粘质沙雷氏菌YW-3-10灵菌红素发酵条件优化

近年来灵菌红素由于其广泛的抗菌效果、免疫抑制活性及抗肿瘤活性得到广泛关注,实验室经过筛选和ARTP诱变得到一株灵菌红素产量较高的粘质沙雷氏菌菌株YW-3-10,在对YW-3-10发酵条件进行单因素实验的基础上在进行Box-Behnken中心组合试验和响应面分析,确定其摇瓶发酵产灵菌红素的最佳条件如下：甘油32 ml/L,胰蛋白胨17 g/L,甘氨酸1.5 g/L,NaCl 5 g/L,发酵温度28℃,转速200 rpm,装液量30 mL/250 mL,接种量4%,灵菌红素产量达3.285±0.0257 g/L,较初始条件灵菌红素产量有显著提升.     

葱内生真菌抑菌活性初探

目的：从葱的根、茎、叶中分离内生真菌,并进行初步抗菌活性检测,得到具有高抗菌活性的菌株。方法：1．用PDA培养基分离葱的内生真菌;2．用查氏培养基进行发酵实验。3．进行滤纸片抑菌实验。结果：从葱中分离出的17株内生真菌,均具有抗菌活性,其中,抑菌圈直径大于1．0cm的高抗菌性菌株有11株,占总分离菌株数的64．71％。结论：葱内生真菌具有类似宿主植物葱一样的广泛抗菌性（分离得到的17株内生真菌均具有抗菌性）,但由于宿主植物本身所具有的强抗菌性,使分离得到的菌株种属多样性较少。     

一株多粘类芽孢杆菌的鉴定及其对花椒根腐病菌Fusarium solani的抑菌作用

腐皮镰刀菌(Fusarium solani)是引起花椒根腐病的主要病原菌之一,为开发高效防治花椒根腐病的绿色生防菌,实验从健康花椒根部土壤中分离筛选出一株腐皮镰刀菌较高拮抗作用的细菌KS-16,并对其进行形态学、生理生化性质和分子鉴定,研究了该菌对三株供试菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌及腐皮镰刀菌的抑菌作用.结果表明,菌株KS-16被鉴定为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa).活性测定发现,该菌对腐皮镰刀菌的菌丝生长抑制率达到53.78%,对三株供试菌株也有较高的抑菌活性.以PDA培养基作为发酵培养基优于LB培养基,作用10 d其抑制效果仍保持在43.33%.     

葱内生真菌抑菌活性初探

目的:从葱的根、茎、叶中分离内生真菌,并进行初步抗菌活性检测,得到具有高抗菌活性的菌株。方法:1.用PDA培养基分离葱的内生真菌;2.用查氏培养基进行发酵实验。3.进行滤纸片抑菌实验。结果:从葱中分离出的17株内生真菌,均具有抗菌活性,其中,抑菌圈直径大于1.0cm的高抗菌性菌株有11株,占总分离菌株数的64.71%。结论:葱内生真菌具有类似宿主植物葱一样的广泛抗菌性(分离得到的17株内生真菌均具有抗菌性),但由于宿主植物本身所具有的强抗菌性,使分离得到的菌株种属多样性较少。     

亚硫酸盐还原酶发酵工艺条件初探

本文对硫酸盐还原菌产亚硫酸盐还原酶的发酵工艺条件进行了初步研究,主要内容包括硫酸盐还原菌发酵条件：碳源、氮源、温度、起始pH、装液量及发酵周期等.实验研究表明,以尿素作为氮源,以可溶性淀粉为碳源,C：N比为1：3,在初始pH7.0的条件下,接种量为5%,装液量为1：3（v/v）,35℃摇床培养42h,酶活力可达到16.2U/mL.     

自毒物质对龙牙百合枯萎病菌与其拮抗菌互作的影响

以龙牙百合主要自毒物质-2,4-二叔丁基苯酚(2,4-DTBP)和抗氧化剂2246(AO 2246)为供试介质,使用含不同浓度自毒物质培养基,采用平板对峙法,探究龙牙百合枯萎病病原菌-尖孢镰刀菌LD12和茄腐镰刀菌LD21与拮抗细菌-贝莱斯芽孢杆菌株TP54和TP58的互作关系。结果表明,高浓度自毒物质2,4-DTBP介导下,拮抗菌TP54对病原菌LD12抑菌率显著降低,LD12产孢量增加;对拮抗菌TP58对病原菌LD12抑菌率影响表现为低浓度促进,高浓度抑制;拮抗菌TP54对病原菌LD21抑菌率影响不显著,但促进了LD21产孢;高浓度2,4-DTBP显著降低拮抗菌TP58对病原菌LD21抑菌率。高浓度自毒物质AO 2246介导下,拮抗菌TP54对病原菌LD12抑菌率显著降低,产孢量增加;拮抗菌TP58对病原菌LD12抑菌率影响不显著,但促进了LD12产孢;拮抗菌TP54和TP58对病原菌LD21抑菌率显著降低,但前者LD21产孢量减少,后者产孢量无明显变化规律。在龙牙百合自毒物质的介导下,拮抗菌对枯萎病病原菌的抑菌率有可能降低也可能增加,变化因不同自毒物质浓度、拮抗菌和病原菌而异,相...     

