His-猪生长激素融合基因在大肠杆菌中的表达与纯化

将通过PCR技术改建并去除了信号肽的猪生长激素cDNA克隆入大肠杆菌表达载体pET-28a( ),构建出能利用Ni-NTAAgarose柱一步纯化表达产物的重组质粒pPGH020。探讨了大肠杆菌中重组猪生长激素的最佳表达条件和纯化方法,制备并纯化了兔抗pGH抗体。SDS鄄PAGE和Westernblot的分析结果表明,26.5kD处有包括His·Taq、thrombin位点序列和pGH序列的融合蛋白特异条带。凝胶扫描估测猪生长激素的表达量占大肠杆菌胞浆蛋白的17.3%左右。     

分泌型重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的裂解纯化

重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）大肠杆菌分泌型表达产物即目的蛋白存在于细胞间质当中。裂解和纯化方法简便,菌体经冻融、裂解、硫酸铵沉淀、柱层析等步骤得到高活性的产品。实验终产物纯度97%,工艺质量稳定。     

Asia Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因C末端在大肠杆菌中的表达与纯化

本试验用VP1基因C末端与表达载体连接,转化到大肠杆菌中,经IPTG诱导表达,收集不同时间段的菌液进行SDS-PAGE,结果表明重组的VP1基因C末端蛋白在大肠杆菌中能高效表达,表达的目的蛋白分子量约为16kd,而且重组菌诱导裂解物可在16kd处看到一条特异的蛋白条带,与预期大小一致,阴性对照未出现表达条带,而且重组菌在IPTG终浓度为1mmoL/L诱导6 h时表达量最大。表达产物主要以包涵体的形式存在,提取和裂解包涵体后,进一步纯化表达的目的蛋白,可获得纯度达70%以上的目的蛋白。     

重组人表皮生长因子的分离与纯化的研究

本实验采用凝胶法来纯化人表皮生长因子,并定量测定了人表皮生长因子(hEGF)。人表皮生长因子与经过离子交换柱、SDSPAGE及凝胶图象扫描分析系统的标准品相互对比。结果表明,在SDS-PAGE凝胶上能够得到与标准样品hEGF一样清晰的单条带,得到的产品纯度可高于94%,检出限能够达到1ug/mL。本实验方法能够很好的在线检测出人表皮生长因子,同时本方法对其它蛋白质分离的在线检测也具有参考价值。     

信息技术在企业业务流程重组中的功能研究

研究分析了信息技术在企业业务流程重组中作为软件开发工具的实现手段两类主要的应用,并针对产品开发,订单执行和产品销这三类典型的业务流程,对信息技术在重组中的应用进行了探讨。     

离子交换层析技术在多糖分离纯化中的应用

离子交换层析(Ion-exchange chromatography,简写IEC)是发展最早的层析技术之一.目前,离子交换层析已成为蛋白质分离纯化中最常用的手段,统计显示,在蛋白质的纯化方案中,使用到离子交换层析的占75%,其次是使用亲和层析和凝胶过滤层析.但同时离子交换层析在除蛋白质以外物质(如多糖、核酸)的分离纯化中也得到了一定的应用.     

枸杞汁在菌类发酵中的应用

该研究用保加利亚乳杆菌,两歧双歧杆菌进行发酵,总接种量为8% ,接种到枸杞汁中,加生长促进物质3%发酵72h发酵菌数为9.6×10 10 /ml,经实验研究发现,枸杞汁对于保加利亚乳杆菌和两歧双歧杆菌的生长都具有明显的促进作用,这为生产乳酸制剂,特别是双歧杆菌的培养找到了一个新途径。     

气体纯化器在气体检验中的应用

随着我国产业的迅速发展,对于高纯气体的需求也越来越多,品质要求也越来越高,因而对于高纯气体中的杂质检验和控制也就更加严格。本文详细介绍了在高纯气体检测中的应用,该仪器能够对高纯气体中的杂志进行准确测定,提高色谱检验水平。     

重组NADP~+依赖甲酸脱氢酶的表达及纯化

利用甲酸脱氢酶(FDH)催化甲酸脱氢反应是酶促有机合成中重要的还原型烟酰胺辅酶再生系统。实验对E.coli BL21(DE3)/pET32/Bsp-FDH诱导表达NADP+依赖甲酸脱氢酶的表达条件进行了优化,在培养第4h加入0.4 mmol/l的IPTG、诱导时间8h、诱导温度30℃的诱导表达条件下,每升发酵液产甲酸脱氢酶170U。利用亲和层析法一步分离纯化重酶,纯化倍数为9.65、酶活回收达60.43%。实验为重组甲酸脱氢酶应用于有机合成中的NADPH再生奠定基础。     

