世界首例转基因水牛在广西诞生

2010年12月19日凌晨4时15分,世界首例转基因克隆水牛在广西大学科研基地金光乳业水牛场诞生。此例转基因克隆水牛为雄性双犊,一头体重为20．5公斤,正常存活;另外一头体重14公斤,不幸死亡。在紫外灯照射下,转基因克隆水牛头部和四肢明显表达绿色荧光蛋白标记基因。     

过表达TIPE2上调BID分子促进H446细胞凋亡

目的观察TIPE2过表达对小细胞肺癌H446细胞凋亡相关分子BID的影响。方法建立TIPE2过表达的H446小细胞肺癌细胞株,利用荧光显微成像技术和Western Blot技术分别检测TIPE2过表达情况和细胞凋亡相关分子BID的变化。结果 TIPE2质粒稳转H446细胞高表达TIPE2基因和绿色荧光蛋白。TIPE2过表达的H446细胞促凋亡分子BID表达增多,显微镜观察细胞凋亡明显。结论过表达TIPE2基因引起BID上调,并促进小细胞肺癌H446凋亡。     

MPG1基因驱动GFP基因在大丽轮枝菌中表达

为了探讨以MPG1基因作为启动子能否驱动GFP基因在大丽轮枝菌中表达,采用根癌农杆菌介导的真菌遗传转化方法,将含有MPG1-eGFP表达盒的pHMG载体转化入棉花大丽轮枝菌T-9中。经抗生素筛选后转化子约80个/106孢子,荧光显微镜观察转化子菌株孢子和菌丝在荧光显微镜下均发出绿色荧光,基因组DNA-PCR检测、GFP蛋白westernblot检测表明,GFP蛋白在大丽轮枝菌转化子中成功表达。结果表明,MPG1基因作为启动子成功驱动GFP基因在大丽轮枝菌中转录表达。     

绿色荧光蛋白在现代生物学研究中的应用

绿色荧光蛋白(GFP)是源于海洋生物多管水母体内的一种发光蛋白,这种蛋白结构很特殊,在蓝光或紫外光激发下可以发射绿色荧光。适合用作普通的报告标记,尤其适合于活体细胞或组织。GFP基因能在活细胞内稳定表达,被广泛应用于现代生物学的各个领域。     

转Bt基因大米对人类健康可能存在安全隐患

2009年11月27日,农业部批准了两种转苏云金芽孢杆菌（Bt）融合型杀虫蛋白Cry1Ac／Cry1Ab基因的抗虫水稻,“华恢1号”和“Bt汕优63”的安全证书。而早在2005年就有报道称,我国就有转Bt基因水稻种子的销售与种植,并在我国原料生产的亨氏婴儿米粉中检测出了Bt基因的成分。     

大学学报

转cry3A基因马铃薯外源蛋白表达和对马铃薯甲虫抗性分析 The Analysis of Expression of cry3A Gene and Resistance to Colorado Potato Beetle in Transgenic Potato Lines     

五种重组人源IL-18突变子表达质粒的构建及其在BxPC-3细胞中的表达

目的:设计获得5段hIL-18异构体,定向插入pEGFP-C1质粒形成融合基因,转染胰腺癌Bx-PC-3细胞并表达,为进一步研究改建的hIL-18蛋白功能奠定实验基础.方法:设计引物从pGEM-T-hIL-18质粒中PCR扩增得到5段不同的hIL-18片段,分别连接入pEGFP-C1载体构建不同的突变子(Mu0、Mu1、Mu2、Mu3和Mu4),转染原位胰腺癌BxPC-3细胞,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR法检测转染细胞中hIL-18表达水平.结果:(1)五种重组质粒经酶切与测序证实构建成功;(2)BxPC-3细胞转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达.结论:(1)成功构建了hIL-18五种异构体的绿色荧光蛋白表达载体;(2)改建的hIL-18蛋白可与绿色荧光蛋白在BxPC-3细胞融合表达.     

增强型绿色荧光蛋白在莱茵衣藻中的高效表达

莱茵衣藻素有"光合酵母"之称,是目前少数三套基因组均能进行遗传转化的生物.但由于莱茵衣藻细胞中存在复杂的表达调控体系、密码子偏爱等原因,莱茵衣藻的外源基因表达体系目前还处于探索阶段.通过构建两个莱茵衣藻外源基因表达载体,即以RBCS2序列为启动子的p105和以HSP70A RBCS2序列为启动子的pH105,分别将增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)插入两个表达载体中,得到p105G124和pH105G124转化载体.然后通过"珠磨法"转化细胞壁缺陷的莱茵衣藻cc-849,并得到两种类别的转基因藻Tran-Ⅰ和Tran-Ⅱ.在光诱导和热激诱导条件下,两种类型的转基因藻均能稳定表达绿色荧光蛋白.通过实验比较二者的转化效率和蛋白表达水平,结果显示pH105可使egfp基因的转化效率提高8倍;HSP70A-RBCS2启动子至少使绿色荧光蛋白的表达水平提高了2倍,40℃热激后绿色荧光蛋白的表达量再提高约3倍.以上结果表明获得的pH105是一个高效、可诱导的莱茵衣藻外源基因表达载体,这为利用莱茵衣藻高效表达外源基因和开发生物反应器奠定基础.     

