高中生物学教学中涉及的一些重要酶及其作用

1基因工程中的重要酶 1.1限制性核酸内切酶（简称＂限制酶＂）是可以识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA,使DNA链中磷酸二酯键断开的一类内切酶,被誉为＂分子手术刀＂。     

限制性核酸内切酶

本文综述了限制性核酸内切酶的种类、性质、制备方法、活力和纯度测定方法及其在分子生物学方面的应用。     

基因工程中工具酶的有关问题解答

<正>1限制性核酸内切酶是如何命名的?怎样理解其识别序列的特异性和切割位点的特异性?限制性核酸内切酶的命名,目前主要以Smith和Nathans的命名系统为基础,     

《中学生物学》杂志电子版征订启事

基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。DNA重组技术是体外的微显微操作技术，切割DNA的工具是限制性核酸内切酶（简称限制酶）。新课标生物选修3教材“DNA重组技术的基本工具”对限制性核酸内切酶作了一定简介，     

基因工程中限制酶切割的几个问题

限制酶全称限制性核酸内切酶,能识别并切割具有特异序列的双链DNA分子,主要从原核细胞中分离纯化而来,迄今为止,已分离出来的限制酶约有4000余种.作为基因工程中非常重要的一种工具,它应用广泛,是历年高考中能力题的命题着力点,但由于书本相关内容介绍简单,而考试命题时常有所拓展,很多师生在解答此类题目时常发生认知冲突,产生很大的困惑,为此,笔者总结了教学过程中的一些问题,供大家参考.     

黄毛鼠 mtDNA 限制性内切酶图谱的研究

用７种限制性内切酶对黄毛鼠（Ｒａｔｕｓｌｏｓｅａ）线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）进行了分析。ＢａｍＨⅠ，ＢｇｌⅠ，ＰｓｔⅠ，ＰｖｕⅡ，ＥｃｏＲⅤ，ＨｉｎｄⅢ和ＢｃｌⅠ在黄毛鼠ｍｔＤＮＡ上分别具有１，２，２，２，４，５和７个切点，根据单酶解和双酶解片段数目和分子量，构建了黄毛鼠ｍｔＤＮＡ的限制性内切酶图谱。     

对现代生物科技专题中一些常见疑问的分析

1限制酶为什么只切割外源DNA而对自身DNA不起作用?限制酶存在于原核生物体内,而原核生物体内限制酶与甲基化酶往往同时存在。甲基化酶同限制性内切酶具有完全相同的识别序列,甲基化酶使识别序列中的某个碱基发生甲基化,从而保护DNA不被限制性内切酶切开。     

对人教版高中《现代生物科技》教材中有关问题的解答

迄今已从300多种不同的微生物中分离出约4000多种限制酶。很多原核生物在生活中很容易受到外源DNA的入侵,在长期的进化过程中就形成了一套完善的防御机制,以保持自身遗传物质的相对稳定性。限制性核酸内切酶在这个防御机制中就起着至关重要的作用,当外源DNA入侵时,限制酶就可以把这些DNA切割成小片断,使其不能在生物体内表达。     

限制性核酸内切酶的研究进展

<正> 外科医生给患者动手术需要手术刀,基因工程师们给DNA分子(基因)动手术需要分子手术刀,这就是工具酶。基因工程中使用的工具酶很多,包括限制性核酸酶内切、DNA连接酶和其他一些参与DNA合成与修饰的酶类,最重要的是限制性内切核酸酶。基因工程上把那些具有识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链     

有关限制性内切酶应用的习题简析

特别提示： 我们知道限制性内切酶（限制酶）是指能识别DNA中特定破基顺序,并在特定位点切割双链DNA的核酸内切酶它在生物学中应用相当广泛,是基因工程中的工具酶,用来构连重组DNA分子,对于遗传性疾病的基因定位和基因诊断的研究也具有重要的应用价值。下面我们以问题的形式简要地了解它在这些方面的应用     

原子力显微镜观察DNA与内切酶的相互作用

原子力显微镜是观察DNA与内切酶相互作用比较有效的研究技术。实验中,首先把不同种类的内切酶与DNA在含有钙离子的缓冲液中培育30 min,再通过原子力成像观察其相互作用后的复合物形貌。结果表明,二聚体内切酶EcoRV会结合到λ-DNA的单个识别位点,最终形成珠串状结构,而且对DNA有弯曲作用;另一类型四聚体内切酶BspMI除了可以结合λ-DNA的单个位点外,还可以结合2个识别位点而形成圆环状结构。此结果可以直观地观察到两种内切酶与DNA的作用形态,同时对DNA的弯曲与成环等结构给出直接证据。最后给出两种内切酶与DNA相互作用的模型图。     

