丙型肝炎病毒不同抗原片段的检测分析

为了改进丙型肝炎病毒酶联免疫试剂的质量,增加检测结果的可靠性,对现在国内常用的酶联免疫试剂所包被的不同片段的抗原进行检测分析。结果显示,以C_2 C_7作为抗原片段包被液时,与其它几种抗原片段作为包被液所检测阳性血清的OD值有显著性差异(P<0.01～0.05),且阳性血清的假阴性率最低(0％);而各不同抗原片段包被液检测阴性血清的假阳性率均为21％,但以C_1、C_2、C_1 C_7为包被液所检测的OD值与其它两组有显著性差异(P<0.01～0.05)。结果提示,进一步改进包被液的抗原片段的质量及各抗原片段的优化组合,是提高HCV酶联免疫试剂质量的一条可行途径。     

两种细胞活性检测实验对羊胎盘免疫调节因子活性的评价

运用两种不同细胞活性检测实验评价羊胎盘免疫调节因子(Goat placenta immune-regulatingfactor,GPIF)活性效果,发现E玫瑰花环实验和5-溴-2’脱氧尿苷掺入酶联免疫吸附实验—BrdU-ELISA均能反映GPIF、阳性药物PHA活性效果,两种评价方法评价结果具有相关性,但传统的E玫瑰花环实验具有灵敏度低、重现性差、影响因素复杂、实验环节多、周期长的缺点,BrdU-ELISA实验则与此相反具有灵敏、易操作、重现性好的特点;实验室研制的GPIF具有增强T细胞活性作用,可能是一种免疫调节剂。鉴于两种实验评价GPIF活性效果的对比分析,推荐对具有细胞免疫调节活性作用的药物活性检测采用BrdU-ELISA法。     

ELISA操作及常见问题分析

ELISA（酶联免疫吸附测定法）检测结果是否准确可靠,除了有优质的试剂,良好的仪器,正确的操作在ELISA检测中是非常重要的一步.标本采集和保存、准确加样、温浴的温度与时间、洗涤液的浓度,均可直接影响到ELISA检测结果的准确性.对本底及假阳性产生原因的正确分析,正确对临界（CUT OFF）值附近的血清处理,对ELISA检测结果能否准确报告具有非常重要的临床意义.     

HBV DNA与HBV-m对比分析

目的：探讨荧光定量PCR检测HBV DNA与HBVm的关系。方法；采用荧光定量PCR法和酶联免疫吸附试验（ELISA）对159份HBVm8种不同阳性模式及67份HBVm全阴模式血清进行HBV DNA检测。结果；HBsAg、HBcAb、HBeAe阳性者HBV DNA阳性率为89．83％；HBsAg、HBcAb、HBeAb阳性者HBV DNA阳性率为28．81％；HBsAb、HBcAb、HBeAb阳性者HBV DNA阳性率为16．66％；HBVm全阴性者HBV DNA阳性率为17．91％。结论：荧光定量PCR法检测HBV DNA是乙型肝炎病毒复制最直接可信的指标．可反映HBV真实感染和复制状态．特别是低复制状态，明显优于ELISA法检测HBVm，具有重要临床意义。     

皖南地区规模场猪伪狂犬病血清学分析

针对近年来严重影响规模猪场的传染性疾病猪伪狂犬病,采集了皖南地区31个不同规模种猪场血清样品1000份,使用酶联免疫吸附试验检测法,进行猪伪狂犬病野毒感染抗体血清学调查。结果：31个种猪场中,21个种猪场gE抗体阳性,阳性率67．74％;检测种猪血清1000份,gE抗体阳性率为23％。皖南地区种猪场均有PR感染情况,其中青阳县PR野毒抗体阳性率最高;150头以下的猪场,抗体阳性率较高。分析结果为皖南地区规模猪场制订PR综合防控措施提供了依据。     

农药速测卡法和气相色谱-质谱联用法分析蔬菜中有机磷农药

使用农药速测卡法和气相色谱-质谱联用法对深圳市布吉农批市场流通的各类蔬菜进行了检测。农药速测卡法定性检测结果显示：抽检蔬菜样品669个，受有机磷农药污染蔬菜样品的污染率为6．3％，农药污染的蔬菜品种以叶菜为主。气相色谱-质谱联用法对定性检测呈阳性反应的样品进行定量分析的结果显示：农药速测卡法显色反应灵敏度与农药种类有关，检测氯氰菊酯、氰戊菊酯时显色反应敏度略低一些，而检测甲胺磷、氧化乐果、灭多危和甲基对硫磷时显色反应灵敏度略高。     

