固定化木瓜蛋白酶的研究

近年来,国内外学者对固定化酶的载体和固定化方法进行了大量的研究,取得了一定的成果,有些成果已应用于工业生产。本实验直接利用包埋凝胶法,以海藻酸钠为载体,对木瓜蛋白酶的固定化条件,以及固定化酶的动力学性质进行了初步的研究。实验对载体的浓度、载体与酶的比例,以及固定化酶颗粒大小等诸方面对固定化酶的影响进行了比较。实验确定了固定化酶的最佳固定化条件。并对固定化酶的催化特性进行了初步的研究,测定了固定化酶的最适pH值,最适温度和米氏常数Km;同时还对固定化酶的热稳定性,固定化酶的酶活性等问题进行了研究。     

酶固定化及应用研究进展

本文主要从酶生物催化剂固定化载体、固定化方法等方面介绍了固定化酶的研究进展情况,并从其在医药、食品、环保、能源等方面的新应用出发,综述了固定化酶在新领域中的应用,展望了酶固定化研究的发展前景,指出了今后酶固定化研究的主要方向是多酶固定化及制备高活性、高负载、高稳定性的固定化酶.     

壳聚糖固定化As1.398中性蛋白酶稳定性的研究

研究了以中空球形壳聚糖固定As1 .398中性蛋白酶的方法 ,分析了戊二醛浓度、给酶量对固定化的影响 ,并对固定化酶的性质进行了讨论 ,实验结果显示 ,戊二醛质量浓度为 4 % ,每克载体给酶量 2 5mg时 ,酶活力回收为 65 .4% ,固定化酶的热稳定性、pH稳定性及乙醇的稳定性均高于游离酶     

壳聚糖固定化Asl.398中性蛋白酶稳定性的研究

研究了以中空球形壳聚糖固定Asl.398中性蛋白酶的方法，分析了戊二醛浓度，给酶量对固定化的影响，并对固定化酶的性质进行了讨论，实验结果显示，戊二醛质量浓度为4%，每克载体给酶量25mg时，酶活力回收为65.4%，固定化酶的热稳定性,pH稳定性及乙醇的稳定性均高于游离酶。     

蛋壳作载体固定化脂肪酶

研究了蛋壳作载体,吸附交联法固定化脂肪酶的最佳工艺;C_(酶)=0.12g·g~(-1)cor,t_(吸附)=30min,pH_(交联)=6.2,t_(温度)=室温,得到的最大固定化酶活力为29.41U·g_(car)~(-1);并考察了该固定化酶的稳定性:pH=9.0,t=35℃,交联后的固定化酶重复使用6次后活力仍保贸53％。     

漆酶固定化的研究动态及应用前景

本文概述了漆酶固定化的基本方法,着重介绍了漆酶固定化的创新和发展,并对其应用前景进行了展望。     

褐色高温单孢菌PE-211纤维素酶的纯化及固定化研究

本研究望能为其在工业、农业、轻工业等方面的应用提供一定的理论依据。研究方法如下：利用摇瓶培养基进行培养,经硫酸铵盐析、2LSephadexG-100柱纯化,用壳聚糖进行固定化。结果是粗酶液被纯化,以戊二醛为交联剂制备固定化酶,得出结论：褐色高温单孢菌PE-211纤维素酶经硫酸铵盐析、2KSephadexG-100柱纯化,粗酶液被纯化47．5倍．比活力为54．15[U／rag,以戊二醛为交联剂制备固定化酶。酶动力学研究表明,固定化酶的最适pH为8．5,最适温度为70℃,且固定化酶在60℃～80℃活力较高;该酶的耐热性很强．而固定化酶的热稳定性比原酶强;以羧甲基纤维素钠为底物。固定化酶的Km为7．19mg／ml,Vmax为0．132mz／ml·min。     

