大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶与tRNALeu的相互作用头孢菌素酰化酶的表达、翻译后加工和亚基重组

第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1 和tRNALeu2 ,研究tRNA与亮氨酰 tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高 1 0倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入 40个氨基酸残基的变种LeuRS A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNA Leu1 和tRNA Leu2 接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS A识别的关键.　　第二部分:在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因 1 0倍以上.研究了它的α 亚基的N 端变化(LAEP →MGIP )对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N 端亲和水解的酰化酶     

大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶与tRNALeu的相互作用头孢菌素酰化酶的表达、翻译后加工和亚基重组

第一部分为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1和tRNALeu2,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNA Leu1和tRNALeu2接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS-A识别的关键.第二部分在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因10倍以上.研究了它的α-亚基的N-端变化(LAEP…→MGIP…)对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N-端亲和水解的酰化酶.     

发现原核生物中亮氨酰-tRNA合成酶依赖tRNA的转移前编校

上海生科院生化与细胞所下恩多研究组继2000年和2009年证明了亮氨酰-tRNA合成酶（LeuRS）具有转移后和不依赖tRNA转移前的编校功能后,最近该研究组的谭敏、朱斌和周小龙．利用点突变和新开发的LeuRS的小分子抑制剂AN2690,     

超嗜热菌Aquifex aeolicus 亮氨酰-tRNA 合成酶和tRNALeu的相互作用（英文）

超嗜热菌Aquifex aeolicus 亮氨酰-tRNA 合成酶(αβ-LeuRS) 是已知的唯一的双肽链LeuRS。通过αβ-LeuRS和大肠杆菌LeuRS相应肽段的重组和重组酶性质的研究发现，αβ-LeuRS的α亚基C末端36个氨基酸对于αβ-LeuRS的氨基酰化活力至关重要。αβ-LeuRS的两个亚基人为融合得到的单亚基酶SLeuRS-αβ，具有完全的野生型双亚基酶活力，其热稳定性显著增强。同时，通过亚基重组揭示了LeuRS 对于不同种属的tRNALeu的识别元件位于α亚基内，而其中的CP1 结构域不仅是LeuRS 行使编校功能的结构基础，对于LeuRS识别不同种属来源的tRNALeu 也是十分重要的。通过不同来源的LeuRS一级结构比较，克隆了单独的CP1结构域组成的肽(CP1),发现唯有A. aeolicus　αβ-LeuRS 的CP1对错误的氨基酰化产物具有体外编校功能。它与其它3种来源于细菌LeuRS的CP1都能够编校误氨基酰化的古老形式的亮氨酸小螺旋 (minihelixLeu)。通过同源序列比较发现，在αβ-LeuRS的CP1内存在一个由20个氨基酸组成的特异的结构模体，它对CP1发挥体外编校功能必不可少，引入原本不具有体外编校功能的E. coli的CP1 后则可使其获得编校功能，但是该模体不影响全酶的编校功能。αβ-LeuRS中与tRNA结合有关的亚基－β亚基也可以赋予E. coli CP1编校功能。这些研究结果充分表明，来源于古老的超嗜热菌A. aeolicus 的αβ-LeuRS 保留了进化的遗迹－具有编校活力的CP1和与其编校功能密切相关的由20个氨基酸组成的特异的结构模体，它们在进化过程中随着其它结构域招募进合成酶中而逐渐失去了对全酶编校功能的作用。这一发现有力地支持了aaRS通过纳入新的结构域以加速进化过程的理论，并且也从不同角度为aaRS/tRNA共进化理论提供了可靠的依据。     

T超嗜热菌Aquifex aeolicus亮氨酰-tRNA合成酶和tRNA~(Leu)的相互作用(英文)

超嗜热菌Aquifexaeolicus亮氨酰-tRNA合成酶(αβ-LeuRS)是已知的唯一的双肽链LeuRS.通过αβ-LeuRS和大肠杆菌LeuRS相应肽段的重组和重组酶性质的研究发现,αβ-LeuRS的α亚基C末端36个氨基酸对于αβ-LeuRS的氨基酰化活力至关重要.αβ-LeuRS的两个亚基人为融合得到的单亚基酶SLeuRS-αβ,具有完全的野生型双亚基酶活力,其热稳定性显著增强.同时,通过亚基重组揭示了LeuRS对于不同种属的tRNALeu的识别元件位于α亚基内,而其中的CP1结构域不仅是LeuRS行使编校功能的结构基础,对于LeuRS识别不同种属来源的tRNALeu也是十分重要的.通过不同来源的LeuRS一级结构比较,克隆了单独的CP1结构域组成的肽(CP1),发现唯有A.aeolicusαβ-LeuRS的CP1对错误的氨基酰化产物具有体外编校功能.它与其他3种来源于细菌LeuRS的CP1都能够编校误氨基酰化的古老形式的亮氨酸小螺旋(minihelixLeu).通过同源序列比较发现,在αβ-LeuRS的CP1内存在一个由20个氨基酸组成的特异的结构模体,它对CP1发挥体外编校功能必不可少,引入原本不具有体外编校功能的E.coli的CP1后则可使其获得编校功能,但是该模体不影响全酶的编校功能.αβ-LeuRS中与tRNA结合有关的亚基——β亚基也可以赋予E.coliCP1编校功能.这些研究结果充分表明,来源于古老的超嗜热菌A.aeolicus的αβ-LeuRS保留了进化的遗迹——具有编校活力的CP1和与其编校功能密切相关的由20个氨基酸组成的特异的结构模体,它们在进化过程中随着其他结构域招募进合成酶中而逐渐失去了对全酶编校功能的作用.这一发现有力地支持了aaRS通过纳入新的结构域以加速进化过程的理论,并且也从不同角度为aaRS/tRNA共进化理论提供了可靠的依据.     

