一步法分离纯化限制性核酸内切酶BamHI

本文提出了一个迅速简便纯化BamHI的方法,即一步肝素——琼脂糖亲和层析法。     

λ—DNA的提取与纯化

１前言 λ－ＤＮＡ在基因工程研究中具有极其重要的作用,不仅仅用于构建ｃｏｓ质粒载体、λ噬菌体载体,还更广泛地应用于工具酶的活性检测。λ－ＤＮＡ全长４８５０２ｂｐ,两端各有一个十二核苷酸的５’突出单链（ｃｏｓ位点）。进入宿主细胞后的λ－ＤＮＡ借ｃｏｓ位点完成自身环化,然后以溶菌途径或溶源途径完成其生命活动。λ－ＤＮＡ的全部核着酸序列测定和基因谱分析均已完成。人们已经能够自如地运用λ－ＤＮＡ进行基因工程研究。以λ－ＤＮＡ为基础,许多有价值的载体已构建完成,如Ｃｈａｒｏｎ系列载体、λ１０５９、λ２００…     

噬菌体的遗传物质都是双链DNA吗

在赫尔希（A．Hershey）和蔡斯（M．Chase）所做的证明DNA是遗传物质的经典实验“噬菌体侵染细菌的实验”中，两位科学家所用的噬菌体为大肠杆菌的T2噬菌体，T2噬菌体的遗传物质为双链DNA。由于受该实验的影响，许多老师和学生认为噬菌体的遗传物质都是双链DNA，其实不然。     

一种简便的石斛DNA提取方法

对石斛兰基因组DNA的提取方法进行了改良，提出一种简便、实用的DNA提取方法，经紫外检测、电泳检测及PCR检测，结果表明所得DNA的产量和纯度能够满足分子生物学研究操作的要求．     

水稻线粒体DNA的分离纯化及其脉冲电泳分析

为了水稻线粒体基因文库的构建和细胞质雄性不育分子机制的研究,用简化的方法提纯了水稻线粒体DNA,限制性内切酶酶切图谱显示了清晰的带型。HindⅢ酶切产生37条带,Xho酶切产生30条带,该方法重复性好。同时用新技术——脉冲电泳,测定了水稻线粒体DNA的分了量,并就其作为一种新手段,在植物线粒体DNA的异质性、结构和分子大小等方面的研究所具有的优越性进行了讨论。     

求初等λ-矩阵的行列式的一个简便方法

本文给出一个对初等λ-矩阵不涉及λ的多项式而求其行列式的简便结果。     

原子力显微镜观察DNA与内切酶的相互作用

原子力显微镜是观察DNA与内切酶相互作用比较有效的研究技术。实验中,首先把不同种类的内切酶与DNA在含有钙离子的缓冲液中培育30 min,再通过原子力成像观察其相互作用后的复合物形貌。结果表明,二聚体内切酶EcoRV会结合到λ-DNA的单个识别位点,最终形成珠串状结构,而且对DNA有弯曲作用;另一类型四聚体内切酶BspMI除了可以结合λ-DNA的单个位点外,还可以结合2个识别位点而形成圆环状结构。此结果可以直观地观察到两种内切酶与DNA的作用形态,同时对DNA的弯曲与成环等结构给出直接证据。最后给出两种内切酶与DNA相互作用的模型图。     

三种鸡形目鸟类线粒体DNA的研究

采用１２种限制性内切酶分析了家鸡（Ｇａｌｕｓｇａｌｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ）、雉鸡（Ｐｈａｓｉａｎｕｓｃｏｌｃｈｉｃｕｓ）和普通珍珠鸡（Ｎｕｍｉｄａｍｅｌｅａｇｒｉｓ）线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）。结果：①５个不同品种家鸡ｍｔＤＮＡ具有相同的限制性类型，进一步说明家鸡ｍｔＤＮＡ种内遗传变异程度很低；②雉鸡ｍｔＤＮＡ的ＢｇｌⅠ，ＥｃｏＲⅠ，ＨｉｎｄⅢ和ＰｖｕⅡ等４种限制性酶的酶切类型与云南环颈雉不相同，说明雉鸡存在ｍｔＤＮＡ种内差异；③比较家鸡、雉鸡和珍珠鸡间ｍｔＤＮＡ的ＲＦＬＰ，计算他们之间的遗传距离，家鸡与珍珠鸡的遗传距离较近（Ｐ＝０．０９６），家鸡与雉鸡以及雉鸡与珍珠鸡的遗传距离较远，分别为０．２１５和０．２２９，初步结果表明珍珠鸡是距雉科的家鸡和雉鸡亲缘关系较近的种类，和家鸡的关系相当密切。     