水稻线粒体DNA的分离纯化及其脉冲电泳分析

为了水稻线粒体基因文库的构建和细胞质雄性不育分子机制的研究,用简化的方法提纯了水稻线粒体DNA,限制性内切酶酶切图谱显示了清晰的带型。HindⅢ酶切产生37条带,Xho酶切产生30条带,该方法重复性好。同时用新技术——脉冲电泳,测定了水稻线粒体DNA的分了量,并就其作为一种新手段,在植物线粒体DNA的异质性、结构和分子大小等方面的研究所具有的优越性进行了讨论。     

DNA重组技术中有关碱基对之间氢键断裂的知识问题

本文从限制性核酸内切酶的作用、维持DNA双螺旋稳定结构的三种作用力、DNA中氢键的化学本质等方面来探讨了在体外DNA重组中,双链DNA酶切位点处核苷链上碱基对之间氢键断裂的原因。     

对“基因工程”重要考点的解读

基因工程相关内容操作性强,但是在中学生物学教学中难以进行实际的实验操作。为此,本文对近年来基因工程的重要考点进行了解读。1限制酶限制酶中的"限制"的含义是它比普通酶具有更强的专一性,这种专一性表现在三个层次:识别DNA(不识别RNA)、识别特定序列(两条链正反读序列一样)、只能切割特定序列内特定位点的磷酸二酯键。1.1限制酶的特异性例1(2010浙江高考)用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸是否可行?解析烟草花叶病毒是RNA病毒,限制酶不能识别RNA,所以不可行。     

真菌的分子生物学鉴定方法

真菌的分子生物学鉴定的方法及原理,真菌DNA碱基组成的分类鉴定、DNA分子杂交、真菌mtDNA限制性片段长度分态性的分析以及随即扩增多态性DNA分析。     

草鱼染色体高分辨显带的研究

本文介绍了将伸长的草鱼染色体分裂相制片,经六种限制性内切酶、G、C带显带处理及Ag-NoR技术,对其进行高分辨多重显带的研究.     

大肠杆菌知识漫谈

在高中生物学教材中多处涉及到大肠杆菌,如T2噬菌体侵染大肠杆菌实验、第一种限制性内切酶是来源于大肠杆菌的限制酶EcoR、最常用的质粒是大肠杆菌的质粒、基因工程中常用的受体细胞是大肠杆菌等;在微生物与发酵工程中有关大肠杆菌的内容更多,如以正在分裂的大肠杆菌图片说明细     

聚焦2008年高考试题中的"限制性内切酶"

本刊2007年11期刊登了《生物工程中的有关筛选问题》,其中对重组DNA分子的筛选作了重点讨论,2008年各地高考生物试题以“限制性,内切酶”为命题切入点,对基因工程重组DNA分子的筛选问题进行了重点考查,现举例分析．     

与核酸有关的几种酶的比较

<正>一、限制性核酸内切酶(限制酶)1.限制酶的来源:在基因工程中,用来切割DNA的工具是限制性核酸内切酶,又称限制酶。迄今为止,基因工程中所用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中分离纯化而来的,它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列。微生物中限制酶之所以不切断自身DNA,是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完整的防御机制,可以将外源入侵的DNA降解掉。生物在长期演化过程中,含有     

三种鸡形目鸟类线粒体DNA的研究

采用１２种限制性内切酶分析了家鸡（Ｇａｌｕｓｇａｌｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ）、雉鸡（Ｐｈａｓｉａｎｕｓｃｏｌｃｈｉｃｕｓ）和普通珍珠鸡（Ｎｕｍｉｄａｍｅｌｅａｇｒｉｓ）线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）。结果：①５个不同品种家鸡ｍｔＤＮＡ具有相同的限制性类型，进一步说明家鸡ｍｔＤＮＡ种内遗传变异程度很低；②雉鸡ｍｔＤＮＡ的ＢｇｌⅠ，ＥｃｏＲⅠ，ＨｉｎｄⅢ和ＰｖｕⅡ等４种限制性酶的酶切类型与云南环颈雉不相同，说明雉鸡存在ｍｔＤＮＡ种内差异；③比较家鸡、雉鸡和珍珠鸡间ｍｔＤＮＡ的ＲＦＬＰ，计算他们之间的遗传距离，家鸡与珍珠鸡的遗传距离较近（Ｐ＝０．０９６），家鸡与雉鸡以及雉鸡与珍珠鸡的遗传距离较远，分别为０．２１５和０．２２９，初步结果表明珍珠鸡是距雉科的家鸡和雉鸡亲缘关系较近的种类，和家鸡的关系相当密切。