室内质控在血站系统中应用的探讨

酶联免疫吸附实验是血站系统最常用的检测方法,主要用来对献血者进行HBsAg,抗-HCV及抗-HIV的筛检。此方法特异性好,灵敏度高,又由于全部采用试剂盒,故操作简便可行,便于成批使用。但在检测过程中,由于检验人员或试剂质量,仪器的准确性及环境等众多影响检测质量的因素,常造成实验结果的偏差。为了保证血液质量,必须提高检测结果的准确性。因此我站除参加了卫生部临     

梅毒螺旋体抗体诊断试剂的临床应用

目的:同时用评价试剂和参比试剂检测436例血清样本,探讨评价试剂与参比试剂检测结果的符合率.方法:评价试剂采用化学发光法,参比试剂采用双抗原夹心酶联免疫吸附试验;并通过卡方检验来判断两试剂盒间有无显著差异.结果:评价试剂和参比试剂阳性符合率为98.25%,阴性符合率为99.47%.两种试剂通过卡方检验比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:评价试剂与参比试剂的检测结果具有很好的一致性,评价试剂可以用于梅毒感染的辅助诊断.     

山西省大同市男性不育患者弓形虫感染情况调查

目的：探讨男性不育患者弓形虫（TOX）感染的状况及感染后对男性生殖功能的影响。方法：用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测男性不育患者血中弓形虫循环抗原（CAg），IgG及IgM抗体。结果：100例男性不育患者血清中CAg阳性者13例（13％），TOX—IgM阳性者16例（16％）；而100例生殖功能正常的男性血清中CAg阳性者仅为1例（1％），TOX—IgM阳性者3例（3％）；两者间差异非常显著（P〈0．01）。两者TOX-IgG阳性者均为7例（7％）。结论：TOX急性（早期）感染可能会影响男性生育能力，并导致男性不育。因此，男性也应注意避免感染弓形虫，防止导致不育的情况发生。     

急性脑梗死患者血清TNF-α变化

为了研究急性脑梗死患者血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的变化,我们采用病例对照的研究方法,选择急性脑梗死患者为病例组,健康体检者为对照组,用酶联免疫吸附法定量检测血清中TNF-α的含量,现报告如下:1资料与方法1·1一般资料病例组选取2008·1~2008·6月在我院住院急性脑     

酶联免疫吸附反应的技术进展及应用

以常规的酶联免疫吸附法为基础，不断改进，形成了多种酶联免疫吸附法，如模块化ELISA，双位点一步法，捕获法测IgM抗体，生物素、亲和素系统，斑点酶链免疫吸附试验，硝酸纤维素膜微粒ELISA等方法。酶链免疫吸附法在医药，食品加工业，农牧渔业等领域有着广泛的应用：如乙型肝炎，莱姆病，急性心肌梗死的早期诊断，定量检测内毒素，HIV抗体初筛，SARS病毒的快速检测；检测食品中的毒素，残留农药，微生物及其它成分；检测香蕉有关病毒，小麦黄花叶病毒，棉花黄萎病菌毒素，转Bt基因抗虫棉，检测水产品中氯霉素的残留量，猪细小病毒(PPV)血清抗体，禽脑脊髓抗体等。     

东西电子AA7003原子吸收仪氢化物检测器检测铅含量检测方法及仪器可靠性加标对比试验

因为食品中铅含量检测GB／T5009．12—2003中没有氢化物原子吸收检测国家标准，为确保仪器检测的可靠性、数据的准确性，我所对所购仪器进行了加标对比试验，试验表明东西电子A7003氢化物原子吸收仪能够满足标准的要求，并具有操作简单、快速、灵敏度高等优点。     

植物病毒抗血清的制备及IgG纯化与酶标技术研究

以烟草花叶病毒（TMv）为例研究了制备植物病毒抗血清的一般方法．以家兔和小白鼠为免疫动物，运用饱和硫酸接沉淀法制备出高效价的兔和瓦抗TMV血清，并运用先进的ELISA方法测定了抗血清中抗体IgG的效价；用醋酸纤维凝胶电泳技术分析了抗血清中抗体的lgG纯度，应用免疫双扩散法检测了提纯的IgG的生物活性．同时还运用成二醛一步法制出高结合率的IgG与过氧化氢酶（HRP）标记的抗体，形成了一整套制备抗血清、纯化IgG并对IgG进行酶标的技术，为植物病毒检测提供了快速简便的方法．     

TNF-α与中医阴虚证相关性的研究

[目的]探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)与阴虚证的相关性,以验证TNF-α细胞因子在阴虚证的发生发展过程中的重要作用.[方法]采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对39例阴虚证患者血清标本进行TNF-α水平检测,并与正常健康组作对照.[结果]阴虚证患者血清TNF-α水平明显升高,于正常对照组比较有显著性差异(p<0.05).[结论]本文结果表明,血清TNF-α水平升高可能参与阴虚证的发生发展和免疫功能紊乱过程.     

