基因沉默及其生理学意义

基因沉默包括转录水平上的基因沉默和转录后水平上的基因沉默。发生沉默的基因可以是外源性转移基因，也可以是入侵的病毒或宿主内源性基因。双链RNA(dsRNA)作为启动因素或中间体为不同生物基因沉默所共有。基因沉默是生物体在基因调控水平上的一种自我保护机制。通过基因沉默，可以限制外来核酸的入侵；同时，基因沉默还与生物的生长发育有关。     

基因沉默及其生理学意义

基因沉默包括转录水平上的基因沉默和转录后水平上的基因沉默。发生沉默的基因可以是外源性转移基因,也可以是入侵的病毒或宿主内源性基因。双链RNA(dsRNA)作为启动因素或中间体为不同生物基因沉默所共有。基因沉默是生物体在基因调控水平上的一种自我保护机制。通过基因沉默,可以限制外来核酸的入侵;同时,基因沉默还与生物的生长发育有关。     

植物转基因沉默

转基因沉默分为两种水平:第一种是转录水平上的基因沉默,发生原因主要是位置效应、异染色质化以及甲基化;第二种是转录后水平上的基因沉默,发生原因是通过对靶标RNA进行特异性降解而使基因失活,并就此研究提出RNA阈值模型、异常RAN模型、分子间(内)配对模型与RNA干涉模型来解释这种现象产生的机制。     

解读"基因"相关名词

1基因沉默基因沉默是生物体内特定基因由于种种原因不表达或表达量极低的遗传现象。一般认为基因沉默有三种情况:位置效应的基因沉默、转录水平的基因沉默和转录后水平的基因沉默。RNA干扰(RNA interference,RNA i)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象,它是指当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)时,该mR-NA发生降解而导致基因表达沉默的现象,这种现象发生在转录后水平,又称为转录后基因沉默。题1 2006年诺贝尔生理学奖授予美国科学家安德鲁·法尔和克雷格·梅洛,以表彰他们发现了RNA…     

含内含子的核糖体蛋白基因转录起始位点情况分析

选取69个含内含子的核糖体蛋白基因,抽取其中每个基因转录起始位点附近长度为100个碱基的序列,发现转录起始位点为碱基A的占92.8%,给出由位点状态转移到位点后与位点相邻状态的一步转移概率矩阵P以及由位点前与位点相邻状态转移到位点状态的一步转移概率矩阵.含内含子的核糖体蛋白基因中富含碱基A,T的序列可能有利于基因的转录.     

植物病毒抑制素的研制与应用

植物病毒抑制素主要成分是盐酸四环素、激动素和玉米素等。施用于植物上，不仅具有抑制病毒的作用，而且具有促进植物生长发育的作用，同时发挥药肥双重效能。     

RR基因沉默对WSSV病毒复制的影响

对虾白斑综合症病毒（WSSV）编码与核酸合成代谢相关的核糖核苷酸还原酶（Ribonucleotide Reductases,RR）,与病毒DNA的复制有关．利用克隆技术将RR基因克隆到L4440载体,构建体内合成dsRNA的大肠杆菌HTn5工程菌．诱导该工程菌合成了RR基因的特异双链RNA（RR—dsRNA）和非特异双链RNA（gfP—dsRNA）,分别与WSSV混合共注射凡纳滨对虾,在感染72h后用病毒检测试剂盒提取DNA模板用于荧光定量PCR分析,结果显示RR—dsRNA能有效抑制WSSV病毒粒子的增值．     

mRNA的后转录调控机制

本文综述了近年来发现的mRNA后转录调控机制,包括MicroRNAs在mRNA剪切过程中的阻抑作用,RNA干扰通过形成双链互补RNA而诱导mRNA降解,细胞质中的mRNA降解机制,铁敏感RNA结合蛋白调节mRNA的翻译和降解等几方面的研究成果及展望.     

诺贝尔奖后谈“基因沉默”——RNA干扰技术(RNAi)概述

<正> 2006年诺贝尔奖在瑞典罗琳斯卡研究院落下帷幕,喜获生理学或医学奖的是美国斯坦福大学医学院的安德鲁·法尔(Andrew Fire)和马萨诸塞大学医学院的克雷格·梅洛(Craig Mello)。他们发现了一项全新的基因调控技术——RNA 干扰技术。"的确,这是最漂亮的一类研究。"美国西北大学神经生物学教     

病毒的基因结构

1病毒基因组的组成 病毒基因组可以由DNA组成,也可以由RNA组成,每种病毒颗粒中只含有一种核酸,或为DNA或为RNA,两者一般不共存于同一病毒颗粒中。组成病毒基因组的DNA和RNA可以是单链的,也可以是双链的,可以是闭环分子,也可以是线性分子。如乳头瘤病毒是一种闭环的双链DNA病毒,而腺病毒的基因组则是线性的双链DNA,脊髓灰质炎病毒是一种单链的RNA病毒,而呼肠孤病毒的基因组是双链的RNA分子。     

植物转基因方法及特点和转基因沉默现象

本文概述和比较了植物转基因方法、特点和在转基因中出现的基因沉默现象及其机制     

对虾白斑综合症病毒囊膜蛋白Vp28基因的克隆、表达及蛋白纯化

以对虾白斑病毒DNA为模板扩增出Vp28基因,经限制性内切酶（SmaI,Not I）酶切后按正确的读码框顺序插入到pGEX-4T-2表达载体上,重组质粒转化大肠杆菌,经菌落PCR和质粒双酶切鉴定、序列测定确认,证实成功地构建了Vp28基因原核表达载体．转化菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示有与预期大小约52kD相吻合的融合蛋白带,18℃诱导24h后获得了可溶性表达的目的蛋白,采用Glutathione Sepharose 4B亲和层析对重组蛋白进行纯化,获得了纯度很高的目的蛋白．     

