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以渐危植物海菜花基因组DNA为研究对象,筛选引物UBC-818【序列为(CA)8G】研究并确定了该引物适宜的退火温度,对影响ISSR扩增效果的主要参数进行筛选和优化,确定了海菜花的ISSR分析的最佳反应体系:15μL反应体系中含25ng模板DNA,0.2mmol·L^-1引物,0.2μmol·L^-1dNTPs,2.0mmol·L^-1Mg^2+,0.5UTaq酶,1.5μL10×PCRBufferMg2+(-)[100mmol·L^-1Tris—HCl(pH8.3),500mmol·L^-1KCl]. 相似文献
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建立并优化虎耳草ISSR-PCR反应体系和扩增程序,为探讨虎耳草种质资源遗传多样性奠定基础.采用正交设计方法和单因子试验,研究TaqDNA聚合酶、dNTP、Mg2+、引物、模板DNA、延伸时间及循环次数对PCR扩增的影响.结果表明:虎耳草ISSR-PCR的最佳反应体系为:在25μL的反应体系中含模板DNA 35ng,Mg2+1.25mmo/lL、dNTP 380μmo/lL、引物1.2μmo/lL、Taq DNA聚合酶1.5U.反应程序为:95℃预变性5min;94℃变性1min,50℃(据不同引物的退火温度)退火70s,72℃延伸1.5min,40个循环;72℃延伸10min,4℃保存.经过11份虎耳草种质检验,证明该体系稳定可靠,可用于虎耳草种质资源遗传多样性分析及居群鉴别的研究. 相似文献
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采用改进的CTAB法提取中国特有濒危裸子植物白豆杉(Pseudotaxus chienii)嫩叶总DNA,进行RAPD分析.分别研究了模板DNA、引物、dNTPs、Mg2 和TaqDNA聚合酶用量对RAPD PCR扩增反应结果的影响.筛选并建立了适合于白豆杉RAPD扩增的反应体系:总体积25μL,其中10×PCR缓冲液(500 mmol/L KCl,100 mmol/L Tris-HCl,1.0%Triton X-100,20 mmol/L MgCl2)2.0μL,引物(1.5μmol/L)0.5μL,dNTPs(10 mmol/L)0.4μL,模板1μL(35 ng),Taq酶0.8μL(0.5 U),水20.3 μL. 相似文献
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采用改进的CTAB法提取中国特有濒危裸子植物白豆杉(Pseudotaxus chienii)嫩叶总DNA,进行RAPD分析.分别研究了模板DNA、引物、dNTPs、Mg2 和TaqDNA聚合酶用量对RAPDPCR扩增反应结果的影响.筛选并建立了适合于白豆杉RAPD扩增的反应体系:总体积25μL,其中10×PCR缓冲液(500mmol/L KCl,100mmol/L Tris-HCl,1.0%Triton X-100,20mmol/L MgCl2)2.0μL,引物(1.5μmol/L)0.5μL,dNTPs(10mmol/L)0.4μL,模板1μL(35ng),Taq酶0.8μL(0.5U),水20.3μL. 相似文献
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本研究以辣椒基因组DNA为模板,优化辣椒SRAP反应体系中的参数,建立了一套适用于辣椒的SRAP-PCR最佳反应体系。在25μL反应体系中,模板DNA 50 ng、上下游引物各0.1μmol/L、dNTPs 0.1mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U、Mg2+浓度为2.0 mmol/L。扩增程序为:94℃3 min;94℃30 s、35℃30 s、72℃1.5 min,5 cycles;94℃30 s、54℃30 s、72℃30 s,35 cycles;72℃10 min,用2%琼脂糖凝胶电泳和8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增结果。利用该优化体系筛选引物,筛选出条带清晰、重复性好的15对SRAP引物组合,验证了体系的实用性。 相似文献
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张子超 《少年文艺(南京)》2010,(3):42-43
小时候,因为爸爸妈妈工作很忙,没时间照顾我,所以我就住到了外公外婆家。外婆家的房予特别大,前后左右有六七间。院子前面是一条河,河边欧着一棵柳树,那柳树已经种了好多年,依然是那样的翠绿、挺拔。 相似文献
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石杉科植物RAPD反应体系的优化 总被引:1,自引:0,他引:1
以石杉科新鲜植物为材料,应用改良的CTAB法提取其基因组DNA,通过单因子实验优化了RAPD的反应体系.在25 μL反应体系中,Mg2++2.0 mmol/L,dNTPs 0.3 mmol/L,模板DNA3ng/μL,随机引物0.21xmol/L,Taq DNA聚合酶1.25U.PCK循环程序为:94℃预变性5 min;然后94℃变性1 min,39℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,36个循环;最后72℃延伸7 min,4℃保存.结果表明该体系具有良好的稳定性和重复性,可应用于石杉科植物系统分类,种的鉴定和遗传多样性研究. 相似文献
