李多酚氧化酶酶学特性的研究

采用分光光度法,研究了李多酚氧化酶(PPO)的特性,包括不同温度、pH值、底物浓度和抑制剂对PPO活性的影响,以及PPO的热稳定性。结果表明:李PPO的最适酶促反应温度为30℃;最适pH值为5.5;Km为123mmol/L;Vm为0.522■OD/min;90℃热处理2min可钝化PPO的活性;抗坏血酸和亚硫酸钠为强抑制剂,质量分数为189mg/kg的亚硫酸钠和317mg/kg的抗坏血酸能有效抑制PPO的活性。     

稳恒磁场对多酚氧化酶活性影响的研究

多酚氧化酶是一种氧化还原酶,主要与植物色素的生成及其产品的色变有关,有利于水果或作物营养价值的保持．本论文以绿豆嫩叶多酚氧化酶粗提液为研究对象,采用不同条件下的磁感应强度的稳恒磁场处理,研究其对多酚氧化酶活性的影响．实验过程分别选用不同的磁感应强度以及时间处理,结果表明：在测酶活性过程中,酶与底物反映很快,1min时底物已全部反应,吸光度也不再增加．在反应初,对照组吸光度为0．8822．处理条件为1．6T15min时,磁场处理对PPO活性促进作用最明显,吸光度为1．0023．反应初始阶段完成以后,对照组酶活力为0．668U．处理条件为0．8T10min时,磁场处理对PPO活性促进作用最明显,酶活力为0．781U．     

广玉兰花酪氨酸酶的初步研究

为研究广玉兰花酪氨酸酶的活性及影响因素,从广玉兰花中提取酪氨酸酶,以邻苯二酚为底物,在不同温度、pH值、底物浓度下研究酪氨酸酶的活性,并研究了效应物苔黑酚对酪氨酸酶活性的影响。结果表明:广玉兰花酪氨酸酶催化的是单酶单底物的酶促反应;广玉兰花酪氨酸酶的最适温度为35℃,最适p H值为6. 5;以邻苯二酚作底物时的广玉兰花酪氨酸酶的Km=0. 025 mol/L,Vmax=166. 7 U/min;在0. 05～0. 25 mmol/L浓度范围内,苔黑酚对酪氨酸酶有抑制作用,抑制率随抑制物浓度的增大而增大。     

巯基乙醇对黄粉虫NAGase活力的影响

以黄粉虫幼虫为材料,采用0.05 mol/L pH 7.5 Tris-HCl缓冲液抽提、硫酸铵分级分离提取N-乙酰--βD-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC 3.2.1.52),获得比活力1025 u/mg的酶制剂.研究NAGase催化pNP-NAG水解反应的动力学参数,测得米氏常数Km=0.384 mmol/L,探讨巯基乙醇对该酶活力的影响.结果表明,巯基乙醇对该酶活力具有显著的抑制作用,其抑制作用显示可逆过程,研究巯基乙醇对该酶的抑制类型,显示其抑制效应为混合型,KI和KIS分别为1.9%和9.6%.     

固定化扁桃酸消旋酶的制备及其性能

为克服游离扁桃酸消旋酶的稳定性差、不易回收等缺陷,以镍离子螯合的琼脂糖微球为载体,对扁桃酸消旋酶进行固定化实验.由SDS-PAGE电泳显示,镍离子螯合的琼脂糖微球能专一性地从粗酶液中吸附扁桃酸消旋酶.以偶联效率、蛋白结合率、相对活力和活力回收等为指标,考察给酶量的影响,结果显示：当给酶量为12 mg蛋白/g微球时,固定化效果最佳;固定化酶最佳的反应温度为30℃、pH为8.0、底物浓度为80 mM;与游离酶相比,固定化酶对温度和底物的耐受性均有提高;固定化酶操作稳定性好,在循环使用30批次后,残余酶活为首次固定化酶酶活的60%左右.     

胱氨酸与烟草多酚氧化酶作用机理的探讨

通过酶活性测定和紫外-可见光谱研究了胱氨酸对烟草多酚氧化酶（简称PPO）活性的影响．结果表明，胱氨酸对烟草多酚氧化酶有抑制作用，其机制是胱氨酸中的硫醚与烟草多酚氧化酶活性中心的铜离子配位，但底物或产物抑制胱氨酸与多酚氧化酶的结合；胱氨酸还可以与酶促反应产物结合生成无色复合物．胱氨酸抑制烟草PPO的过程可分为两步：首先胱氨酸与烟草PPO结合生成中间产物，中间产物仍具有一定的酶活性；然后中间产物结构进一步发生变化，成为无活性的形式．     

金属离子对黄粉虫NAGase活力的影响

以黄粉虫为材料,以N-乙酰--βD-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC 3.2.1.52)为研究对象.研究各种金属离子对NAGase酶活力的影响.结果表明,正一价碱金属Li 、Na 、K 等对酶活力基本上没有效应;Ca2 、Mg2 、Ba2 等碱土金属离子对酶活力也没有显著影响;而正三价金属离子Al3 和Fe3 、过渡金属离子Zn2 和Cd2 、重金属离子Cu2 、Ag 、Hg2 和Pb2 等对该酶活力均有不同程度的抑制作用.其中,Hg2 的抑制作用最为显著,2.5 mmol/L Hg2 可使酶活力完全丧失.进一步研究了Cu2 的抑制作用动力学,结果显示:Cu2 对酶的抑制作用为非竞争性可逆抑制,抑制常数KI=KIS=5.5 mmol/L.     

金属离子和抑制剂对野桑蚕多酚氧化酶活性的影响

为进一步研究野桑蚕多酚氧化酶的作用机理奠定基础,利用分光光度计检测了金属离子和几种抑制剂对野桑蚕（Bombyx mandarina）多酚氧化酶活性的影响,结果表明：槲皮素和硫脲对该酶的抑制浓度（IC50）分别为0.086 mmol/L和0.092μmol/L,Cu2＋对该酶有强烈的抑制作用,而Zn2＋、Ca2＋和Mg2＋有激活作用.     

二甲亚砜对黄粉虫NAGase活力的影响

研究二甲亚砜(DMSO)对黄粉虫(Tenebrio molitorLinnaeus)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力(NAGase)的影响.结果表明:该酶的剩余活力随着二甲亚砜浓度增大而呈指数下降,导致酶活力丧失50%的二甲亚砜的浓度(抑制半衰期,IC50)为5%,说明二甲亚砜对黄粉虫NA-Gase有明显的失活作用.该酶的失活过程属于可逆过程,抑制机理表现为混合型抑制类型,进一步测定游离酶(E)和底物络合物(ES)与二甲亚砜的结合常数(KI和KIS),分别为6.12%和26.2%,KI相似文献   

维生素类物质对黄粉虫NAGase活力的影响

用Tris-HCl缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀从黄粉虫体内获得N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC3.2.1.52)研究VC、VB1、VB2、VB5、VB6、VB12等对黄粉虫NAGase活力的影响。结果表明:VC、VB1、VB6对NAGase起抑制作用;而VB5、VB2、VB12对NAGase的作用不明显。进一步研究VC和VB6的抑制作用动力学,结果表明:VC和VB6对酶的抑制作用可逆,VC为混合型抑制,VB6为非竞争型抑制。测得VC对酶的抑制常数KI与KIS分别为37.63mmol/L、95.64mmol/L;VB6对酶的抑制常数KI与KIS均为13.75mmol/L。