大豆磷脂酶D的固定化及其催化功能

目的:单因素试验研究大豆磷脂酶D(phospholipase D,PLD)的固定化工艺以及固定化PLD催化合成大豆磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine, PS)的最佳工艺。方法:首先通过非极性溶剂辅助St9ber法制备纳米级介孔二氧化硅作为固定化酶的载体,通过吸附-沉淀-交联方式将PLD固定,单因素试验优化固定化条件,并对固定化后的PLD进行结构表征和热稳定性及贮存稳定性研究;然后利用固定化PLD以大豆卵磷脂和L-丝氨酸为底物催化合成PS,并通过单因素试验确定最佳合成工艺;最后对固定化PLD的循环使用性能进行研究。结果:非极性溶剂辅助St9ber法制备的介孔二氧化硅BET比表面积为948 m²/g,气孔体积为1.35 cm³/g,孔径为8.20 nm,平均粒径为335.10 nm,扫描电镜确定载体的形貌为近球形结构;当加入5.00 mL乙醇、1.00 mL酶液(温度为35℃、pH为6.50)、0.40 mL戊二醛时,固定化PLD的相对酶活达到最大值(88.39%±1.00%),蛋白固定化率为80.76%±1.30%;70℃时游离...     

固定化扁桃酸消旋酶的制备及其性能

为克服游离扁桃酸消旋酶的稳定性差、不易回收等缺陷,以镍离子螯合的琼脂糖微球为载体,对扁桃酸消旋酶进行固定化实验.由SDS-PAGE电泳显示,镍离子螯合的琼脂糖微球能专一性地从粗酶液中吸附扁桃酸消旋酶.以偶联效率、蛋白结合率、相对活力和活力回收等为指标,考察给酶量的影响,结果显示：当给酶量为12 mg蛋白/g微球时,固定化效果最佳;固定化酶最佳的反应温度为30℃、pH为8.0、底物浓度为80 mM;与游离酶相比,固定化酶对温度和底物的耐受性均有提高;固定化酶操作稳定性好,在循环使用30批次后,残余酶活为首次固定化酶酶活的60%左右.     

金属阳离子交联TiO_2-海藻酸杂化凝胶(英文)

为了改善海藻酸钠固定化酶微球的扩散性与酶活稳定性,以纳米二氧化钛修饰海藻酸为固定化酶载体,Ca2+,Ce3+,Ni2+,Cu2+和Fe3+为杂化凝胶的阳离子交联剂,木瓜蛋白酶为模型酶,制备固定化酶微球.通过UV-Vis光谱检测酶活,考察了5种交联剂对固定化酶的动力学和稳定性的影响,结果表明:当Cu2+为交联剂时,固定化酶具有最高的亲和性、最低的米氏常数(Km=11.0 mg/m L)和最高的稳定性.研究了TiO 2与木瓜蛋白酶的质量比对固定化酶稳定性以及酶蛋白泄漏的影响,结果显示纳米二氧化钛与木瓜蛋白酶的质量比为10∶1时,制备的固定化酶微球性能最好,因为二氧化钛能有效阻止固定化酶的泄漏.通过离子胶凝制备Cu/海藻酸/TiO 2杂化凝胶可获得较好的扩散能力和酶活稳定性.     

壳聚糖微球制备及其固定化β-甘露聚糖酶研究

以脱乙酰度91%的壳聚糖为材料,采用两种不同的方法制备壳聚糖微球,利用扫描电子显微镜观察了壳聚糖微球形态与结构,筛选出具有较好形态及表面结构的壳聚糖微球固定化β-甘露聚糖酶,以酶活回收率为参考指标确定了固定化该酶的最佳条件。结果表明:当采用透平油为分散介质,壳聚糖浓度2.5%、戊二醛浓度为0.42%时,固定化酶的酶活回收率最高,达到63%。     

固定化酶催化合成丁酸丁酯

以固定化酶为催化剂,正丁醇与正丁酸为原料合成丁酸丁酯,实验考察了不同类型的酶催化剂、固定化酶催化剂用量、醇酸摩尔比、反应温度、反应时间、pH值等因素对合成酯化率的影响。优化的反应条件:醇酸摩尔比为1.5∶1.0,固定化酶催化剂用量比为0.8%,反应时间为24h,反应温度50℃,PH=7.5,酯化率可达57.3%.     

