分子生物学实验教学中液相Northern杂交检测microRNA实验探索

为了丰富分子生物学实验教学内容,加深学生对分子杂交原理等专业理论知识的理解,在分子生物学实验教学中开展液相Northern杂交检测microRNA的实验探索。利用荧光标记的寡核苷酸做探针,通过探针灵敏性、杂交温度、杂交时间和杂交液等不同杂交条件的探索,从而简便、准确、灵敏地杂交检测不同植物中的microRNA。整个实验过程仅需几个小时即可完成,且实验结果直观生动。     

两种植物中喜树碱含量的检测和比较

选择乙醇浸提超声波法处理样品,高效液相色谱(HPLC)检测,二极管阵列检测器(DAD),Diamonsil^(TM) C_(18)(4.6×150 mm,5μm)柱,流动相为V_(甲醇):V_水=55:45,流速为0.80 mL·min(TM) C_(18)(4.6×150 mm,5μm)柱,流动相为V_(甲醇):V_水=55:45,流速为0.80 mL·min^(-1),进样量为10μL,柱温为35℃,检测波长为254 nm定量检测.结果表明:马比木中喜树碱的含量高于喜树果,实验结果为药物活性成分提取原料选择提供理论参考.     

相平衡中存在的几个问题

通过多年的物理化学教学，我觉得相平衡部分有几种提法欠妥，现将我的一些粗浅认识提出来，供大家商榷。     

反相高效液相色谱法测定水中荧蒽

介绍用反相高效液相色谱法测定水中荧蒽的方法,采用以硅胶为基底的C18键合相作为固相吸附载体,对水中的荧蒽进行吸附保留,用二氯甲烷洗脱荧蒽,取得了很好的回收效果.采用C8色谱柱,水和甲醇作为流动相,得出H2O∶CH3OH=20∶80时分离效果最佳,其线性回归方程为Area=0.038 182 5Amount-0.333 916,相关系数为0.999 9,相对标准偏差为0.98%～5.70%,加标回收率为96.6%～98.2%,最低检出量为15.84 ng/L.实验证明,该方法简单、快速、准确,而且回收率高,重现性好.     

HPLC法测定大鼠静脉注射色胺酮的血药浓度及其药代动力学研究

目的:建立HPLC法测定静脉注射色胺酮后大鼠血浆中色胺酮的浓度,研究其在体内的药代动力学过程。方法:色谱条件:色谱柱Agilent 5 HC-C18 (250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-水(53∶47,v∶v),流速1mL/min,紫外检测器检测波长251nm,柱温30℃。以4(3H)-喹唑酮为内标物。内标标准曲线法测定生物样品中色胺酮含量,研究其体内药代动力学。结果:色胺酮在0.06～2μg/mL线性关系良好(r=0.999 7);平均回收率大于85%,批内和批间的RSD均小于15%。大鼠静脉注射75 mg/kg的色胺酮后,其体内主要药动学参数t1/2α为0.133h,t1/2β为2.193h,AUC(0-t)为4.288mg/(L·h),MRT为1.934h。结论:试验结果表明本法操作简单,灵敏度高,重现性良好,结果准确可靠,可以用于色胺酮在大鼠体内的药代动力学参数研究。     

固—液相转移催化合成1—氰基环丁烷—1—羧酸乙酯

以ＰＥＧ６００为相转移催化剂，无水碳酸钾为碱，１，２－二氯乙烷为溶剂；氰基乙酸乙酯和１，３－二溴丙烷为反应原料，经缩合反应较高产率的合成１－氰基环丁烷－１－羧酸乙酯，收率达６４％，此方法反应条件温和，原料便宜易得，操作简便安全。     

HPLC法测定AE-活性酯的含量

目的:建立用HPLC法检测AE-活性酯含量的方法.方法:采用Waters公司2695分离单元-2489UV检测器-2996PDA检测器:BDSHYPERSILC184.6min×150mm5μm色谱柱;流动相为2.0g四庚基溴化铵-450ml乙腈-550ml水,用磷酸调节pH至5.0;检测波长为272nm,流速为0.8ml/min.结论:此方法准确度和精密度较好,并且操作简单,分析速度快,可满足AE-活性酯含量的日常分析要求.     

低温固液相图的制作

针对传统实验“二元合金相图”在实验中存在的操作困难,精准度差和环境污染等问题,改用熔点较低的物质制作同液相图,用凝固点降低测定装置系统制作步冷曲线,采用燃烧热实验贝克曼温度测定装置实现了样品冷却过程温度数据的在线采集及步冷曲线的同步显示,改进后实验温度精度由0．2℃精准到0．001℃,实验相对误差由原来约3％降到约1．5％,操作更简便易行,且用药量减少,实验时间短,安全,基本无污染物存在与排放,可以替代原金属相图实验．     

西藏红豆杉不同部位紫杉醇含量的分布研究

以甲醇为提取溶剂，比较了超声和回流两种方法对提取了西藏红豆杉树干皮、树枝皮、叶及种球中的紫杉醇的影响；利用建立的HPLC分析方法，测定了西藏红豆杉不同部位紫杉醇的含量．     

陆英中乌索酸的分离制备及HPLC分析(Ⅲ)

目的：分离制备陆英中的乌索酸，并建立其含量测定方法．方法：采用“醇提凝析法”分离制备乌索酸，HPLC法测定其含量，色谱柱为Symmetry Shield RP18，流动相为甲醇-水(88：12)，流速1ml／min，检测波长220nm，柱温25℃．结果：乌索酸在4．6～23．0μg范围内线性关系良好(r=0．9999)，平均回收率为99．82％(RSD为0．75％)．结论：“醇提凝析法”分离制备乌索酸工艺先进，实用可行；HPLC法测定乌索酸含量准确、可靠，可用于乌索酸含量测定分析。