海洋来源真菌的抗肿瘤抗真菌活性筛选

目的：将深海来源的16株真菌经发酵培养与活性筛选,获取活性菌株以供筛选药源活性产物。分别经真菌普通培养基和人工海水培养基发酵获得样品,采用MTT法测试抗肿瘤活性,纸片法测试抗真菌活性。结果：菌株中有3株经过普通发酵培养基发酵和4株经过海水培养基发酵的样品在100μg/mL浓度下对K562细胞的抑制率大于60%;抗真菌活性测试中,仅有菌株16-02-1的发酵样品对受试白色念珠菌ATCC 10231和土曲霉W-1均呈现一定的抑制活性。结论：深海来源真菌在不同培养基中发酵获得的样品,抗肿瘤活性各不相同,经过筛选获得高活性菌株为寻找药源活性产物提供了菌株。     

产几丁质酶Bt-016菌株发酵条件优化探究

采用单因素及均匀设计法对产几丁质酶Bt-016菌株的发酵培养基和发酵条件进行优化。单因素试验结果确定了几丁质、氮源、碳源、pH和接种量为影响发酵条件的显著影响因子,采用U9(95)水平对5个影响因子进行最佳发酵条件和培养基优化,结果表明:蔗糖2g/L、蛋白胨20g/L、初始pH值为8、接种量1. 572%、几丁质含量2. 5%为最适发酵培养条件,在此条件下,Bt-016发酵液OD600值为3. 864 5,较优化前提高了21%;产几丁质酶活力为2. 796 1 U/m L,较优化前提高了33%。研究结果为杀虫防病Bt菌株的开发提供了菌源依据。     

生物乳化剂产生菌的分离和特性分析

从石油污染土壤中分离到4株对柴油、正己烷等烃类具有乳化作用的细菌。对4株菌的耐盐碱情况进行了研究,结果表明这4株菌株均能耐受较高的盐碱环境并产生生物乳化剂,其中菌株FB-8的乳化活性最高。将菌株FB-8进行发酵培养,采用盐沉法从发酵液中提取到生物乳化剂粗品,得率为1.62g/L,该物质能够在高盐碱条件下乳化柴油。分离到的4株菌可用于石油污染盐碱土壤的生物修复。     

纤维素酶产生菌CMC-Z的筛选及产酶条件的优化

用刚果红染色羧甲基纤维素钠平板筛选方法,从土壤中筛选到一株具有高效产纤维素酶的菌株CMC-Z,经菌落形态观察及镜检,初步鉴定为放线菌.采用单因素及正交设计等试验对CMC-Z培养基、发酵条件进行了优化,碳源、氮源最佳添加量分别为可溶性淀粉1%、明胶2%;最佳发酵条件：接种量7.5%,培养基初始pH 7.0,装量100 mL,培养温度30℃,培养时间72 h.通过方差和极差分析,表明影响菌株CMC-Z纤维素酶产生的因素主次顺序为：可溶性淀粉浓度〉初始pH〉装量〉明胶浓度〉接种量〉温度〉发酵时间.经优化后,其酶活可达到38.37 u.mL-1.     

耐高温乳酸菌的筛选

通过初筛、复筛,获得一株耐高温且产酸能力较强的菌株Y5,对该菌株进行了形态学和生理生化特性鉴定,确定此菌株为乳酸茵．通过单因素试验和正交试验确定菌株Y5的最佳产酸条件：发酵温度为55℃,转速为60r／min,接种量为7％,装液量为100mL．     

肉桂挥发油抗菌活性研究

采用琼脂平板二倍稀释法测定了肉桂挥发油对11种62株临床分离细菌和5株白假丝酵母真菌临床分离株的最低抑菌浓度,统计分析了它们对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和白假丝酵母菌等共5个种属的MIC50和MIC90,采用单因素方差分析法比较分析了肉桂挥发油分别对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和白假丝酵母菌共5个种属菌株抑菌活性的强弱.结果表明,肉桂挥发油对所有受试细菌和真菌均有较强的抗菌活性,最低抑菌浓度(MIC)为0.07¹.11mg/mL,且对耐药菌株和敏感株有相同的抗菌活性.肉桂挥发油对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的抑菌活性无明显统计学差异(P>0.05);对铜绿假单胞菌的抑菌活性明显低于对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的活性(P<0.01);对白假丝酵母真菌的活性均明显强于金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌(P<0.01).     