高中生物学教学中涉及的一些重要酶及其作用

1基因工程中的重要酶 1.1限制性核酸内切酶（简称＂限制酶＂）是可以识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA,使DNA链中磷酸二酯键断开的一类内切酶,被誉为＂分子手术刀＂。     

西门塔尔牛的限制酶显带

本文采用限制酶HinI、AluI分别处理西门塔尔牛的中期染色体18小时。AluI产生部分C带和部分G带;Hinf产生G带和部分C带。     

“限制性核酸内切酶”考点直击

限制性核酸内切酶主要是微生物体内的一类酶,能将外来的DNA切断.由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶,又称限制酶,是基因工程的"分子     

高中生物教学中“一”的辨析

高中生物学有许多与一相关的重要概念或结论,很多师生并不能十分科学、准确地理解。通过对几个常见问题的深入探讨,有效拓展学生思维的深度与广度。     

关于“重组 DNA 构建”的分析

本文结合实例,对重组DNA构建过程中如何选择限制酶、重组DNA中限制酶识别位点的变化和重组DNA长度的变化三个问题进行了分析。     

简便快捷提取大蒜总DNA的方法

目的:探讨简便快速而高效的提取大蒜总DNA的方法。方法:采用十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)法、简化CTAB法、改良十二烷基硫酸钠(SDS)法分别以大蒜的根、茎、叶为材料提取细胞总DNA,并进行紫外分光检测和琼脂糖凝胶电泳分析。结果:三种方法的提取率和纯度明显不同:CTAB法>SDS法>简化CTAB法,三种材料组织中以茎的提取效果最佳。结论:采用CTAB法或SDS法从茎中提取大蒜总DNA可获得产率与纯度符合要求的DNA样品。     

三种DNA片段回收纯化方法的比较

本文采用三种方法对苹果褪绿叶斑病毒RT-PCR的特异DNA片段进行了回收纯化。结果表明:用普通琼脂糖替代低融点琼脂糖,回收纯化后产物的浓度及纯度与低融点琼脂糖法基本一致,完全可以用普通琼脂糖替代低融点琼脂糖进行DNA片段的回收纯化,从而降低成本,简化操作.玻璃奶法的回收纯度明显高于低融点琼脂糖法和普通琼脂糖法,且更快速安全.     

水稻叶绿体DNA提取纯化的方法研究

本文以温室培养的水稻菌和水田栽培的秧苗为材料,摸索出一套一般实验条件下简便宜行,可获到高纯度叶绿体ctDNA的方法。     

经济植物DNA提取与纯化的三种方法比较

目的：优化适于普通院校实验室条件下开展经济植物DNA提取与纯化的实验方法。方法：1．标准操作，DNA浓度和纯度都较好，但耗时，设备条件要求高。2．优化简易操作，DNA浓度和纯度虽较不理想，但依然符合实验要求，而且省时，经济、易操作。3．Wizad^TM clean-up system试剂盒方法。DNA浓度纯度较理想，但价格昂贵。结果与讨论：优化简易操作省时、经济、易操作、此方法适用于教学实验和科研课题中对大量材料的处理。     

分子生物学实验中几种提取基因组DNA方法的比较

基因组DNA的提取是分子生物学的常规技术之一,本次实验课采用新的课程设计思路,比较了几种基因组DNA提取的方法,为学生后续的科研工作提供参考。     

基因工程中限制酶切割的几个问题

限制酶全称限制性核酸内切酶,能识别并切割具有特异序列的双链DNA分子,主要从原核细胞中分离纯化而来,迄今为止,已分离出来的限制酶约有4000余种.作为基因工程中非常重要的一种工具,它应用广泛,是历年高考中能力题的命题着力点,但由于书本相关内容介绍简单,而考试命题时常有所拓展,很多师生在解答此类题目时常发生认知冲突,产生很大的困惑,为此,笔者总结了教学过程中的一些问题,供大家参考.     

重组质粒pRSET DNA纯化方法的比较

分别采用柱式小量质粒抽提纯化试剂盒和聚乙二醇沉淀法纯化重组质粒pRSET DNA,琼脂糖凝胶电泳和DU800核酸蛋白分析仪鉴定已纯化的重组质粒pRSET DNA的纯度.结果显示,采用聚乙二醇沉淀法纯化重组质粒pRSET DNA:A260/280=1.83,试剂盒所得结果:A260/280=1.91.与试剂盒相比,聚乙二醇沉淀法获得纯化质粒的纯度没有显著性差异,常规质粒纯化实验中可用此法代替昂贵的试剂盒.