一种小鼠原代肝细胞的分离与培养方法

目的:探索一种高效、稳定的小鼠原代肝细胞分离方法,并延长其体外培养的时间。方法:取成年雄性C57BL/6小鼠,以含双抗的D-Hanks灌流液经肝门静脉充分灌注肝脏,然后以0.2 mg/mL的Ⅳ型胶原酶灌注消化,接着过滤、离心、洗涤,获得小鼠原代肝细胞。通过台盼蓝染色检验小鼠原代肝细胞活率,利用倒置显微镜观察肝细胞的形态变化,糖原染色鉴定细胞纯度,添加ITS-X和HGF细胞因子延长小鼠原代肝细胞的体外培养时间。结果:平均每只成年小鼠肝脏可提取获得原代肝细胞约2×107个,台盼蓝染色显示细胞活率均超过95%,糖原染色结果表明此方法获得的原代肝细胞纯度高于95%,通过添加HGF和ITS-X两种细胞因子能够有效地延长肝细胞形态的体外维持时间。结论:本实验在原有小鼠原代肝细胞两步灌流分离法和培养的基础上,经过优化,成功建立了一种高效、稳定的小鼠原代肝细胞分离和培养方法,为肝脏的体外研究提供了技术保障。     

用变量分离法求解分数阶微分方程

为了更好地描述在受反常扩散和非指数松弛方式控制的复杂系统里的运输动力,提出了扩散和Fokker-Planck类型的分数阶运动方程,而这些分数阶微分方程是从基本的随机行走模型里导出来的.文章将用变量分离法求解这两类分数阶运动方程.     

“分离法”解题记

分离参数法是求参数取值范围的一种常用方法.本文通过"分离法"解2011年高考题时所历经的一喜一惊,反思数学教学中要致力于克服思维定式的消极作用,发挥思维定式的积极作用.     

巧用参数分离法解曲线系过定点问题

平面解析几何中的定值问题是指按照一定条件构成的几何图形或数量关系,当某些元素在一定范围内变化时,与它有关的量保持不变数值的一类问题.在定值问题中,其中一类是判定或证明平面曲线系过定点的问题.解决此类问题的方法很多,限于篇幅,下面只介绍用“参数分离法”解决曲线系过     

不等式成立中求参数取值范围问题的策略选择

求不等式成立中的参数取值范围,方法比较灵活．常常可以采用参数分离的方法,将参数分离到不等式的一侧,而另一侧是一个不含有参数的确定函数,进而将原问题转化为研究该函数的最值问题;亦可以将原不等式的一边化为0,另一边则是带有参数的函数,再对参数进行分类讨论,求出该函数的最值并与0进行比较;还可以尝试用数形结合思想,通过作出函数图象,找到参数的取值范围．前二者方法进行比较,参数分离法实质上研究的只是不含有参数的确定函数最值问题,所以应该是首选的方法,往往受到青睐;一边化0的方法实质上研究的是含有参数的函数最值问题,需要对参数分类讨论,所以应该是备用的方法,通常受到冷落．     

钠离子对人HbA1c柱层析分离纯化的效应

用不同钠离子浓度,以Bio-Rex70树脂为介质,离子交换层析分离提纯了人HbA_(1c)在22℃恒温条件下,用洗脱液Ⅰ(pH6.7,0.02mol/1钠离子浓度,内含0.004mol/1氰化钾),洗脱液Ⅱ(pH6.7,0.07mol/1钠离子浓度,内含0.004mol/1氰化钾)分别洗脱HbA_(1a+b),HbA_(1c).分离效果良好,所得纯品HbA_(1c)在聚丙烯酰胺电泳中只出现一条带.此法具有时间短,操作简便等优点.人HbA_(1c)的分离、提纯,为临床诊断,建立免疫法测定HbA_(1c)打下基础.     

凝胶过滤层析分离纯化纤维素酶的研究

海洋细菌MBl产生的纤维素酶粗酶液，经盐析、透析，分别上葡聚糖凝胶层析柱Sephadex G-100，Sephadex G-75和Sephadex G-50进行分离纯化。以Sephadex G-75分离效果最好，得到一个电泳纯的外切酶组分，该酶的比活力由6．94Umg^-1提高到200．9Umg^-1。提高了28．9倍，总收率8．6％。     

两个不等式的简单证明

本文给出两个著名不等式FanTodd不等式和WJanous不等式的两个更加简捷的新证法,它们是本质的和颇富启发性的. (1) 著名的FanTodd不等式是Fan Todd在研究柯西不等式的逆向结果时建立的一个不等式,可表述如下: 定理1 (FanTodd不等式)设12(,,aaa= ,)naL和12(,,,)nbbbb=L是两个不成比例的实数序列,又设12(,,,)nxxxx=L是使得 10,niiiax== 11niiibx== 成立的任一实数序列,则 221niiAxABC=-, 其中22111,,nnniiiiiiiAaBbCab======邋? 文[1]给出了一个构造性的证明,本文再给出一种更加简捷的证法. 证明 ∵10,niiiax== 11niiibx==, ∴111()1…     

柱层析分离甲基托布津粗品中杂质的研究

利用硅胶柱层析和薄层层析分离甲基托布津合成产物中的微量杂质。柱层析分离杂质的适宜条件：0.5mL的粗品上硅胶（80-100目）的层析柱,流动相为乙酸乙酯∶石油醚（3∶2,V/V）,流速为0.9mL·min-1,并通过高效液相色谱及时测定结果,经过多次富集得到杂质纯品,并由液质联用仪和核磁共振分析杂质结构,得出杂质是因为反应过程中发生副反应（水解或者氧化）,所以应创造无氧的反应条件。     

不等式恒成立问题的解法探究

不等式恒成立问题是高中数学的一类重点问题,在最近几年高考中所占比重越来越大.此类试题综合性较强,题中所涉及的变元较多,涉及的数学领域较广,因而也是学生解题中的难点问题.本文借助不等式恒成立问题的几类常见题型,来探究解决这类问题的基本策略.题型1不等式在R上恒成立例1函数f(x)=ax2槡+ax+1的定义域为R,求实数a的取值范围.解法1(配方法)由题意可知,不等式ax2+