蓝莓果渣发酵乳饮料工艺研究

目的:以保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)为发酵菌株,开发蓝莓果渣乳饮料。方法:通过单因素和正交实验,以活菌数、花青素含量和pH值为评价指标,优化乳饮料配方及发酵条件。结果:最佳配方及发酵工艺为:脱脂奶粉添加量20%、食用葡萄糖添加量12%、蓝莓果渣添加量0.4%、发酵温度43℃、发酵时间24h和接种量0.5%,按此工艺所得产品中保加利亚乳杆菌菌落数对数值为10.658lgCFU/mL,花青素含量达到0.295 4mg/mL,pH值为4.27。结论:此研究获得蓝莓果渣发酵乳饮料酸甜可口,营养价值丰富,具有一定的保健功效。     

农用链霉素对核桃黑斑病伴生病原菌成团泛菌的抑菌活性

为了初步探索常见抗菌农药对核桃黑斑病伴生病原菌的抑菌作用,以核桃黑斑病伴生病原菌成团泛菌(Pantoea agglomerans)为供试菌株,以农用链霉素为抗菌素,分别用抑菌圈法和平板菌落计数法测定了对该病原菌的抑菌作用.结果表明,农用链霉素对核桃黑斑病伴生病原菌成团泛菌具有较好的抑菌作用,且随着药物浓度的增加,其抑菌效果愈加明显,在较高浓度条件下(50 mg/m L)处理96 h,其抑菌率可达49.5%.由此表明,农用链霉素对该病原菌具有较好的抗性,可作为防治核桃相关病害的首选农药.     

快速优化培养基检测技术在实验教学中的应用

以紫外分光光度法作为庆大霉素含量测定手段,采用正交试验方法,对紫色小单孢菌产庆大霉素的发酵培养基及发酵条件进行优化,通过统计学分析,确定发酵培养基最优组合为:黄豆饼粉3.5%,CaCO30.5%,淀粉5.5%,CoCl20.0006%。优化的发酵条件为:种龄60 h,接种量12 mL,装液量50 mL/500 mL摇瓶。在此优化条件下添加一定量的氨基酸培养6 d,庆大霉素效价较优化前提高了85.5%。用紫外分光光度法与微生物法测定庆大霉素发酵液效价产生的误差小于4%,该方法可以用于教学实验中庆大霉素液体发酵培养基优化的快速筛选。     

高产几丁质酶玫烟色棒束孢菌株筛选及发酵条件优化

通过测定几丁质酶活力的方法对来源于不同寄主和采集地的16株玫烟色棒束孢进行筛选,获得活性较高菌株RCEF3304,并对高活力菌株RCEF3304产几丁质酶的pH值、装液量、接种量和温度等发酵条件进行优化研究。结果表明高酶活菌株产酶最适条件:胶体几丁质2%,NaNO33%,Mg2+0.05%,培养基初始pH值6.0,接种量12%,100 mL装液量为10 mL,温度25℃和培养时间36 h;最适发酵工艺条件下,几丁质酶酶活OD值达到0.486,比优化前发酵水平提高了128%。     

高活性降解羽毛角蛋白菌株鉴定及发酵条件优化

通过对已筛选到的产生角蛋白酶的H菌株形态观察、生理生化试验分析最终确定该菌为枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis),对该菌的发酵条件进行优化,同时将显著影响条件进行正交试验。试验结果表明,最佳发酵培养基:玉米粉10g,豆粕10g,MgCl20.1g,CaCl20.06g,NaCl 0.5g,K2HPO41.4g,KH2PO40.7g,羽毛粉10g,水1 000mL,培养基pH 7.5~8.0;最适培养条件:接种量为2%,培养温度37℃,180r/min摇床培养96h,其产角蛋白酶活性最高为2.56×10-3kat/L(153.7U/mL)。     

紫外线诱变庆大霉素产生菌育种与发酵条件的研究

以紫外线为诱变剂,用庆大霉素产生菌JY1-12为出发菌株,选育出性能优良的菌株JY3-5.经正交试验确定其最佳发酵培养基,研究了最佳发酵温度和初始pH值,使其摇瓶效价提高35.1%;30m3灌放大试验,比出发菌株效价提高19.2%.     

禾谷镰刀菌拮抗放线菌21-3的筛选及鉴定

为了筛选对禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)具有拮抗能力的放线菌,从小麦根际土壤中分离获得1株具有较好拮抗能力的菌株21-3.根据培养特征、生理生化反应及16S rDNA序列分析的手段对其进行鉴定,并且对该菌株的抑菌活性进行分析.结果表明,菌株21-3为灰略红链霉菌(Streptomyces gri...     

薄荷提取物的抗菌活性研究

采用滤纸片法对薄荷不同温度下的浸提液和精油的抗菌活性进行定性、定量测定.结果表明,薄荷对供试菌株均有抑制效果,精油的抑菌活性最强.薄荷精油对三种试验菌株的抑菌性:枯草芽孢杆菌>金黄色葡萄球菌>大肠杆菌;精油对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌三株菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为:60.0μL/mL、30μL/mL和20μL/mL.