?PCR反应体系为何不加ATP加入PCR反应体系的并非普通的四种脱氧核苷酸,而是四种脱氧核苷三磷酸(统称dNTP),即:dATP、     

PCR技术研究进展

PCR技术是近年发展起来的一种体外特异性扩增DNA片段的新技术，在分子生物学检测与研究中得到广泛应用。本文扼要介绍了PCR技术的基本原理，对PCR技术的方法及特点作了详细阐述，特别是PCR技术在分子生物学的理论研究，遗传病的产前诊断，突变基因的检测，法医学鉴定以及病毒和癌症检测等应用研究的新进展作了综述。预测PCR技术在分子生物学的各个领域的应用具有广阔的前景。     

例析PCR引物的设计原则问题

<正>PCR技术是一项能在生物体外根据DNA半保留复制的原理,对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术,能在短短的几个小时内,实现DNA分子百万份拷贝的复制.该技术常用于遗传病的诊断、古生物学物种亲缘关系的鉴定、DNA序列鉴定、刑事案件犯罪嫌疑人DNA比对分析、定点诱变基因、cDNA文库的构建等多个方面.近年来,随着基因工程技术的更新发展,高考试题中对于PCR引物的考查成为了一个亮点,     

冠心病580例介入诊治结果分析

介入心脏病学是通过精辟导管技术进行心脏病诊断和治疗的学科,为过去25年里临床医学领域中发展最快的学科之一.其最突出的特点是大量新概念,新技术,新器械不断涌现,并迅速,广泛和成功的应用于临床,成为与药物治疗,外科手术并驾齐驱的治疗手段.冠心病的治疗已成为临床医学最为重要的课题之一.冠状动脉造影术是诊断冠心病的金标准,是冠心病的进一步治疗基础.     

浅议乙型病毒性肝炎临床检验技术

乙型肝炎是我国法定传染病的第24位病。在我国感染率为6.0％～8.8％。从1963年BIumberg发现澳大利亚抗原到现在用分子生物技术诊断乙型肝炎,乙肝的实验诊断技术有着迅猛的发展。 一、各种检验技术的比较 目前,各大医院以及诊所采用的乙肝诊断实验基本上是反向间接血凝法(PHA),酶联免疫吸附试验(ELISA),分子生物技术——聚合酶链反应(PCR)。PHA方法简单、快速、成本低,     

快速诊断小鹅瘟PCR方法的优化建立

为建立快速诊断小鹅瘟的PCR方法,根据已发表的GPV主要结构蛋白VP3基因序列,经多序列比对和Oligo6．0软件分析设计特异性PCR引物。以微量法提取病鹅肝组织DNA,优化PCR反应引物退火温度、循环次数和鉴定其特异性,并与酚氯仿法和煮沸法进行同步对比研究。结果显示,建立的PCR检测方法能够特异性检测病鹅肝组织中GPV的核酸,其扩增片段大小为343bp,最佳退火温度为58℃,最佳循环次数为35次。微量法提取的病毒核酸PCR检测灵敏度分别是酚氯仿法的50倍和煮沸法的2500倍。该PCR检测方法不与鹅副黏病毒、禽流感病毒、传染性支气管炎病毒、鸭瘟病毒以及健康鹅肝组织发生交叉反应。本研究建立的GPVPCR检测方法能够快速诊断小鹅瘟。     

十年之痒,我是这样走过来的

十年了,想想自己还真不容易,居然大学一毕业就窝在同一所学校里呆了这么多年.十个年头哪!比抗日战争还多两年.十年里你教书育人相夫教子两不误,十年里你当了九年半的班主任,十年里你送走了数以千计的毕业生.     

乳液PCR扩增复杂基因序列的方法建立及普通PCR的比较

该研究分析普通PCR的不足,通过较多实验研究初步建立乳液PCR方法,改善PCR实验技术.采用人工合成的乳酸杆菌质粒为模板,不同成分配比条件下的乳液PCR和普通PCR对质粒序列进行扩增,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,电泳结束后对凝胶进行Gelred染色并用GS-800灰度扫描仪成像.进一步分析乳液PCR和普通PCR扩增产物的特异性以及不同成分配比条件下乳液PCR的扩增质量.通过比较两种PCR方法的扩增结果可得,在相同条件下,乳液PCR扩增特异性高于普通PCR扩增,并确定当水相中加入100 g/L BSA,水油体积比在1∶2.5时,破乳水饱和乙醚体积比为1∶1时,水油相在1700 rpm条件下连续混合5 min时扩增效果最好.     

主成分回归、偏最小二乘回归与神经网络耦合的中长期电力负荷预测

为提高负荷预测精度,将主成分回归（PCR）、偏最小二来回归（PLSR）与反向传播神经网络（BPNN）相结合,分别建立基于PCR和PLSR及与神经网络耦合的年用电量预测模型.结果表明,以PCR和PLSR方法提取成分作为神经网络的输入,以实际用电量作为输出,建立的PC-BPNN和LV-BPNN非线性预测模型拟合优度优于PCR和PLSR线性预测模型.从检验四个预测模型的预测效果看,线性预测模型的预测值均高于实际值,非线性预测模型的预测值均低于实际值.     

凯普生物:国内领先的核酸分子诊断产品提供商

4月12日,广东凯普生物科技股份有限公司(以下简称“凯普生物”)在深交所创业板上市.首次发行股数量2250万股,每股发行价格为18.39元,发行市盈率为22.99倍,股票代码“300639”. 凯普生物是国内领先的核酸分子诊断产品提供商,专注于分子诊断试剂、分子诊断配套仪器等体外诊断相关产品的研发、生产和销售,并提供相关服务. 经过十余年的发展,公司基于拥有自主知识产权的导流杂交技术平台和应用国际通用的荧光PCR检测技术平台,研发了覆盖传染病检测和遗传病检测两大领域的系列产品,广泛应用于临床检测、大规模人口筛查和优生优育管理领域,“凯普”也因此受到客户和业界的广泛认可.