等离子体技术在固定化酶载体材料中的应用

等离子体技术作为材料表面改性的一种手段，可以赋予材料表面各种性能。以等离子体处理的载体材料固定化酶，开拓了固定化酶技术的新领域。本综述了用等离子体技术处理载体材料进行固定化酶的最新进展，并展望了其发展前景。     

用于制备固定化酵母细胞的装置

“酵母细胞的固定化”是人教版高中生物学选修教材《生物技术实践》专题4“酶的研究与应用”中的课题。该课题实验流程清晰,实验仪器、材料、药品等课前容易准备,可操作性强,但是如何才能制备大小几乎一致的固定化酵母细胞呢？教材中在制备固定化酵母细胞时要求“以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl 2溶液中”。在实际操作中,学生对“恒定的速度”很难把握,结果导致固定化酵母细胞形态大小不一。笔者利用废弃材料设计出用“输液法”制备酵母细胞的固定化实验操作装置（图1）。     

PNIPAM/HEMA固定化α-胰凝乳蛋白酶的研究

以聚N-异丙基丙烯酰胺／甲基丙烯酸-α-羟基乙酯为基质来固定α-胰凝乳蛋白酶，并对所制备的固定化酶的性能进行了多方面的研究，结果表明，酶促反应最适温度为30℃，最适pH=7．7，在30℃-45℃区间酶活力可以实现连续可调：经8次连续催化，固定化酶活力无明显下降；储存49天后，固定化酶活力变化不大，为进一步的研究固定化酶提供了必要的实验依据．     

氯过氧化物酶的研究及应用新进展

氯过氧化物酶是一种血红素过氧化物酶,因其独特的活性位点结构和广泛的底物适应性,被广泛应用于手性化合物的合成、石油净化、染料降解和电化学应用等领域。固定化氯过氧化物酶与天然氯过氧化物酶相比,有更强的热稳定性,耐强酸碱性和更宽的最适pH值范围。因此,在工业生产应用中更具优势和潜力。文章综述了氯过氧化物酶的结构、催化的反应类型以及氯过氧化物酶的固定化,并对氯过氧化物酶在工业中的应用作了简单介绍。     

固定化细胞产壳聚糖酶条件的研究

采用L9(34)正交试验法,探讨了海藻酸钠浓度、CaCl2浓度、壳聚糖含量和包埋菌量对固定化细胞产壳聚糖酶的影响.实验结果表明,海藻酸钠浓度是影响固定化细胞产壳聚糖酶的重要因素;最终确定的最佳组合为A1B3C3D3,即海藻酸钠浓度2%、CaCl2浓度4%、壳聚糖含量1.5%和包埋菌量6%.     

一种产自出芽短梗霉的胞外脂肪酶的分离纯化和酶学性质研究（英文）

目的:从出芽短梗霉所产的脂肪酶中筛选具有独特酶学性质的脂肪酶。创新点:发现了一种新的产自出芽短梗霉的脂肪酶,并对其酶学性质进行了研究。方法:通过超滤和DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子层析柱方法对脂肪酶进行纯化,随后分别用对硝基酚邻酸盐(pN PP)法对纯化得到的脂肪酶进行了酶学性质研究,并用酸碱中和法检测了脂肪酶对可食用油脂的水解。结论:对分离纯化得到的脂肪酶的酶学性质研究表明,该酶的分子量为39.5 kDa,具有一个亚基,为胞外酶。最佳催化温度为40°C,最佳催化pH为7。该酶对一些有机溶剂、表面活性剂和离子具有优良的抗性。此外,它可以水解常见的食用油。这些良好的特性使该脂肪酶有可能被应用于洗涤剂生产、生物柴油合成和食品制造等一些工业领域。     

包埋固定化法处理石油污染水体应用研究进展

文文章论述了固定化微生物技术的概念及方法,讨论了包埋法固定化法处理石油污染水体的载体选择、制备工艺、应用效果.并对固定化技术在石油污染水体生物修复领域的研究和应用前景进行了展望.     

环境工程中固定化酶与固定化微生物的应用

微生物的酶可以从微生物体内提取出来,制成多种酶制剂,固定化酶是从微生物体内提取生物酶,连同固定化微生物一起成为微生物新技术之一,从而在环境工程中得到应用。