肺炎克雷伯菌毒力因子的分布特征及其对小鼠的致死性

为分析肺炎克雷伯菌各种毒力因子的致病性,本文用PCR的方法检测高黏性厚荚膜形成相关因子-染色体和质粒介导的c-rmpA和p-rmpA/p-rmpA2,铁载体基因(iucA、iroN、ybtS,enterobactin),III型黏附因子(MrkD)及溶血毒素;用动物实验检测LD50值。结果表明:57株肺炎克雷伯菌临床分离菌株分为高黏性菌(22.81%,13/57)和非黏性菌(77.19%,44/57)。不同于非黏性菌,100%的高黏性菌携带c-rmpA和p-rmpA/p-rmpA2,普遍携带iucA(100%,13/13),iroN(84.61%,11/13)及ybtS(76.92%,10/13)。动物感染实验结果显示,高黏性肺炎克雷伯菌的LD50值中位数值(9.10×105 cfu/mouse)明显低于非黏性菌值(3.24×108 cfu/mouse)。可见携带c-rmpA和p-rmpA/p-rmpA2并伴随携带铁载体基因是高黏性肺炎克雷伯菌共有的特征,其高黏性特性在一定程度上可作为筛选高致病性肺炎克雷伯菌的预测性指标。     

“战疫神兵”伍连德——1910-1911年东北鼠疫扑灭记

1910年冬:震惊中外的东北鼠疫大暴发所谓“鼠疫”,是由鼠疫耶尔森菌感染引起的烈性传染病,属国际检疫传染病,也是中国法定传染病中的甲类传染病。鼠疫为自然疫源性传染病,主要在啮齿类动物间流行,鼠、旱獭等为鼠疫耶尔森菌的自然宿主,鼠蚤为传播媒介。鼠蚤叮咬是主要的传播途径,由此可将动物身上的病原体(鼠疫耶尔森菌)传播给人,形成“啮齿动物→蚤→人”并在人际间相互感染的快速传播网络。临床表现为高热、淋巴结肿大疼痛、咳嗽、咳痰、呼吸困难、出血,以及其他严重毒血症状,且传染性强,病死率高。因染疫身亡者全身皮肤呈黑紫色,故又有“黑死病”之称。     

Native-PAGE染色法用于过氧化氢酶-3酶活性定量分析

通过定量比较过氧化氢酶-3(catalase-3,Cat-3)的酶活性与其蛋白量及mRNA的关系,确定Native-PAGE染色法能够直接反映出Cat-3蛋白含量,进而探究该方法用于定性和定量检测Cat-3活性的准确性。采用同源重组的方法进行cat-3基因敲除;通过大肠杆菌表达重组GST-Cat-3蛋白制备多克隆抗体;通过Western blotting检测、Northern杂交以及Native-PAGE染色法对粗糙脉孢菌Cat-3的酶活性进行定量分析。得到cat-3基因缺失突变体;获得特异性很高的Cat-3蛋白的多克隆抗体,并对H_2O_2胁迫处理和未处理的菌丝体中Cat-3表达量进行分析、比较。与Northern杂交和Western blotting检测相比,NativePAGE染色法能够非常准确地反映出Cat-3蛋白表达量的变化,因而该方法不但能够对粗糙脉孢菌Cat-3的酶活性进行定性分析,还能进行定量分析。     

污泥丝状膨胀及控制对策

本文在分析污泥膨胀的发生机理的前提下,阐述引起污泥膨胀的主要原因：污泥负荷、溶解氧、pH值、温度等;并提出控制污泥膨胀的一些措施：调节反应池中的溶解氧及pH值,投加营养盐合理调配营养比等。     

金龟子绿僵菌MicroRNA在蝉蜕和蚕血淋巴诱导下的差异表达分析

金龟子绿僵菌是一类应用广泛的昆虫病原真菌,在害虫的防治中起着重要作用。研究发现MicroRNA能调控基因表达,继而调控生物体生长发育的各个重要环节。本研究采用特异的茎环RT-qPCR方法,对15个绿僵菌miRNA进行不同诱导条件下的差异表达分析;结果表明,在蝉蜕诱导过程中,15个绿僵菌miRNA的表达水平呈现下降趋势;在血淋巴诱导过程中,15个绿僵菌miRNA的表达量差异存在以下2种情况:即man-miR-2等表达水平显著升高或者man-miR-6等显著下降。这些显著差异表达的miRNA可能在绿僵菌侵染昆虫的过程与定殖于昆虫体内发挥相应重要的作用。     

绿僵菌非核糖体肽合成酶的生物信息学分析

通过生物信息学的方法对绿僵菌非核糖体肽合成酶进行了分析.生物信息学分析表明:其一级结构并不保守;二级结构含有15个α螺旋结构、9个β折叠、多个无规则卷曲;三级结构可能有酰基激活酶、乙酰辅酶A绑定位点和腺苷一磷酸绑定位点结构域.三维建模表示在Swissmodel数据库中具有可靠的模型.理化性质分析表明其是稳定性的蛋白质.     

MPG1基因驱动GFP基因在大丽轮枝菌中表达

为了探讨以MPG1基因作为启动子能否驱动GFP基因在大丽轮枝菌中表达,采用根癌农杆菌介导的真菌遗传转化方法,将含有MPG1-eGFP表达盒的pHMG载体转化入棉花大丽轮枝菌T-9中。经抗生素筛选后转化子约80个/106孢子,荧光显微镜观察转化子菌株孢子和菌丝在荧光显微镜下均发出绿色荧光,基因组DNA-PCR检测、GFP蛋白westernblot检测表明,GFP蛋白在大丽轮枝菌转化子中成功表达。结果表明,MPG1基因作为启动子成功驱动GFP基因在大丽轮枝菌中转录表达。     

扁藻细胞电镜观察的制样技术

以海洋单细胞微藻亚心型扁藻为材料 ,对海水水样中活体单细胞微藻的亚显微结构观察样品的制备技术进行了探索。选用 2 .5 %的戊二醛固定液和 1 %的锇酸固定液对样品进行双固定的技术 ;先酒精后丙酮按浓度梯度顺次进行脱水 ;再用Epon81 2环氧树脂作为包埋剂进行包埋 ;最后经过醋酸铀 -枸橼酸铅双染色后将切片用透射电镜进行亚显微结构的形态观察。采用本方法进行水样中活体样品的电镜制片 ,拍得清晰度较高的电镜照片 ,并通过照片对水样中运动细胞透射电镜样品制备技术进行了分析。     

拮抗细菌产生的活性物质及拮抗机理研究进展

本论文概括了拮抗微生物产生的两大类抗菌物质,对拮抗细菌产生拮抗作用的方式以及作用机理进行了全面概括和总结。     

低温微生物的研究及应用

低温微生物的分布非常广泛，研究应用较多的主要是嗜冷菌和耐冷菌。由于长期的进化，低温微生物在膜脂组成和蛋白质结构等方面形成了独有的结构特点。同时，还可合成冷休克蛋白以适应低温。低温微生物及其代谢产物特别是嗜冷酶已开始在环保、纺织和食品工业等领域得到广泛应用。