碱性纤维素酶产生菌的筛选及其产酶条件

从土壤样品中筛选到一株产碱性纤维素酶的菌株ＳＹＨ－１,产酶的最适碳源为麸皮,最适氮源为豆饼粉,摇瓶发酵最高酶活２５ｕ／ｍＬ,酶反应的最适温度为５０℃,ｐＨ为９．６,主要作用底物为ＣＭＣ,对滤纸,纤维素粉和结晶纤维素几乎作用。     

低能N+离子注入谷氨酸产生菌诱变选育及其发酵的研究

采用低能N 离子注入技术,以D1 1 0 和D1 1 0B为出发菌进行了诱变选育高产谷氨酸菌株和发酵的试验研究。通过研究已经初筛到两株高产菌株D52 2 1 和B32 63,其多批次摇瓶平均产酸分别达到 8.4%、7.5 %,比出发菌分别提高 3 5.48%和 2 5 %.其一级种子生长曲线比原出发菌有明显变化,高产菌株发酵对数期平均提前 2～ 3h.从发酵曲线显示出高产菌株的代谢活力增强,倍增时间缩短,对缩短发酵周期有积极的促进作用     

β-葡聚糖酶高产菌株的诱变育种和酶学特性的研究

对黑曲霉A10进行物理和化学因素诱变处理,获得一株高产菌株W315,比原种产β-葡聚糖酶水平提高了4.2倍,并对该菌株作了产酶条件和酶学特性研究。     

羽毛的生物降解及其酶学性质的研究

羽毛角蛋白是一种环境污染有机废弃物,通过微生物对角蛋的进行降解为合理利用,可以使它成为丰富的饲料蛋白来源。适当的降解方法对于羽毛资源的转化有着重要作用。采用正交设计优化地衣芽孢杆菌细胞转化羽毛的条件,得出角蛋白酶的合成和羽毛的分解指标,三因子最合适配比为:液料比20:1,反应pH 7.5,BC细胞加量0.5克,40℃下120 r/min处理72 h,其中细胞加量对羽毛分解有关键影响。粗酶液最适温度在37℃,在35℃~40℃有很好的热稳定性。不同pH下酶活变化明显,在pH 5-8范围内比较稳定。     

Bacillus sp.ZJU318脂肪酶发酵条件的优化及其酶学性质的研究

利用均匀设计法对Bacillus sp．ZJU318产酶的最佳培养基进行了快速优化研究。结果表明,其最适产酶培养基为：3．28％黄豆粉,0．023％蔗糖,0．075％K2HPO4,配制时的pH为12（灭菌后pH为8～9）;此外,其发酵的最佳条件为：发酵温度28℃,接种量20％,摇瓶装量20mL（250mL三角瓶）。在最适的发酵条件下,脂肪酶的发酵水平可达24．7U／mL。Bacillus sp．ZJU318脂肪酶作用的最适温度为45℃,40℃保温1h,活力几乎没有损失;但是,在50℃和60℃的条件下保温1h后,酶活降低得比较明显;酶作用的最适pH为9．0。在pH7～10,该脂肪酶较稳定,但是在酸性的环境中,酶的稳定性较低。     

大黄鱼线粒体DNA的限制性内切酶图谱

从大黄鱼(Pseudosciaena crocen)肝脏中提取线粒体DNA(mtDNA)。用限制性核酸内切酶酶切后,得到酶切图谱。以1 kb ladder作为相对分子量标准,以电泳迁移率为纵坐标,分子量的对数值为横坐标作标准图,利用电泳迁移率与分子量的对数值的线性关系,计算出各酶切片段的分子量,并推算出大黄鱼mtDNA分子量为27．33×10~6 D,大小为16．891 kb左右。根据单酶切和双酶切的数据,以及mtDNA是环状分子等特征,建立了大黄鱼的mtDNA酶切图谱。     

发酵玉米芯酶水解液生产木糖醇的研究

假丝酵母(Candida sp.)菌株经驯化后显著地提高了对水解液中发酵抑制物质的耐受力,从而增加了木糖利用率和木糖醇得率。玉米芯经酶水解得到水解液,在30℃下采用假丝酵母菌株直接发酵生产木糖醇。对发酵条件进行了优化,优化结果为:接种量5%(体积比),种子龄20 h,氮源组成:2.5 g/L的酵母浸膏,2.5 g/L的胰蛋白胨,250 mL三角瓶装液100 mL,初始pH值6。在此条件下,木糖醇得率达65%。该方法大大降低了预处理的成本,显示了良好的应用前景。     

