密度梯度离心技术的探讨

超离心技术是分离纯化生物大分子及亚细胞成份的最有用技术之一,而密度梯度离心法则是其中较为复杂的一种方法,它可以同时使样品中几个或全部组份分离,具有很好的分辨力．文中对采用密度梯度法进行分离纯化实验时,可能影响离心效果的几个因素进行了探讨     

蔗糖密度梯度离心提取满江红体内鱼腥藻方法的研究

为了从满江红体内分离到纯净度高的红萍鱼腥藻,在Hitachi55P－72超速离心机上试验了1．0～2．0M,1．0～2．5M和1．2～2．5M三种蔗糖连续密度梯度,7500rpm,15000rpm和20000rpm三种离心速度,30min和60min两种时间条件下红萍体内鱼腥藻粗提物的分带情况。结果表明用1．2～2．5M蔗糖密度梯度。15000rpm和60min的离心条件可取得最好的分带效果。用红萍体内单克隆抗体检验分离后的红萍体内查腥藻,证实它们与原红萍材料中的鱼腥藻同源。     

优化的蔗糖密度梯度离心法分离完整叶绿体

建立了一种简单、低成本的分离完整叶绿体的方法.以家用食品料理机破碎植物细胞,采用两层不连续蔗糖梯度和使用较低的离心速度等措施降低了实验成本和对设备的要求;通过采取措施防止叶绿体粗提物制备过程中叶绿体外被膜的破裂,以及在梯度制备和随后离心过程中由于颗粒扩散而导致的梯度不稳定,从而使方法具有很好的重复性.用该方法分离的完整叶绿体完整性很高(>90%),可以用于叶绿体细胞生物学、生物化学与分子生物学等多方面的研究.     

离心技术在高中生物学实验中的应用

离心技术是现代生物学技术中常用的一种方法,用于细胞、血清、蛋白质、核酸及细胞亚显微结构的分离、提纯或浓缩等,尤其是超速冷冻离心法已经成为各大分子生物学实验室研究人员最常用的技术方法。根据离心原理的不同,常见离心法为差速离心法、密度梯度区带离心法。     

DNA分子的结构形式

中学生物学教材涉及到DNA分子的两种结构形式，一种是线形双螺旋分子，一种是环形双螺旋分子。DNA作为生物体内的主要遗传物质，是整个遗传学的基石，其有多种结构形式：既有单链的，也有双链的；既有线状的，也有环状的；既有闭合环，也有缺口环；既有超螺旋型，也有松弛型，且各形式之间可以发生一定程度的转化。同一DNA分子的不同结构形式，由于其构象的不同，在利用氯化铯密度梯度离心时，其沉降速率有很大的差异，各自有不同的沉降常数；若利用琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳，同一DNA分子的不同形式，其迁移速率也有快慢之分。下面对常见的DNA分子形式及其转化作一介绍。     

用密度梯度离心法富集源于小鼠胚胎干细胞的运动神经元样细胞前体

目的:我们的目标是从源于胚胎体(EBs)的小鼠胚胎干细胞(mESCs)中分离运动神经元样细胞前体(MNLCPs),以用于发展针对运动神经元疾病的药物筛选试验和移植疗法.天然Shh蛋白(或Shh通路激动剂)和维甲酸诱导的胚胎体中,MNLCPs和未分化细胞的含量是不确定的.如果不把未分化的细胞从细胞培养中充分去除,其可能会干涉药物筛选试验或在移植后增生.我们开发了一种以密度梯度离心法为基础的富集MNLCPs的方法.方法:我们用Wichterle等人2008年改进的方法,将mESCs( HBG3:eGFP:HB9)扩大和分化.通过化学和酶学的无研磨处理,含有绿色荧光蛋白的MNLCPs和未分化细胞的胚胎体被小心轻轻地离解成单细胞.利用OptiprepTM8％～20％逐步梯度离心技术将MNLCPs回收.拥有绿色荧光蛋白的MNLCPs的含量由流式细胞仪检测.结果:我们的结果表明,在胚胎体形成前,mESCs在明胶包被的培养板上生长,其分化为MNLCPs的能力减少.比较mESCs在明胶,明胶与PMEFs,及PMEFs包被的培养板上的生长发现,mESCs在PMEFs包被的培养板上产生含绿色荧光蛋白的MNLCPs的得率为(54.1±11.0)％(x-±s;n=12),在明胶包被的培养板上的得率为(2.8±1.1)％(x-±s;n=9).用密度梯度离心法获得的含绿色荧光蛋白的MNLCPs的平均含量为(87.7±5.5)％(x-±s;n=3).结论:我们的数据表明,不使用细胞分选器,无研磨解离和密度梯度离心法也能用于富集具有高存活率的MNLCPs.有必要对MNLCPs在体外、体内和表型上进行进一步的生理学意义(如神经轴突的生长及形成神经肌肉接头的能力)上的鉴定.     