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采用单因子梯度试验法对影响雷公藤RAPD—PCIK反应的Mg^2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶的用量及DNA模板浓度进行了筛选。结果表明获得清晰、重复性高的雷公藤RAPD-PCR扩增条件为:20μL PCR反应体积中,2.0mmol·L^-1 MgCl2,0.2mmol·L^-1 dNTPs,0.2μmol·L^-1引物,50ng模板DNA,1UTaq DNA聚合酶。 相似文献
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胡桃楸ISSR-PCR反应体系的建立及优化 总被引:3,自引:0,他引:3
在研究胡桃楸遗传多样性的过程中,为了获得清晰、重复性好的ISSR扩增结果,采用改良的CTAB法提取胡桃楸基因组DNA,利用正交设计与单因子试验相结合的方法对影响胡桃楸ISSR-PCR反应体系的5个主要因素(Taq酶、Mg~(2+)、dNTP、引物、模板DNA)在4个水平上进行优化设计。通过综合比较分析,筛选出各反应因素的最佳水平,建立胡桃楸ISSR-PCR最佳反应体系:20μL的反应体系中,Taq酶1.0 U,Mg~(2+)2.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,模板DNA 50~250 ng,引物0.4μmol/L。在此基础上筛选出13条多态性好、扩增稳定的ISSR引物,并确立了最佳退火温度和循环次数。这一优化系统的建立为今后利用ISSR技术进行胡桃楸遗传多样性、亲缘关系以及物种保护等的研究奠定了基础。 相似文献
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红松SRAP-PCR反应体系的建立及优化 总被引:1,自引:0,他引:1
相关序列扩增多态性(Sequence-Related Amplified Polymorphism,SRAP)是对ORFs(OpenReading Frames)进行扩增的一种新型的基于PCR的标记方法。以CTAB法提取的红松针叶DNA为模板,应用单因子试验及L16(45)正交试验系统分析了DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶浓度等对SRAP-PCR扩增结果的影响。确定了PCR的最佳反应体系为:20μL体系中,1×PCRbuffer 2μL、DNA模板40~100 ng,Mg2+2.5mmol/L,dNTPs 0.15 mmol/L,引物0.15μmol/L,Taq酶1.5 U。PCR最优的扩增程序为:进行35个循环,前5个循环中94℃变性1 min,35℃复性1 min,延伸30 s;后30个循环中94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min;最后72℃延伸7 min,4℃保存。在此反应体系下,所扩增谱带清晰、稳定、多态性高,为进行红松不同种源间遗传分化以及构建遗传图谱等内容的研究奠定基础。 相似文献
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论我国本科生导师制制度的建立 总被引:19,自引:0,他引:19
本科生导师制作为一种特有的育人模式在我国高校多有试行,但仍没有提升到制度层面来建设。带有较大的随意性,素质教育理念的确立、完全学分制的推行和中国本科教育品牌的打造。使得本科生导师制的制度化有了坚实的现实基础。更重要的是,学分制和导师制是一对“孪生子”,是互为支撑的教学管理制度。没有导师制,完全学分制的推广就没有保障。本科生导师制制度化建设包括盘活导师资源、健全配套制度、争取国家政策法规支持等。 相似文献
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论高校新闻发言人制度的建设 总被引:1,自引:0,他引:1
黄志斌 《福建教育学院学报》2007,8(7):22-25
2006年末,教育部要求全国的各级各类学校建立新闻发言人制度;该制度是高校深化改革进一步实施校务公开,坚持依法治校的必然趋势,是树立学校良好形象的重要手段,是加强对外宣传的重要措施;高校在实践中要努力把握新闻发言人制度的基本要求和特点,选拔好新闻发言人,加强对这一制度的建设。 相似文献
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政府雇员制度是我国政府体制改革过程中出现的新鲜事物.它倡导灵活的用人机制,弥补了现行公务员制度的不足.由于政府雇员制度目前尚处于初步试点之中,所以它的真正建立还存在多种制约因素. 相似文献
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临时仲裁是仲裁的重要组成部分,是相对于机构仲裁而言的。这种仲裁形式具有灵活性、便捷性、经济性等优点,更符合作为投资者的当事人的心理。当事人选择临时仲裁将具有更大的自主性。临时仲裁制度在世界范围内都是通行的,其在国际上解决经济纠纷中起着与机构仲裁同样重要的作用。目前我国还不承认临时仲裁制度。随着我国与国际经济交往的日益频繁,我国仲裁制度也应与国际惯例或者国际通行规定相符合,以利于我国对外经济贸易的发展和改善我国的投资环境。 相似文献
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吴限英 《黎明职业大学学报》2006,(2):64-67
从平衡婚姻各方利益出发,在充分肯定家事劳动的价值及合理评估人力资本的预期利益的基础上,阐述构建我国补偿性扶养制度的必要性、可能性及制度内容设想。 相似文献