大豆蛋白酶解工艺条件的研究

采用 As 3.350酸性蛋白酶对豆饼粉进行水解工艺条件的研究 .实验结果表明 ,原料预处理最佳工艺条件为 :5% HCl,豆饼粉加水比为 1∶ 4,90℃处理 3.5 h;酶解最佳条件为 :每克原料的酶浓度为 60 0 0 u,p H为 3.0 ,温度为 45℃ ,时间为 9h.预处理前过 70目筛 ,加入 2× 1 0 -3mol/ L的Ca Cl2 ,并加以搅拌 ,可使氨基酸态氮生成率达到 70 % ,氨基酸态氮含量达到 0 .9g/ l0 0 m L左右     

多环芳烃荧蒽降解菌的筛选鉴定及降解特性研究

采用选择性富集培养方法,从东北老工业区的石油污染土壤中分离到能以高浓度荧蒽为唯一碳源和能源,并且生长良好的优势菌JU1。通过16s rDNA核苷酸序列分析以及生理生化鉴定此菌株为克雷伯氏菌属(Klebsiella sp.)。土样混合菌和优势菌株JU1都有较强的降解荧蒽的能力,使用高效液相分析方法测定荧蒽的含量,经过6 d混合菌株的荧蒽降解率为94.12%,优势菌株JU1能够达到降解率为92.71%。不同荧蒽浓度条件下,菌株JU1对荧蒽的降解率会受到较大的影响,在50 mg.L-1具有最好的降解效能。降解菌JU1还能对其他多环芳烃起到降解作用,对菲的降解率为40.76%,对苯并[a]芘降解率为62.38%。菌株JU1对荧蒽和菲混合多环芳烃的降解率第5 d后,分别为荧蒽59.74%和菲55.36%。     

一株产纤维素酶的诺卡氏属菌株筛选及产酶条件研究

通过对秸秆和牛粪干的增殖培养,从中分离、纯化获得42株菌株。经滤纸条崩解实验、溶菌圈大小测定及CMCase(羧甲基纤维素酶活)测定,筛选得到1株代号为GNA120对纤维素降解具有优势的放线菌,初步鉴定为诺卡氏菌属(Nocardia spp.)。实验确定该菌株的最佳产酶条件为:温度28℃;pH值5.6;硫酸铵作氮源时产酶能力最强。     

二酶系统竞争性抑制的非稳态动力学

以非稳态酶动力学的布尔函数图形方法，研究了一类二酶系统竞争性 制的非稳态动力学，推导出此类反应的非稳态酶动力学方程，并对其进行了讨论，分析了这类二酶系统竞争性抑制的非稳态动力学过程。     

理性和非理性蛋白质设计策略在酶工程中应用

理性和非理性的蛋白质设计策略是两个非常有效的酶改性工具。在对酶性质改造方面已取得了可喜的成绩。本文将两种蛋白质设计策略的特点、各自使用的方法、进化路线及最近三年在酶工程改造上取得的成就加以总结。并讨论了两种蛋白质设计策略的区别、联系及蛋白质工程改造的未来发展方向。     

嗜热酶的稳定机制和稳定策略的研究进展

来源于嗜热菌的嗜热酶具有热稳定性和嗜热性。嗜热酶与对应的中温酶序列具有高度的序列同源性、高度相似的三级结构和催化机制。在简单总结了嗜热酶的生化和分子特性后,本文重点讨论了嗜热酶稳定的分子机制和提高蛋白质稳定性的策略。嗜热酶稳定的分子机制包括:氨基酸组成特性、蛋白质分子内的作用力、蛋白质构型的影响、锚定N末端和C末端、环的缩短和固定、翻译后修饰。提高蛋白质热稳定性的策略包括:蛋白质工程策略(序列一致概念、理性设计、定向进化、多肽链延伸和计算模型)、化学修饰法、添加保护剂提高酶的稳定性。