人酸性成纤维细胞生长因子cDNA的表达

目的：研究人酸性成纤维细胞生长因子（haFGF）cDNA在不同表达系统中的表达，旨在得到高效表达haFGF的表达系统。方法：采用PCR方法扩增人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF）cDNA，将该cDNA片段分别插入表达载体pKK223-3及pET3C的表达框架中，筛选得到了重组质粒pKK223-3-haFGF及pET3C-haFGF，分别转化大肠杆菌JM109及BL21（DE3），构建了表达菌株JM109/pKK223-3-haFGF及BL21(DE3)/pET3C-haFGF,用IPTG诱导表达。结果；SDS-PAGE的结果表明，表达菌株BL21(DE3)/pET3C-haFGF能高效表达人酸性成纤维细胞生长因子，而JM109/pKK223-3-haFGF诱导后目标蛋白带不明显。结论：BL21（DE3）/pET3C表达系统更适于表达人酸性成纤维细胞生长因子。     

内皮抑素通过调控PDGFR/ERK信号通路抑制人成纤维细胞纤维化的研究（英文）

目的:近年来发现内皮抑素可以抑制组织纤维化,但是具体机制不详。本文旨在研究内皮抑素抑制纤维化的作用机制。创新点:首次阐明了内皮抑素对成纤维细胞PDGFRβ(血小板衍生生长因子受体β)/ERK(细胞外调节蛋白激酶)信号通路的影响及其与纤维化的关系。方法:体外培养人成纤维细胞,采用血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)或转化生长因子-β1(TGF-β1)建立细胞纤维化模型,进一步应用内皮抑素处理,通过检测胶原及肌成纤维细胞表面标志等了解内皮抑素对细胞纤维化和表型转化的抑制作用。进而检测内皮抑素对成纤维细胞PDGFRβ/ERK信号通路的影响,并分析其可能与抗纤维化作用存在的关联。结论:内皮抑素通过调控PDGFRβ/ERK信号通路抑制瘢痕增生,是多靶点的、具有较好的抗纤维化临床应用前景的药物。     

成纤维细胞生长因子研究进展

成纤维细胞生长因子(Fibrobiast growthfactor.FGF)是广泛存在于多种组织中的一类多肽生长因子,1974年由Gospodarwicz从牛脑垂体中发现并加以分离纯化.由于它对成纤维细胞具有很强的促增殖作用,故命名为成纤维细胞生长因子.经过近20年的研究,已确定FGF家族至少有七个成员,它们对多种细胞的生长与分化有重要的调节作用.现就FGF研究状况介绍如下.一、FGF家族近年来研究表明,FGF是由多种多肽因子组成的一个大家族.至少包括七个成员:酸性FGF(aFGF)、碱性FGF(bFGF)、hst/ks_3、int-2、FGF-5、FGF-6及角质细胞生长因子(KGF或FGF-7).各种FGF的基因已基本清楚,FGF基因皆为单拷贝,由三个外显子和两     

舒尼替尼对结肠成纤维细胞体内外抑制机制研究(英文)

研究目的:探索小分子酪氨酸激酶抑制剂舒尼替尼(sunitinib)对结肠肿瘤微环境中的肿瘤相关成纤维细胞的作用及其机制。创新要点:舒尼替尼通过抑制肿瘤间质成纤维细胞的生长,间接发挥抗肿瘤效应,为结肠癌综合治疗的提供新途径。研究方法:通过细胞周期分析和细胞增殖测定进行舒尼替尼体外抑制肿瘤细胞的研究。采用Western-blot检测磷酸化血小板衍生生长因子β受体(PDGFR-β)、蛋白激酶B(Akt)及细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)的蛋白水平。通过注射肠腺癌细胞株SW620和结肠成纤维细胞构建的裸鼠移植瘤模型来研究舒尼替尼的体内抑瘤效果。重要结论:舒尼替尼可有效抑制结肠癌来源的原代结肠成纤维细胞生长,该抑制作用主要通过抑制血小板衍生生长因子(PDGF)信号通路得以实现。     

