几种参与DNA复制的酶和蛋白因子

1953年Watson和Crick发表的DNA双螺旋模型原则上解决了DNA复制的基本机制.对DNA复制的机制作了合理的解释.但对DNA复制的分子机制的真正阐明是以研究DNA聚合酶开始的.从Kornberg等1956年报导第一个DNA聚合酶以来,人们经过40年的努力,对DNA的复制的认识已大大前进了一步.近年来的研究表明:DNA的复制是一个十分复杂的问题.DNA的复制是在多种酶和蛋白因子的共同作用下进行的.本文就DNA单链结合蛋白、拓扑异构酶、DNA解链酶、引发体、DNA聚合酶δ、端聚酶、DNA连接酶等几类与DNA复制有关的酶和蛋白因子作一概述.     

药用植物虎杖毛状根DNA提取方法研究

采用高盐低pH法、改良SDS法、CTAB法、改良CTAB法提取发根农杆菌ATCC11325感染蓼科多年生药用植物虎(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)叶片产生毛状根的基因组DNA,并进行了电泳分析、含量检测及特异PCR扩增.结果表明:改良CTAB法解决了虎杖富含多酚、多糖等类物质难以提取高质量DNA的问题,提取的DNA质量较好,纯度较高,能满足进一步的实验要求.     

PCR技术在法医生物学中的应用

遗传学认为,DNA是人体性状及遗传变异的物质基础,它是遗传信息的携带者.DNA决定着我们的肤色、性别、身高、健康状况等个体特征.每个人的DNA都是不完全一样的.在法医学上,往往需要鉴别现场留下的物证是否属于犯罪嫌疑人.传统的方法主要是通过指纹、脚印、唇纹、化学物质等物证进行核对,这在一些情况下能起到作用.然而,有时候犯罪分子相当狡猾,或者现场被破坏的很严重,根本找不到上述痕迹.但是在理论上,只要犯罪分子在现场留下血渍、精斑、头发、阴毛、唾液等,通过分析其中的DNA,仍可查获真凶.另外,也可通过分析在现场找到的死者的残留物(如毛发、牙齿、骨骼等)中所含的DNA,来验明他们的真实身份.以前由于这些物证中DNA的含量甚微,再加上无法排除在分析时受到的干扰,DNA分析还或多或少是一种幻想.直到1985年,诺贝尔奖获得者Kary mullis发明了聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR).再加上1988年Saiki对PCR的重大改进,才使DNA分析在法医学领域的应用取得了惊人的突破.所谓PCR,就是通过特定的DNA序列作为引物,在酶的作用下,经过几十次循环,使目的DNA得以快速复制、扩增,从而得到足以进行检测和分析的目的DNA片段.目的DNA(或称模板DNA)就好象是“轮子”,引物好象有汽车的“方向”,酶好象是“(?)力     

基于MSRF的黄海漂浮浒苔与定生浒苔的甲基化差异分析

应用甲基化敏感限制性指纹技术（MSRF）,利用对DNA甲基化敏感与不敏感的限制性内切酶组合产生基因组的酶切多态性差异图谱. 发现漂浮浒苔可能在BstUI位点发生了甲基化增强的现象,推测表观遗传水平上的改变可能推动了漂浮浒苔对黄海自由漂浮生活的快速适应.     

基于DNA条形码技术甜瓜迷实蝇的分子鉴定

以口岸截获的甜瓜迷实蝇蛹和成虫作为研究对象,提取其基因组DNA,检索ITS2、COI、COII、CYTB基因引物,PCR扩增后产物用双脱氧法测序,结合Genebank中的相关数据,借助生物信息学分析软件验证甜瓜迷实蝇分子鉴定序列,构建NJ系统进化树,分析遗传进化关系,以获得更多甜瓜迷实蝇快速鉴定的分子数据.结果表明,从甜瓜迷实蝇蛹和成虫中获得的8条序列,仅有COI基因达到鉴定标准;ITS2、COII、CYT-B基因未达到鉴定标准,并非数据质量不合格,而是NCBI数据库相关数据不足.由于研究扩增模板相同,此类序列为新发掘的甜瓜迷实蝇的序列,从NJ系统进化树聚类分析可以看出,这些序列均可作为甜瓜迷实蝇分子鉴定序列.     