D-谷胱甘肽及其同分异构体稳定的水相碲化镉量子点制备及其荧光性质的研究

使用5-D-谷氨酰-D-半胱氨酰甘氨酸(D-谷胱甘肽)及其同分异构体1-L-谷氨酰-D-半胱氨酰甘氨酸作为稳定剂,在水溶液中合成了碲化镉(CdTe)量子点.通过控制反应回流时间,研究了在不同的反应时间内由2种同分异构体稳定的CdTe量子点的紫外光谱,发现分子结构的细微差别能够引起量子点的表面状态不同,进而导致制备的量子点荧光性质不同.通过荧光光谱研究了2种分子稳定CdTe纳米粒子荧光性质的差异,并结合紫外-可见光谱,讨论了引起2种CdTe量子点荧光性质不同的原因.     

扩充遗传密码进化的重演还是未来的预演?

文章介绍了一种直接在活体细胞内掺入非天然氨基酸到蛋白质中的新方法。遗传编码非天然氨基酸有效地扩充了现存生物体通用的遗传密码。这对遗传密码的进化、蛋白质的结构、功能与应用、以及与蛋白质相关的生命过程等方面的研究提供了新的思路与方法。     

2-(2-叔丁氧基碳酰氨唑-4-基)-2-戊烯酸的合成

目的:合成头孢卡品酯中间体2-(2-叔丁氧基碳酰氨唑-4-基)-2-戊烯酸(a)。方法:首先,以4-氯乙酰乙酸乙酯为原料,与硫脲反应成环,然后加(BOC)2O保护氨基,然后与丙醛在-60～-50℃反应,再加入碱解成酸,加五氯化磷成酰氯。结果:合成化合物a的总收率为59%。结论:本合成工艺提高了收率,并且操作工艺简单易行,适合工业化生产。     

美发明固氮制氨新方法

美国康奈尔大学研究人员发现了一种能将氢和氮合成为氨的新方法。将氢和氮合成为氨是化工生产中的一项最重要的化学反应,因此,这项研究成果将改进已具有90年悠久历史的传统生产工艺。该研究成果发表在英国《自然》杂志上。制备氨是制造氮肥的基础工艺,其用途十分广泛。康奈尔大学的研究人员奇里克及其同事,以金属锆的化合物为催化剂,在适合的生产条件下,将氢和氮合成为氨。奇里克等人发现的这种新方法具有极为重要的实用价值,它揭示出了氮与氮之间的结合键是如何被打破的,并能在正常条件下使氮与氢相结合。目前,工业上制备氨的传统方法主要…     

神经元轴突发育新成果

人和动物肢体运动的控制离不开脊髓运动神经元的参与,但是目前对于脊髓运动神经元发育的分子机制并未完全了解。上海生科院神经科学所周嘉伟研究组研究发现．蛋白翻译合成过程所需的氨基酰tRNA合成酶复合物的一个辅助因子MSC p43在脊髓运动神经元轴突发育过程中发挥了关键作用。     

Conceptualising the heterogeneity of research-based spin-offs: A multi-dimensional taxonomy

Research-based spin-offs (RBSOs) have become an important aspect of the technology transfer process. Emanating from what is conventionally a non-commercial environment, RBSOs pose major challenges if they are to realise their potential to meet the objectives of their founders and the parent research organisations (PROs) from which they emerge. An important issue is to understand the heterogeneity of RBSOs. This paper reviews the literature on RBSO typologies to develop a taxonomy of RBSOs. We identify common themes in relation to these typologies in relation to (1) spin-off creation and (2) spin-off development. The dimensions that differentiate between firms are the type of resources, the business model and the institutional link. We identify gaps in current typologies in order to propose avenues for future conceptual and empirical research.     

多元范式:情报学研究的第三范式

多元范式被称为情报学研究领域的第三种研究范式,在情报学研究领域正在被越来越多的研究者所接受并使用.对多元范式的内涵、历史、整合方式、作用、步骤及优缺点进行分析归纳,预测多元范式在情报学研究中的发展趋势,可以更好地理解和把握多元范式的理论和使用方法,对多元范式在我国情报学研究中的实施与应用具有重要参考价值.     

