穿膜肽标记的荧光素酶蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化及其活性研究

将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在不同的诱导时机、诱导温度、IPTG的浓度和Mg~(2+)浓度条件下培养大肠杆菌,通过SDS-PAGE和发光强度检测分析TAT-LUC的酶活性强度及表达量;将高活性的TAT-LUC与LUC对比检测ATP,通过发光强度分析TAT-LUC的敏感性和可靠性。表明:在含Mg~(2+)浓度为50mmol/L的LB培养基中将大肠杆菌培养至OD600为0.6时,加入终浓度为0.5mmol/L的IPTG,22℃诱导16h可获得大量高活性的TAT-LUC;相比LUC,TAT-LUC可以检测到小于10nmol/L的ATP,发光强度与ATP含量呈强相关性(R2=0.99);并且不用裂解细胞,TAT-LUC可直接检测至少40个细胞内ATP;穿膜肽标记的荧光素酶蛋白成功用于检测活细胞内的ATP含量。     

游滇纪胜(词2阕)

蝶 恋 花 蝴蝶泉位于大理苍山第一峰云弄峰下丛林中。泉池约50平方米。泉从池底鹅卵石和白沙中涌出。池周围有大理石栏杆。一株高大粗壮之蝴蝶树横跨泉上。每当春末夏初开花季节,周边一带蝴蝶纷纷飞来,汇集枝条之上。连须钩足,组成长串,垂至水面,花蝶相间,难以分辨,蔚为奇观。其时白族     

心理咨询在学校教育中的位置

心理咨询,简明地说是咨询者运用心理学知识帮助来访者解决心理问题的过程,在学校教育中占有重要位置。 心理咨询工作对德育的实施有着积极的促进作用。心理咨询与思想政治工作分属两种体系,在起源、理论基础、目的、任务、内容、方法及人员素质方面都存在区别,但同是做人的工作。因而,心理咨询     

班主任要关紧“后门”

近几年来,家长的校访日渐增多,不需要学校什么通知,家长都会自觉校访,与班主任拉拉关系。 由于受不良社会风气的影响,家长的校访也出现了一些有碍学生健康发展的新问题。开始是送年历、年画,后来发展到请上茶楼酒馆、歌舞娱乐厅,严重的升级到送钱、送重礼。他们的目的主要有:为孩子谋求“一官半职”,要求老师让孩子当班长、班干或团队主要干部;为孩子谋求一个好座位,要求孩子的座位不要在前两排和最后几排;希望老师     

“我一直都暗恋着你……”

"曲浩、凌玮桐……"唱票员认真地唱着票,我和其他同学目不转睛地盯着黑板,期待着本月"读书状元"的产生。忽然检票员递给我一张选票,小声说:"老师你看,这是什么?"我接过字条扫了一眼,"我一直都暗恋着你……"一行字印入我的眼帘,心里不禁咯噔一下。唱票员停止了唱票,全班同学好奇地望着我,我迅速把纸条塞进衣兜,平静地说:"没什么,一张废纸!     

了解说明语言的多样性

王菲芃同学问:“说明文的语言一般比较科学客观,比如我们学过的《中国石拱桥》。而《松鼠》一文却很活泼生动,这与说明文语言的要求矛盾吗?”说明文是以说明为主要表达方式的文章,是对事物作客观说明的一种文体。因此知识性和科学性是说明文的主要特点。但这并不代表说明文就必须“板着面孔”说话。从语言表达方式上它又可以分为平实说明文和生动说明文(俗称“文艺性说明文”)。说明文往往根据说明对象或阅读对象来选择合适的表达方式。《辞海》中对松鼠是这样介绍的:“‘松鼠’亦称‘灰鼠’,哺乳纲,松鼠科。体长20-28厘米。尾蓬松,长16-24厘米。体毛灰色、暗褐色或赤褐色,腹面白色。冬季耳有毛簇,林栖;用树叶、草苔筑巢,或利用鸦、雀的废巢。嗜食松子、胡桃等果实,有时食昆虫和鸟卵……年产1-4窝,每产5-10仔。分布于我国东北至西北,以及欧洲各地。毛皮可制衣,尾毛可制笔。”这其实也是一篇小说明文,它如实地说明了有关松鼠的科学知识,如属类、体长、     

“双元制”试点工作仍需改进

平度市职业中专分校作为全国唯一借鉴德国“双元制”办学模式,实施“双元制”农果专业培训的农职业学校,自1991年开办之初至今,已经取得了令人瞩目的办学效益和社会效益。但是需要指出,由于国情之别,以及国人对“双元制”培训模式还缺乏足够的认识和了解,实施“双元制”农果专业培训还没有充分发挥应有的作用,在诸多问题上仍足以引起我们的深思。①企业对培训的认识不足。“双元制”办学模式的特点之一是经过“双元制”培训的学牛完成学业后,能够直接进人企业顶岗作业,无需经过企业的二：次培训,企业与学校对学生的培训,都有义不…     

新形势下药学博士专业学位研究生培养模式探索

药学博士专业学位的设置,为培养药学高层次应用型人才创设了新平台。通过分析药学博士专业学位研究生教育的内涵与特征,借鉴国外知名大学药学博士生培养经验,从培养目标、培养方式、课程体系、质量保障体系、职业衔接五个方面提出政策建议。希望为进一步构建和完善科学合理、具有实践导向、鼓励学生创新发展、多方协作培养的药学博士研究生培养模式提供借鉴和参考。     

生存还是死亡

当H1N1流感的感染数字还是每天电视新闻的热点时,听到主播提到H1N1这个学名就像听他们播报NBA一样,总是令我有些小兴奋——我总是喜欢听北方人以“嗯”这个汉语音来表达N,然后借此捉弄一下我的一位北方同事的英语发音。不过这并不意味着我有游戏心态,我只是按照一些医生的理论,通过乐观豁达的自我心理暗示来维持自身的免疫能力。我总感觉,H1N1的生存率在九成九以上,