手性氨基酸对DNA链式聚合反应的影响

构成天然蛋白质的氨基酸为L构型,D构型氨基酸虽然不是构成蛋白质的基本结构单元,但许多植物、微生物甚至在人体中都有D-氨基酸的存在.DNA聚合酶链式反应广泛发生在生物体内及PCR实验中,首次探究手性氨基酸及其与金属离子协同条件下对Taq-DNA聚合酶催化下的DNA链式聚合反应的影响情况,为进一步研究手性氨基酸及金属离子对...     

环戊基甲基酮连氮的合成及表征

以环戊基甲基酮和水合肼为原料,合成一种新的酮连氮化合物(环戊基甲基酮连氮,C14N2H24),采用1H NMR、13C NMR和IR表征确认产物的结构,并通过Gaussian 09计算对产物分子构型进行解析,表明(1E,2E)为最稳定构型;同时测定环戊基甲基酮连氮在常压下的基本物理化学性质,包括沸点(Tb,238.4℃...     

跳虫DNA提取方法的比较研究

采用七种方法分别对紫虫兆(Ceratophysella),棘虫兆(Orthonychiurus),刺齿虫兆(Homidia)及鳞长虫兆(Lepidocyrtus)等4属跳虫进行基因组提取,通过PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳,比较跳虫基因组不同提取方法的效果.结果显示:①用SBB法可以有效的提取跳虫的基因组DNA,并且所提取的DNA可以供其线粒体12sRNA基因片段的PCR扩增所用;②使用改良TE法提取跳虫的基因组比原方法效果更好且更节省时间.     

基于线粒体cytb片段探索小麂新亚种——江口亚种（Muntiacus reevesi jiangkouensis subsp．nov．）的分类地位

从保存于贵州师范大学生科院动物标本室的小麂陈旧皮张中提取DNA。利用线粒体DNA细胞色素b通用引物通过PCR扩增,获得小麂江口亚种（Munuacus reevesi Jiangkouensis subsp．nov．）和小麂指名亚种（Muntiacus reevesireevesi）线粒体DNA细胞色素b基因的部分序列,对二者进行序列比对,计算序列差异,并且用最大简约（MP）和贝叶斯（BI）方法构建系统进化树,结果不能确定江口小麂是小麂的新亚种。     

基于ISSR分析的欧洲白桦干叶总DNA提取方法比较

采用五种方法分别提取欧洲白桦干叶总DNA,进行ISSR-PCR反应,结果表明:CTAB法(方案Ⅱ)提取的干叶总DNA是最佳的PCR扩增模板,ISSR-PCR电泳谱带不仅清晰而且重复性好。     

藏獒基因组DNA提取方法的比较研究

分别采用酚一氯仿法和改进的盐析法对藏獒血液基因组DNA进行了比较提取．并以提取的基因组DNA为模板进行了RAPD-PCR扩增．结果表明．酚-氯仿法提取的藏獒血液基因组DNA在浓度和纯度上均显著的高于改进的盐析法（P〈0．05）,但两种方法所提取的藏獒基因组DNA都可用于RAPD分析．     

铑催化的1,6-烯炔环异构化反应研究（英文）

对铑催化的1,6-烯炔环异构化反应进行了研究,这类反应具有较广的底物适应范围,在转化过程中,卤素发生了分子内转移。这类反应提供了一条新的立体选择性合成具有α-氯烯基结构的丁内酯、丁内酰胺、四氢呋喃、吡喃以及五元碳环等分子的方法。发展了两种不同的催化剂体系,即阳离子催化剂体系和中性催化剂体系。阳离子催化剂体系仅能催化顺式烯炔底物的环异构化,相反中性催化剂体系不但能催化顺反烯炔底物的环异构化,而且具有更广的底物适应范围。利用各种烯炔异构体,通过合适的控制实验对反应机理进行了研究。提出了涉及π-烯丙基铑中间体的可能机理,并且利用该机理对一些反应现象进行了解释。最后利用Suzuki偶联反应对产物进行了衍生。     