领先用户研究:概念,测量与影响因素

研究领先用户,可以了解未来市场发展趋势和捕捉用户需求变化,开发更具市场潜力的新产品或服务等,并增加企业新产品或服务的竞争优势。但相关研究尚未成熟,且国内研究十分缺乏。基于相关外文数据库对领先用户理论研究的重要成果进行了梳理,深入分析了领先用户的概念、量表与测量和影响因素等。研究发现：（1）领先用户是指在特定领域处于重要市场前沿地位（领先市场趋势）,并期望从满足需求的解方案中获得高收益（高期望收益）的用户;（2）量表包括领先市场趋势和高期望收益两个基本维度;（3）影响因素由领域相关变量、领域独立变量和动机构成。最后,对未来研究方向进行了展望,以期为国内学者进一步研究领先用户及企业与领先用户合作进行新产品开发提供参考。     

项目网络研究的理论体系构建与未来展望

由于对项目组织结构和关系研究的定量化、集成正式关系和非正式关系于一体、跨项目组织、社会网络和边界跨越等多学科的特点,从网络的视角研究项目组织和行为正成为组织理论的一门新学科。首次引入项目网络这一新概念,并对项目网络的内涵进行阐释。在对前人研究成果分析的基础上,提出以理论基础、研究方法和研究内容为核心的理论研究框架。其中,研究内容分为两大主题:项目网络本体论和项目网络作用机理。最后,对项目网络的未来研究进行展望,指出今后项目网络研究的发展方向。     

中国民间智库的研究产出：特征及意义

民间智库在推动科学决策方面发挥重要作用,但其研究产出的专业性一直存在争议;有必要对其研究产出的现状、特征、意义进行分析,以提升民间智库的决策服务水平。利用Python爬虫技术,从中国知网平台爬取58家民间智库的公开发表文章信息,对所得14870篇文献进行计量分析;选择综合影响力相当的民间智库和高校智库各10家,获取文章信息6951篇、7381篇,以高校智库为参照系更好地理解民间智库发表文章状况。研究发现,公开发表文章是民间智库长远发展的基础,保障其在学术、社会、政策影响力之间保持合适的张力。民间智库的研究产出产量大而且丰富;其研究模式偏向知识生产模式2,研究产出的专业性不完全取决于学术影响力;公开发表文章之外的大量研究产出,需要有更适合的第三方评价体系进行评价。     

An investigation into turn-away among information technology professionals in Brazil

Two important problems have been observed fairly frequently among information technology (IT) professionals, namely turn-over – where the IT professional moves to another company but still remains in the IT sector – and turn-away, in which the IT professional abandons the area in order to occupy a position in a different area, either in the same company or in another, sometimes assuming a managerial function. Few research papers were found with respect to the latter phenomenon. Based on that, the main thrust of this work is to understand how and why IT professionals in Brazil abandon their area, identifying typical characteristics in their career transition. Thus, from a literature review about career development and the analysis of the data collected, eight research hypotheses were developed in order to be analyzed by the researchers. A multiple case study method with several units of analysis was applied in two large companies in Brazil. In-depth interviews were conducted with IT professionals who had migrated to other areas within their organizations, they being considered the unit of analysis. The results accrued from this research reveal that IT professionals in Brazil need to have more growth opportunities than either their companies have been able to offer them or it is possible to offer within the technical arena.     

Technological learning and entrepreneurial behaviour: A taxonomy of the chemical industry in Venezuela

This paper presents a taxonomy of entrepreneurial behaviour vis-à-vis technology, derived from empirical research on a specific sector, that of the chemicals industry in Venezuela. The research focuses heavily on the accumulation of minor innovations through which enterprises acquire their technical knowledge and know how, their technological learning. We have tried to give a precise empirical meaning to that notion in order to understand which are the most important variables that affect the technical learning process. Both the process of technological learning and the technical external linkages — in particular with foreign firms — of Venezuelan companies seem to be the fundamental factors in understanding the development of a new competitive industry which adopts a new products-oriented strategy. But not all firms do respond to such a scheme and it is thus necessary to develop a taxonomy of the industrial sector both for scholarly reasons as well as a policy guide.     

科研合作网络特征与团队知识创造关系研究

知识是21世纪最重要的资源,如何创造新知识成为一个关键问题,受到普遍关注。本文从社会网络结构特征的视角出发,对科研合作网络与知识创造绩效的关系展开了分析。为了验证我们的假设,本文选取了管理学领域的24个科研合作团队,收集了他们在6年时间发表的1494篇论文,并通过识别888个作者的合作关系建立合作网络模型。数据结果表明,合作网络的结构特征对团队知识创造绩效产生不同的影响:(1)合作网的派系数量与知识创造绩效呈正相关关系;(2)最大子图比例以及合作网络密度与其呈负相关关系;(3)中心性则与其无关。最后,本文从合作结构的角度提出了提高科研团队绩效的思路。