虫媒登革病毒的研究——Ⅰ.Den 2病毒非结构蛋白NS1从感染细胞膜中的分离

应用Con-A亲和层析方法从两株Den2病毒(New Guinea C株和从中国海南省分离的H-87株)感染的C6/36细胞膜中分离的糖蛋白,发现了一种感染细胞中特有的蛋白质。经SDS-PAGE证明该蛋白分子量约46000D,分析其为Den 2病毒的非结构蛋白NS1。并利用Western blot筛选出针对该蛋白4种单克隆抗体。     

蛋白质组学的研究及其发展趋势

蛋白质组学以蛋白质组为研究对象，从整体蛋白质水平上更加深入、更加贴近生命本质的层次上去探索生命活动的规律以及重要的生理和病理等现象。文章对蛋白质组学的研究策略、范畴、主要研究内容和技术、蛋白质组信息学以及蛋白质组学发展趋势进行了介绍。     

基因敲除技术及其应用

基因敲除技术是建立在同源重组技术之上,可对基因组进行定位修饰的实验方法。本文简述了基因敲除技术的基本原理、打靶策略、筛选机制,在动植物和微生物中常用的基因敲除方法以及基因敲除的应用。     

“80后”教师专业精神现状分析及对策探究

教师专业精神是教师在信念上、追求上充分表现出来的风范与活力,具有服务性、专门性、长期性、创新性、自律性等多方面特征,对促进教师专业化发展具有独特的作用和意义。“80后”教师是教师队伍中的新生力量,在“80后”教师专业精神和行为现状遭到社会质疑时,如何加强“80后”青年教师专业精神建设,就成为一个全新而重要的课题。必须采取弘扬传统、恪守底线、榜样导向、因势利导、人文关怀等策略,方能强化“80后”教师的专业责任精神、专业道德精神、专业进取精神、专业创新精神,以及优化专业精神环境,从而加快“80后”教师专业化发展进程。     

鸡源NDV WF00C株F基因的测序与蛋白特性分析

用鸡源新城疫病毒凤阳分离株WF00C对9～10 日龄SPF鸡胚的尿囊腔接种,成功增殖了该病毒,采用一步法RT-PCR技术扩增WF00C病毒的F基因,获得了1条1.7kb的特异性条带.用PCR产物直接测序.测序结果表明,扩增片段大小为1782bp,含有1个1662bp的开放性阅读框,编码554个氨基酸.核苷酸同源性分析表明:WF00C株与国内外其他NDV F基因的同源性为84.8%～97.5%,其中与国内标准强毒株F48E9的同源性为87.1%,说明WF00C与国内外的传统毒株有较大变异.与Taiwan95株和J株的同源性为94.1%和97.5%,说明WF00C与Taiwan95株和J株亲缘关系较近,具有较高的相似性.F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为112Arg-Arg-Gln-Lys -Arg-Phe117, 表明为NDV的强毒株.蛋白疏水性和抗原性分析表明与标准强毒株相比没有太大的变异.     

四羧基铝酞菁与蛋白质结合反应及其在测定蛋白质中的应用

在pH=5．32的Bhtton—Robinson缓冲介质中,四羧基铝酞菁（AlC4Pc）与牛血清白蛋白（BSA）发生结合反应,引起AlC4Pc吸光度降低,降低的吸光度值△A与蛋白质的浓度在一定范围内成正比。基于此,建立了AlC4Pc为光谱探针,分光光度法测定蛋白质含量的新方法。该方法灵敏度较高,线性关系好,BSA的含量在3．7～32．5μg.mL^-1范围内与体系的吸光度降低值呈现良好的线性关系;表观摩尔吸收系数ε691=4．55×10^5L.mol^-1．cm^-1,检测限为3．0μgmL^-1。方法用于人血清样品中总蛋白的测定,实验结果与考马斯亮蓝G-250法一致。     

鸡新城疫病毒ND-xx08株F基因的克隆及分析

新城疫病毒(NDV)ND-xx08毒株经10 d龄SPF鸡胚增殖后,提取其基因组RNA并反转录成cDNA,用NDV F基因特异性引物,经PCR扩增后获得与F基因预期大小一致的DNA片段。将NDV F基因片段克隆到pMD18-T载体上,并进行EcoR I和Hind III双酶切鉴定和测序鉴定。结果显示,ND-xx08毒株F基因片段的长度为1 662 bp,共编码554个氨基酸,F蛋白的裂解位点为112R-R-Q-K-R-F117,是典型强毒株氨基酸序列结构。将NDV ND-xx08株F基因的47 bp到420 bp序列与新城疫病毒基因型I至基因型Ⅸ毒株的相同序列绘制病毒基因进化树,显示ND-xx08分离株属于基因Ⅶe型。将NDV ND-xx08株F全基因与国内外发表的23株NDV F基因核苷酸序列和氨基酸序列的同源性比较分析,结果表明,其核苷酸序列的同源性在82.7%~97.8%之间,氨基酸同源性在87.5%~97.7%之间。