生物芯片微反应腔系统设计综述

聚合酶链式反应(PCR)在生命科学研究及诸多相关领域已经得到了广泛应用.充分利用等离子体干法刻蚀和各向异性湿法腐蚀的优点,先干法刻蚀,然后进行湿法腐蚀,可以制作出图形准确、底部致密平整、表面光滑、线条较直的PCR生物芯片微反应腔.而通过分析优化加热器材料和温度传感器的形状及尺寸,则可以满足DNA扩增反应对温度均匀性的要求.总体来看,PCR-DNA微阵列杂交集成的生物芯片在某种程度上是信息生物芯片(informalion-bio-chip)和功能生物芯片(function-biochip)的有机集成,但还不够完善,真正意义上的生物微系统应是功能生物芯片与信息生物芯片的进一步组合的产物.     

人血凝块DNA三种提取方法的比较

采用高盐法、硅珠法、改进的经典酚抽提法三种方法提取人血凝块DNA,通过紫外分光光度仪及琼脂糖凝胶电泳测定DNA的纯度和含量.实验结果表明,硅珠法提取时间快,所提取的DNA含量高;经典酚抽提法操作过程简单,但用有机溶剂提取,污染比较严重;高盐法提取要用大量的血凝块,且提取的DNA含量很不稳定.因此,硅珠法是提取人血凝块DNA的一种比较好的方法.     

DNA对纳米CeO2线类氧化酶活性的影响

采用水热法合成纳米CeO₂线,使用透射电子显微镜、X射线衍射仪和拉曼光谱仪对其进行表征。使用傅里叶变换红外光谱仪和紫外可见分光光度计对DNA与纳米CeO₂线的相互作用进行分析,然后采用紫外可见分光光度法研究DNA对纳米CeO₂线类氧化酶活性的影响,并对体系进行pH影响以及特异性实验研究。结果表明,DNA抑制纳米CeO₂线的类氧化酶活性,这种抑制作用具有特异性。此工作将使纳米CeO₂得到进一步的实际应用。     

植物泛素化系统

植物生长发育的许多过程都受到泛素-蛋白酶体途径的调控.泛素-蛋白酶体途径包括两个连续的过程：泛素化系统将底物蛋白泛素化;26s蛋白酶体降解泛素化的靶蛋白.其中泛素化系统对底物的泛素化是通过三种关键酶即泛素活化酶、泛素结合酶和泛素连接酶的连接级联反应完成的.这三类酶通过泛素介导的蛋白质选择性降解参与植物光形态建成、配子体发育、花发育、种子发育、激素的信号转导、抗逆、抗虫等方面的调控.     

一种新的椭球算法

基于更动约束的思想与方法,提出了求解线性规划问题的新椭球算法.它与L.G.Khachian的椭球算法不同,在新算法的椭球迭代过程中,不仅用约束不等式割掉不含约束集的半个椭球 (椭球中心不在约束集内时 ),称之为约束割 ;而且在椭球中心落在约束集内时,它用目标不等式割掉含约束集的半个椭球,称之为目标割.新算法的不等式系统是由原规划 (或对偶规划 )的约束不等式与目标不等式组成的 (规模小 ),而不是由原椭球算法的K K T条件组成的不等式系统 (规模大 ).这种新椭球算法即有多项式计算复杂性的特性,又在迭代过程中得到一系列单调趋向最优解的可行解 (在解存在时 ).如果认为已得满意解,可随时停机.对于实际问题,大多数是变量有界的,初始椭球不大,因此新算法更为实际,有效.     

电子手工焊接工艺及质量控制

在电子组装及科研、返工和返修中,特别是在产品以多品种和小批量为主的场合和家电维修中,手工焊接一直是不可缺少的操作手段。文章结合工程及教学实践分析了手工焊接的相关工艺要素、过程控制要点和手工焊接易产生的缺陷与原因,并提出了减少手工焊接缺陷的方法,有助于提高实际生产中手工焊接的质量和可靠性。