浅议如何检测食品中的大肠杆菌

新世纪以来,食品安全问题越来越受到人们的重视,食品问题也不断的呈现在大众目前给人们带来了很多担忧。在频频发生的食品安全事故中,大肠杆菌是主要的影响因素之一,是食品污染程度的重要参数指标,如何采用快速、可靠的方法来准确的检测出食品是否被大肠杆菌所污染是至关重要的。本文论述了大肠杆菌的传统检测技术以及最新发明的生物化学检测方法以及各自优劣,以期让大家更加了解大肠杆菌检测在食品检测的重要性和可操作性。     

Apocynaceae系细胞尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶的纯化和表征

经 4步分离纯化的Apocynaceae植物培养细胞尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)的比活为 2 0 4 9U mg ,与细胞粗提液相比 ,活力提高 97倍 ,活力回收率为 2 1 %,可直接用于尿苷二磷酸葡萄糖 (UDPG)的合成 ,并且储存稳定性很好 .UGPase的最适pH值为 7 2 ,UGPase的最适温度为 37℃左右 .Mg2 是UGPase发挥活力所必需的 .高浓度UTP和Glc 6 P均能抑制UGPase的活力     

新课标下高校实施体育俱乐部教学体制的研究

通过对高校体育俱乐部教学体制的研究表明,高校采用俱乐部式教学对学生的兴趣培养,能力提高和习惯的形成有促进作用。对终身体育和高校体育教学改革有重要的意义。     

亲水性单胞菌几丁质酶发酵工艺优化

首次报道从温州浅海海水中筛选得到的一株产几丁质酶的亲水性单胞菌属细菌(Aeromonas hydrophila sp.)。在探索了碳、氮源和环境因子对细菌产酶影响的基础上,利用均匀设计法优化得到了较佳的产酶发酵培养基配方(g/L):胶体几丁质5.0,蛋白胨12.0,尿素2.0,MgSO4 0.5,K2HPO4 0.3,NaCl5.0,初始pH 6.5。在接种量6%,培养温度28℃,180 r/min的较佳工艺下振荡发酵5 d,该菌产酶活力达到1.89 U/mL。     

新课标下体育课教案的设计与编写

传统的体育课教案在形式上过于单一、趋于文案化,缺乏实用性。依据新课标的理念,指出设计体育课教案前,应首先对教学的相关要素进行系统的分析。体育课教案对教学目标的描述应具体而明确,适宜用文本的形式;而表格的运用能够清晰地体现出教学环节中各种因素的关系。     

东亚和南亚马兜铃属的修订

本文通过对东亚和南亚马兜铃属的研究，修改了马兜铃属的分类系统，补充论证了演化趋势；并   在分析该属地理分布的基础上提出马兜铃属分布与分化的第二个中心——中国的横断山区。  本文确   认2亚属、7组、4系、68种和1变种，其中有3新组、2新种及13个新异名。     

试论黑龙江省高校建设滑雪教师团队的必要性与途径

高等院校体育教学团队的建设可以推动学校的专业建设,学科建设及人才培养等方面的工作.本文主要采用文献资料法和专家访问法对黑龙江省高校滑雪课程教学团队建设的必要性和途径进行了分析.旨在为进一步提升我省滑雪体育师资水平和层次提供参考依据.     

发酵法生产辅酶Q10的含量分析及工艺优化

采用分光光度法测定辅酶Q10的含量，并比较其不同工艺条件下的含量，得到了较佳的生产工艺条件，提高了辅酶Q10的得率。     

云南西北部毛茛属一新种——文采毛茛及其核型

描述了云南西北部毛茛属一新种——文采毛茛R．wangianus Q．E．Yang。该种与云南毛茛 Ranunculus yunnanensis Franch．十分相似,但在叶的质地和形状以及染色体数目方面明显不同。与扇叶毛茛R．felixii Lévl．也相似,但后者为四倍体,须根基部肉质肥厚成纺锤形,基生叶通常1枚,叶片肾状圆形至扇形而易于区别。首次报道了云南毛茛、扇叶毛茛和文采毛茛的染色体数目和核型。     

乳糖诱导Pfu DNA聚合酶基因的表达及酶的纯化

利用乳糖诱导重组大肠杆菌BL21(DE3)中Pfu DNA聚合酶基因的表达。对诱导菌株起始生长量、乳糖浓度和诱导持续时间进行了优化,尝试使用JK110弱阳离子交换柱和Sephadex G-75凝胶层析柱来分离纯化Pfu DNA聚合酶,并用PCR扩增实验检测酶活性。结果表明乳糖可以有效诱导Pfu酶的表达,JK110离子交换柱有较好的纯化效果,从500 mL培养液中可以得到3×105U的酶活,比活达22,200 U/mg,结果好于IPTG诱导表达。