抗土霉素单克隆抗体的制备及其在虾中土霉素残留的检测应用(英文)

研究目的:抗土霉素单克隆抗体的制备和特性分析,并用于间接竞争酶联免疫吸附测定法(icELISA)分析虾样品中土霉素的残留。创新要点:本研究建立分泌抗土霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,筛选出对虾中土霉素残留检测具有较高灵敏度的单克隆抗体2-4F。研究方法:用细胞杂交技术使土霉素-牛血清白蛋白偶联物免疫的BALC/c雌性小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合,建立三株分泌抗土霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2-4F、7-3G和11-11A),并制备它们的单克隆抗体。通过icELISA法分析单克隆抗体对土霉素的半抑制质量浓度(IC50)和交叉反应率,明确其灵敏度和特异性。重要结论:实验结果发现单克隆抗体2-4F具有最高的灵敏度,对土霉素的IC50为7.01 ng/ml,且该单抗特异性强,仅与罗利环素之间有强烈的交叉反应,而与非相关抗生素不发生交叉反应。当利用单克隆抗体2-4F检测虾样品中的土霉素含量时,其批内和批间回收率分别为82%~118%和96%~113%,变异系数分别为3.9%~13.9%和5.5%~14.9%。因此,单克隆抗体2-4F可用于虾产品中土霉素残留分析试剂盒的开发。     

酶联免疫吸附分析方法及其在食品有机污染物检测中的应用

介绍了酶联免疫吸附分析(ELISA)方法及其发展状况,讨论了它在食品有机污染物检测中的应用,如检测食品中毒素、农药残留、兽药残留等成分.     

松材线虫SCAR标记检测方法的建立与应用

对南京林业大学开发的松材线虫SCAR．标记检测方法的操作过程进行了规范化。介绍了SCAR标记检测松材线虫所需要的主要仪器、试剂及使用方法、线虫DNA的提取方法、PCR扩增的体系与反应程序等,对检测结果的判读方法进行了规定。规范化的检测方法灵敏度高,特异性强,应用方便。     

实验动物金黄色葡萄球菌PCR检测方法的建立和应用

为了快速检测出实验动物临床样品中的金黄色葡萄球菌（SA），建立了一种普通PCR方法。同时合成3对引物，用金黄色葡萄球菌的阳性核酸DNA做模板，进行引物扩增，筛选出一对能扩增出270 bp单一目的片段的引物。逐一对该引物灵敏度、重复性和特异性进行了测试。实验结果显示，该方法具有高度的特异性，除了识别金黄色葡萄球菌基因组外，对小鼠其他常见病原菌均不发生交叉反应，具有优良的敏感性和稳定性。两个不同操作人员，在两个不同时间段，利用两台不同品牌的PCR仪器，用金黄色葡萄球菌阳性样品进行测试，结果显示此方法再现性良好。用该方法检测待测样本，效果也良好。     

某市孕前妇女ToRCH感染情况分析

目的 :了解某市孕前妇女ToRCH感染情况并指导有计划地妊娠 .方法 :用酶联免疫吸附法(ELISA)检测 1 791例孕前妇女血清中ToRCH_IgM并对结果进行统计分析 .结果 :某市孕前妇女弓形体、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒Ⅱ型的感染率分别为 3 8%、2 0 %、2 3%、2 5 % ,农村感染率高于城市 ,两组差异有显著性 (P <0 0 5) .结论 :某市孕前妇女ToRCH感染率与国内其它地区报道相近 ,孕前ToRCH筛查对指导妊娠、优生优育非常必要     

HBV核酸光敏生物素探针的制备

利用设计合成的特异性引物，通过PCR扩增获得乙肝病毒的S区621个bpDNA片段．该扩增产物经EcoRI与BamHI双酶切后直接克隆进入PSK载体进行表达，再通过扩增重组菌株，以获得大量的S区DNA片段，对它们进行光敏生物素标记，制成探针，对乙肝病毒进行检测灵敏度高，特异性强，其灵敏度可达到4pg水平。