论对老年压疮的治疗与护理

目的对于老年压疮的治疗和护理进行探讨和分析。方法通过对201301—201312期间大同市第三人民医院的60例并发压疮患者的临床资料以及临床结果进行归纳整理,对老年人压疮发生的危险因素进行分析,并采用马应龙龙珠软膏和重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液相结合的治疗方法对患者进行治疗,通过治疗结果分析该方法的可行性。结果经治疗,60例压疮患者全部愈合,治愈率100%。治愈天数最短15 d,最长60 d,平均35 d。结论马应龙龙珠软膏和重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液相结合的治疗方法可以有效地防治老年压疮。     

恶性肿瘤中bFGF与血管生成的关系

肿瘤的增长和转移依靠肿瘤微血管的生成为其提供营养和途径.研究表明.碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)与许多恶性肿瘤中的微血管密度(microvessel density,MVD)有关,bFGF表达越高,其肿瘤组织中MVD也越高,表明bFGF与恶性肿瘤的血管生成关系密切.     

血糖综合调节机制分析

胰岛素是降血糖的重要激素,成纤维细胞生长因子1(FGF1)可通过新的途径降血糖,甲状腺激素也能降血糖。血糖升高主要由胰高血糖素主导,但儿茶酚胺(包括肾上腺素和去甲肾上腺素等)、糖皮质激素、甲状腺激素、生长激素等多种激素也参与其中。此外,神经系统也参与血糖的调节。深入了解血糖调节机制有利于师生理解各系统间的相互协调关系,构建稳态与平衡观,同时体会生命的复杂性。     

成纤维细胞增殖改变心脏兴奋传导和收缩的仿真研究(英文)

研究目的:通过建立心肌-成纤维细胞电力耦合模型,探讨成纤维细胞增殖对心脏兴奋传导和力学收缩的影响。创新要点:基于人心室肌细胞的实验数据,修正了ten Tusscher等人发表的心室肌模型,构建心肌细胞-成纤维细胞的耦合模型,仿真了成纤维细胞对心肌组织电生理及力学的影响。通过改变耦合模型中重要参数的数值,如网格分辨率、成纤维细胞模型参数、缝隙连接电导等,观察其对心脏去极化、复极化和动作电位周期的影响。重要结论:在细胞水平上,耦合成纤维细胞使心室肌细胞的动作电位周期延长,主动张力峰值下降(见图4、5)。在组织水平上,成纤维细胞增殖降低兴奋波传导速度并引发传导阻滞(见图6),降低成纤维增殖区域的应变,延长组织的去极化和复极化(见图8),并维持折返(见图10)。     

滑膜中成纤维细胞样细胞与类风湿发病机理

类风湿关节炎(RA)的基本病理变化是滑膜炎、关节滑膜明显增生、充血、渗出、成为具有侵蚀性的肉芽组织,最终导致软骨和骨的破坏。RA病因不明,在对其发病机理的大量研究中,滑膜成纤维细胞样细胞占有较重要的地位。 正常关节滑膜内膜由1—3层细胞排列成,主要有:A型细胞,即巨噬细胞样细胞,来源于骨髓,占20—30％。B型细胞,即成纤维细胞样细胞,来源于局部间质细胞,占70—80％。对成纤维细胞样细胞即B型细胞的研究主要是     

茶多酚延缓皮肤光老化的药效学实验研究

目的:观察茶多酚对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠皮肤光老化程度的影响,探讨茶多酚延缓皮肤光老化作用。方法:用紫外线模拟日光照射建立小鼠皮肤光老化模型,给以茶多酚灌胃及外涂治疗,结束后测定皮肤中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD),以及皮肤中成纤维细胞数目和羟脯氨酸含量。结果:模型小鼠与正常小鼠比较,MDA含量升高而SOD活性下降,成纤维细胞数目和羟脯氨酸含量明显下降;茶多酚可明显提高光老化小鼠皮肤中SOD活性以及成纤维细胞数目和羟脯氨酸含量,并使皮肤MDA含量降低。结论:茶多酚具有延缓皮肤光老化作用。     