上海生科院合作研究揭示复苏植物旋蒴苣苔的耐旱机理

<正>中科院上海生命科学院朱健康与其合作者通过测序获得了1.69 Gb的基因组草图,这是人们首次测序极端耐脱水的植物。基因组分析显示了进化过程中的两次全基因组加倍痕迹,也显示了大量的特有基因。该基因组含有49 374个蛋白编码基因,其中29.15%是旋蒴苣苔独有的基因,20%的基因在转     

增强型绿色荧光蛋白在莱茵衣藻中的高效表达

莱茵衣藻素有“光合酵母”之称，是目前少数三套基因组均能进行遗传转化的生物。但由于莱茵衣藻细胞中存在复杂的表达调控体系、密码子偏爱等原因，莱茵衣藻的外源基因表达体系目前还处于探索阶段。通过构建两个莱茵衣藻外源基因表达载体，即以RBCS2序列为启动子的p105和以HSP70A-RBCS2序列为启动子的pHl05，分别将增强型绿色荧光蛋白基因（egfp）插入两个表达载体中，得到p105G124和pH105G124转化载体。然后通过“珠磨法”转化细胞壁缺陷的莱茵衣藻CC-849，并得到两种类别的转基因藻TranⅠ和TranⅡ。在光诱导和热激诱导条件下，两种类型的转基因藻均能稳定表达绿色荧光蛋白。通过实验比较二者的转化效率和蛋白表达水平，结果显示pH105可使eg和基因的转化效率提高8倍；HSP70A-RBCS2启动子至少使绿色荧光蛋白的表达水平提高了2倍，40℃热激后绿色荧光蛋白的表达量再提高约3倍。以上结果表明获得的pH105是一个高效、可诱导的菜茵衣藻外源基因表达载体，这为利用莱茵衣藻高效表达外源基因和开发生物反应器奠定基础。     

高效抗虫转基因水稻的研究与开发

植物转基因技术为培育高效抗虫水稻新品种开辟了新的途径。豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因是一种广谱抗虫基因 ,该成果采用最新研究策略 ,对该基因进行体外修饰 ,使其转译产物最终定位于细胞的内质网中 ,以增加外源抗虫物质的稳定性。实验证明 ,转修饰cpti基因的植物无论是抗虫蛋白含量还是抗虫能力均比转野生型cpti基因植物有显著的提高。已获大量转基因水稻株系 ,包括著名水稻恢复系明恢 81和明恢 86,并用其配制了杂交组合。转基因抗虫杂交水稻已获国家有关部门批准进行中间试验和环境释放 ,大田试验结果表明 ,转基因杂交水稻具有优良的抗虫特性和广阔的应用前景。     

转基因克隆猪：许人类一个未来？

前不久,由中科院广州生物医药与健康研究院成功培育出的8头特殊转基因克隆猪开始“生儿育女”。这种克隆猪在特定波长的激发光下可分别发出红、黄、绿、青4种荧光,这是国际上首次获得能同时表达四种荧光蛋白的转基因克隆猪。专家表示,这使其在疾病模型、器官移植、生物反应器等领域的应用前景更为广阔。然而,这种技术会改写未来的生物进化史吗？它会存在什么样的风险？     

科技杂志要览

<正>蚕豆萎蔫病毒2号VP37蛋白在BY-2细胞内的定位 Localization of Broad bean wilt virus 2 VP37 protein in BY-2 suspension cells 摘要将绿色荧光蛋白(GFP)连接于蚕豆萎蔫病毒2号(Broad bean wilt virus2,BBWV-2)VP37蛋白的N-端,构建融合基因GFP-VP37,用农杆菌法在BY-2悬浮细胞内进行表达,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的分布.结果显示:     

“转基因”与“人兽胚胎”是对还是错

媒体和公众,一直关注“转基因”和“人兽胚胎”。我想加入讨论。 我非“利益攸关方”．这使我能尽量做到客观公平、学术端正。 “转基因”不见得不安全 转基因是一项生物技术,原理不复杂（做起来很麻烦）,就是把想要的基因,从别的生物基因组切下,设法插入另一生物的基因组中。例如,从一种水母基因组中,用酶切下绿色荧光蛋白基因,设法将它们插入其他动植物基因组中,这样繁殖出来的转基因后代,在紫外线下会发出绿色荧光。     