离心干化技术在污泥处理中的应用

在炼化企业追求"安全发展、清洁发展、节约发展"的新形势下,应用离心干化组合工艺处理炼油厂产生的"三泥",可以实现污泥的"减量化、资源化".本文通过介绍哈尔滨石化公司离心干化技术处理污泥的应用情况,定量评价其技术应用的实际效果,总结应用过程中存在的环境问题及对策,适用于炼油行业污水处理场产生的"三泥"处理,同时对其它生物法废水处理产生的污泥实现"减量化"具有一定的借鉴意义,具有较好的应用前景.     

离心技术的专题复习

离心技术是进行生物学研究的一项重要技术手段,在高中生物新课程教材中增添了不少这方面的内容,体现了"提高生物学素养"倡导探究性学习"两个重要的新课程理念。本文试图通过一组典型例题,归纳离心技术的一些重点知识,为高考专题复习提供方便。     

实验室离心技术与仪器维护

为了建立实验室离心机规范操作与维护的技术保障体系,探索正确选择各类离心技术与离心转头及附件的相互关系;分析了RCF、RPM、S值、K-值等常用离心参数的运用条件与计算方法,功能配置评估离心转头、适配器与离心容器的合理性,根据离心容器材质的理化耐受性合理选用和进行预处理,制定基于风险控制的操作、监测、维护、保养、生物安全等技术保障路径。坚持从实验应用到工程维护的全技术流程管理,实行离心机使用维护的全技术路径规范管理,有效保障了实验室离心机的正常使用。     

离心淘洗技术在研究白色念珠菌中的应用

离心淘洗技术是根据样品不同的密度实现样品分离。此技术能够分离不同种类的细胞,甚至是不同时相的细胞。利用野生型(SC5314)白色念珠菌以及具有假菌丝表型的突变体(cla4Δ和grr1Δ)为样品,经过超声波预处理和离心淘洗收集不同的流速组分,经后续培养和血清诱导,证实离心淘洗技术能够分离得到G1期白色念珠菌细胞,从而实现同步化。     

变频调速技术在电站离心风机上的应用效果分析

分析了变速调节的节能原理和几种变速调节装置的特点,指出了变频调速技术的优点,并通过实例分析,说明了变频调速技术的节能效果.     

同层均匀物体的引力势

计算了密度同层均匀分布的球体和无限长圆柱体的引力势分布。     

运用宏程序车削旋转椭圆

本文以数控车床上加工旋转椭圆为例,分析旋转椭圆的基本思路、方法和技巧。关键解决椭圆旋转一定角度后以长半轴和短半轴为坐标轴建立的坐标系中,起点和终点坐标值,以及离心角的计算。主要介绍了数控车床中运用宏程序加工旋转椭圆的几种方法。     

水流量标准实验装置变频调速系统设计

针对多台离心式水泵作为动力源的水流量标准实验装置,利用变频调速技术,设计一套具有显著节能效果的多变频调速系统,保证离心泵工作在高效区,实现转速调节,克服流量调节阀的节流损失。解决了高位水塔供水产生水塔溢流造成的严重能量浪费。水流量标准实验装置供水系统也进行了技术改造。运行结果表明,各项性能指标达到预期的目的。     

同层均匀物体的引力势

计算了密度同层均匀分布的球体和无限长圆柱体的引力势分布     

细胞分离纯化技术研究进展

对细胞进行分离纯化的目的是为了获得较高纯度和活力的细胞以便用于实验研究或临床移植。分离纯化细胞的方法很多,通过对细胞表面标记可以用吸附、荧光活化细胞拣选、磁活化细胞分选等技术分离细胞;也可应用无表面标记的方法,如离心、离心淘洗、自由流细胞电泳等技术来纯化细胞。本文就目前这些分离纯化细胞的方法作一介绍。     

离心 SHS 陶瓷内衬复合钢管性能的研究

针对 Al Fe2 O3燃烧体系,选取纳米 SiO2、Na2B4O7为添加剂,采用离心自蔓延高温合成技术制备出陶瓷内衬复合钢管。在 Na2B4O7质量分数为4％的条件下,研究了纳米 SiO2对陶瓷内衬复合钢管致密度以及耐腐蚀性能的影响。结果表明：当纳米 SiO2添加量为6％时,复合钢管陶瓷层致密度最好,当纳米 SiO2添加量为4％时,耐腐蚀性最好。     

GWZL-1300型高效卧式振动离心脱水机

介绍了GWZL-1300型高效卧式振动离心脱水机的结构和工作原理。使用一台GWZL-1300型高效卧式振动离心脱水机可替代两台WZL-1000型卧式振动离心脱水机。     

向心结构、离心结构与组合式、连系式的对比研究

本文从《语言论》和《语法哲学》两本语言学巨著出发,分别对书中相应的两组概念向心结构、离心结构和组合式、连系式进行简短介绍并分析,之后进行对比研究,探索它们之间的联系与区别。本文认为,在本质上不同的两组概念,向心结构、离心结构与组合式、连系式,前者是对整体结构与内部成分之间的关系进行的描写,后者描述短语中不同内部成分之间的关系,它们之间是存在联系的。     

用磁性画写板做物理实验的新设计

介绍用磁性画写板做的几个物理实验.材料易得、制作简单,效果显著,可加深学生对物理知识的理解.