鸽Ⅰ型副粘病毒的毒价测定

鸽Ⅰ型副粘病毒(PPMV-Ⅰ)JS株的尿囊液毒,经10倍连续稀释后分别接种鸡成纤维细胞和非免疫鸡胚,测定其半数细胞培养感染量(TCID50)和鸡胚半数感染量(EID50).结果显示,JS株TCID50为10-9.33/0.1mL,EID50为10-9.375/0.1mL,表明JS株病毒对鸡胚和鸡胚成纤维细胞的易感性相近.     

鸽I型副粘病毒的毒价测定

鸽I型副粘病毒 (PPMV Ⅰ )JS株的尿囊液毒 ,经 1 0倍连续稀释后分别接种鸡成纤维细胞和非免疫鸡胚 ,测定其半数细胞培养感染量 (TCID50 )和鸡胚半数感染量 (EID50 )。结果显示 ,JS株TCID50 为 1 0 - 9.33/0 .1mL ,EID50 为 1 0 - 9.375/0 .1mL ,表明JS株病毒对鸡胚和鸡胚成纤维细胞的易感性相近。     

美国科学家揭示胚胎“原肠胚形成”阶段细胞的迁移动态

据东方网2008年12月14日援引《科技日报》消息，美国加州理工学院科学家借助双光子激发荧光显微技术，用绿色荧光蛋白对果蝇胚胎处于“原肠胚形成”阶段的细胞作了标记，并对1500多个细胞的迁移动态作了长达2个小时的实时追踪，用录像动态记录了细胞的移动路径。科学家同时观察到，动物体内由成纤维细胞生长因子（FGF）突变所引发的异常——基因突变细胞不能在通常的目的地停止运动，而是进行无目标的游荡。科研人员认为，他们以后可以对FGF信号的功能作出结论，为研究基因突变对胚胎发育的影响指明方向。     

鸽I型副粘病毒的毒价测定

鸽I型副粘病毒(PPMV-I)JS株的尿囊液毒，经10倍连续稀释后分别接种鸡成纤维细胞和非免疫鸡胚，测定其半数细胞培养感染量(TCID50)和鸡胚半数感染(EID50)。结果显示，JS株TCID50为10^-9.33／0．1mL，EID50为10^-9.375／0．1mL，表明JS株病毒对鸡胚和鸡胚成纤维细胞的易感性相近。     

黄芩苷片对缺血性大鼠脑组织中神经营养因子的影响

目的：观察黄芩苷片对缺血性大鼠不同时段脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）、脑组织神经生长因子（nervegrowth factor,NGF）含量的影响,探讨黄芩苷片抗脑缺血损伤的机制。方法：参照Longa法复制脑缺血模型,用黄芩苷片干预,ELISA法测定脑组织BDNF、bFGF、NGF含量。结果：脑缺血12h和24h,黄芩苷片组脑组织BDNF含量均降低、bFGF含量增加;脑缺血12h和24h,模型组脑组织神经营养因子NGF含量反应性增加。结论：黄芩苷片在对脑缺血损伤神经元的保护作用中,能促进星形胶质细胞等产生bFGF。     