商陆寡肽转运蛋白基因PaOPT的cDNA全序列克隆及表达分析

从垂序商陆(Phytolacca americana)的重金属镉胁迫下商陆幼苗叶片的正反向抑制性消减杂交文库(SSH文库)中,获得商陆寡肽转运蛋白基因的EST序列.利用RACE的方法克隆到该基因的全序列cDNA(PaOPT,GenBank注册HQ647015).PaOPT基因在进化中的地位分析表明:它可能属于OPT3基因家族.利用实时荧光定量PCR的方法,分析PaOPT的组织表达特异性以及商陆种子成熟及萌发过程的表达模式.结果表明,该基因是一个在种子中特异性表达的基因,预测它对植物的生长发育有着重要的作用.     

农杆菌介导ThNHX1基因转化烟草的研究

实验中,试图以烟草叶片为转化受体,采用根癌农杆菌介导法,将盐芥Na+/H+逆向转运蛋白基因(ThNHX1)转入烟草,获得去除卡那霉素抗性基因,仅含有转ThNHX1耐盐基因的烟草苗,并对影响遗传转化的一些关键因素进行了研究。结果表明,对6株转基因植株进行了PCR分子检测,从凝胶照片中可以看到,转基因烟草株系中有一棵烟草苗的卡那霉素抗性基因条带已不存在,但ThNHX1耐盐基因仍然存在,结果表明该苗即为仅含有转移ThNHX1耐盐基因的烟草苗。     

商陆扩展蛋白基因PaEXP1在逆境胁迫下的表达

利用同源克隆的方法,从商陆中克隆得到扩展蛋白基因的全长cDNA序列,命名为PaEXP1(GenBank 登录号为GQ851947).PaEXP1长1128bp,含有759bp的完整开放阅读框,编码252个氨基酸,分子量27.1kD,等电点8.55.PaEXP1氨基酸序列N端含有8个半胱氨酸残基,1个组氨酸(His-Phe-Asp,HFD)域,C末端存在4个保守的色氨酸残基,具有扩展蛋白的典型结构.系统进化树分析表明,PaEXP1属于扩展蛋白的α-扩展蛋白家族.Real time-PCR结果表明,PaEXP1主要在根中表达,低温、盐、重金属和渗透胁迫均强烈地抑制其基因的表达.酵母转化实验表明,转PaEXP1可以提高酵母的平均直径,说明PaEXP1参与细胞壁的松弛扩展和细胞的增大过程.     

细菌和人“对话”

<正>你想跟细菌对话吗?我们或许不久就可以跟细菌"对话"了。通过把光波转化成语言,西班牙生物学家已经开发出一项细菌和人"对话"的技术。眼下,细菌们"告诉"研究人员,它们生活的环境很舒适哩。研究人员通过对埃希氏杆菌的基因进行改造,使之生产出会发各种颜色光波的荧光蛋白。荧光蛋白会根据不同的条件,如温度、酸碱度和含氧水平的变化,发出各种颜色的光波(比如,当细菌感到太热时,就发出红光)。然后,研究人员通过电脑把细菌的光波转化为对应的人工语言。     

三唑磷对斑马鱼miR-99及其预测靶标ckmt2的表达的影响

在农药三唑磷作用下,miRNA的表达发生改变;并通过与靶基因的配对,从而调控基因的表达.本文采用荧光定量PCR和Western blot等方法对miR-99及其潜在靶基因ckmt2的表达变化进行了研究.结果表明,三唑磷处理后miR-99表达是对照的0.062倍,助剂处理是对照的0.414倍,表达下调;三唑磷处理后ckmt2基因是其对照的0.91倍,助剂处理是其对照的0.89倍,在mRNA水平变化不显著.三唑磷及助剂处理后,斑马鱼的总蛋白含量减少,CKMT2蛋白含量增加,采用独立样本检验方法分析结果表明,处理前后的CKMT2蛋白质含量差异显著.综上所述,在三唑磷作用下,斑马鱼miR-99对潜在靶标基因ckmt2的表达可能存在抑制作用,miR-99表达的降低致使对ckmt2表达抑制的作用减弱,从而提高ckmt2的表达.     

水产饲料蛋白源研发与低碳养殖

水体所表现出的富营养变化,实际上就是水产养殖期间所呈现出的环境污染问题。本篇文章主要针对水体富营养化现象的具体原因进行了探讨,进而提出了更高效的蛋白源开发,进而构建起更加低碳的水产养殖模式。