疏松结缔组织撕片新探

探讨一种疏松结缔组织撕片的新方法，用这种方法制成的疏松结缔组织撕片，在光学显微镜下可清楚区分胶原纤维、弹性纤维、成纤维细胞、巨噬细胞、肥大细胞。     

猪耳皮肤组织冷藏后成纤维细胞的特性变化

目的:本试验旨在探究猪耳皮肤组织块在4℃冷藏条件下保存后,考察其成纤维细胞的细胞活力、细胞周期及细胞骨架等特性变化。方法:采集猪耳皮肤组织,分别冷藏保存2、4、7d后,进行成纤维细胞分离培养,同时设立新鲜组织块对照组,观察组织块原代细胞培养开始贴壁以及80%汇合的时间,再传至第3代,MTT检测各组细胞的活力,流式细胞仪检测细胞周期,免疫荧光染色检测细胞骨架的变化。结果:与对照组相比,各保存组成纤维细胞经组织原代培养后开始贴壁和80%汇合时间滞后,细胞形态都良好;保存7d的细胞活力与对照组相比显著性降低;保存4d和7d的G0/G1期细胞显著性增加,保存7d的S期细胞显著性降低;各组细胞具有良好的骨架系统,各给药组微管蛋白的荧光强度与对照组也无显著差异。结论:猪耳缘组织块在4℃保存后,经原代培养和继代培养,可获得具有正常增殖活力和细胞特性的成纤维细胞。     

shRNA转基因猪中miRNA通路饱和引起的早期致死性(英文)

研究目的:通过制备抗猪瘟病毒shRNA转基因猪,探索shRNA对猪胎儿成纤维细胞、克隆猪早期胚胎发育以及转基因猪的影响。创新要点:基于稳定表达shRNA的猪胎儿成纤维克隆细胞及shRNA转基因克隆猪制备的结果,发现shRNA对克隆猪早期囊胚发育阶段无明显毒性,并首次报道了在shRNA转基因动物中,shRNA引起体内miRNA通路过饱和及动物致死性等毒性。研究方法:实验构建了多种抗猪瘟病毒shRNA表达载体,转染猪胎儿成纤维细胞并筛选得到细胞克隆,结合体细胞核移植技术制备了shRNA转基因猪。使用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测了细胞及个体水平siRNA的表达量、干扰素反应相关基因、内源miRNA及通路因子的表达量,同时检测了shRNA克隆细胞囊胚率。重要结论:shRNA能有效抑制猪瘟病毒的复制。在猪胎儿成纤维细胞水平上,稳定表达shRNA能引起细胞内干扰素反应、miRNA通路过饱和等副作用;在克隆猪发育阶段,shRNA对克隆猪早期囊胚发育阶段无明显毒性;在shRNA转基因克隆猪个体水平上,shRNA引起克隆猪体内miRNA通路过饱和及克隆猪早期易致死等毒性。     

人心房成纤维细胞体外组织块贴壁培养与鉴定

从建立体外循环将进行心脏手术的风湿性心脏病患者体内无菌下取心脏停跳前右心耳组织,采用组织块贴壁法进行心房成纤维细胞的分离培养,通过光学显微镜观察培养后的细胞形态,并通过免疫细胞化学的方法鉴定所分离培养的细胞。贴壁4—6d后可见长梭形贴壁生长的细胞游离出组织块,细胞生长迅速,2—3d后即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,胞体较大,细胞浆透明,细胞核较大,呈椭圆形,无自发性搏动。免疫细胞化学检测显示所培养细胞波形蛋白呈阳性反应。通过组织块贴壁法顺利分离人心房成纤维细胞。     

利用胶原海绵膜构建人工真皮的研究

目的：探讨利用胶原海绵膜构建人工真皮的可行性．方法：从大鼠鼠尾肌腱中提取胶原．胶原和6-硫酸软骨素冷冻干燥，重度脱水及戊二醛交联后制得胶原海绵膜．将其行扫描电镜观察；并埋藏在Balb／c小鼠皮下，术后定期取出观察组织学变化．将成纤维细胞种植于该支架上．结果：构建的支架孔径均匀，孔径在50～100um．具有良好的组织相容性，并逐渐降解．成纤维细胞于其上生长良好．结论：该支架适合成纤维细胞生长，可作为组织工程皮肤的支架．