微生物生态学中定量分析技术的应用进展

讨论了以PCR技术和荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)技术为基础发展起来的、应用于微生物生态学定量分析研究的一些技术进展.     

生物分子系统学研究中的RAPD技术

RAPD技术在Williams等人于1990年首先提出后,在检测DNA多态性方面受到了广泛的应用.RAPD技术以其简单、快速、信息量大等特点渗透在基因诊断,法医检测,生物药品的检验,生物种群关系的研究各个领域.以核酸为指标构建的生物系统进化树,不受主观因素的影响,避免了经典植物系统学的人为影响因素,因而受到广泛应用,在分子系统研究中出现了RFLP,RAPDDNA和RNA测序等分子生物学技术,其中RAPD技术不需要经过DNA分子克隆、分子杂交等繁锁步骤,也不需用放射性同位素显示,并且多态性检出率高,因而受到普遍关注.     

常用聚合酶链式反应（PCR）技术概述

聚合酶链式反应（PCR）技术在过去20多年中,经过不断改良以及与其他研究手段相结合,如今已发展为有数十种之多研究方法的一套技术手段。本文对较常用的几种PCR技术手段的原理、优点、缺点和应用等作了概述。     

二重PCR快速检测中蜂囊状幼虫病病毒与东方蜜蜂微孢子虫方法的建立

中蜂囊状幼虫病和东方蜜蜂微孢子虫病是中蜂中常见的病害,对中蜂生产造成巨大危害,病原的早期快速检测是病害防控的重要手段。建立1种基于RNA提取的,快速、准确鉴定中蜂囊状幼虫病病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)和东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae,Nc)2种病原的二重PCR检测法。该方法同时检测CSBV和Nc的灵敏度可分别低至6与3个拷贝,且准确可靠;与两病原的单一PCR检测法灵敏度和精度一致,而二重PCR方法更加简便快速,为中蜂囊状幼虫病和东方蜜蜂微孢子虫病的早期快速诊断提供了重要的手段。     

荧光定量PCR对微小RNA的检测及应用

目的:建立一种定量、简单、快速、敏感的微小RNA(miRNA,miR)检测方法,并用其观察一些病理状态下有关miRNA的变化.方法:通过特殊设计的茎环结构的反转录引物,对miRNA进行反转录,然后用相应miRNA的正反向引物对该miRNA进行定量检测,观察重复性和特异性.用此法检测了人巨细胞病毒(HCMV)对滋养细胞(HPT-8)细胞内miR-513表达水平的影响,也检测了结直肠癌组织miR-145水平.结果:用该法扩增miRNA特异性强,结果重复性好,该法检测到HCMV感染对miR-513表达的梯度效应.也发现癌组织和正常组织间miR-145的表达有明显的差异.结论:用荧光定量PCR可以对微小RNA快速有效的检测,在临床工作中可得到很好的应用.     

延边地区圈养黑熊基因DNA中部分微卫星位点的探讨

本研究采用分光光度法及琼脂糖凝胶电泳比较从黑熊组织、血液以及毛发中提取的黑熊基因组DNA,发现提取的DNA浓度及纯度均可满足后续试验的需要。其中毛发DNA提取方法具有高灵敏度、操作简单、非损伤等特点,有助于开展珍稀濒危物种和性情凶猛动物的遗传特性研究。本文还根据文献中黑熊的11个微卫星位点设计并合成引物,进行了不同引物PCR最佳反应条件的筛选。对黑熊DNA基因组PCR扩增结果发现其中10对引物能扩增出较明显的扩增带,为后续的黑熊亲子鉴定及遗传特异性分析实验提供了有价值的资料,为其亲权概率的准确性提供了良好的参考依据。     

蜘蛛主壶腹线cDNA文库构建过程的优化

通过本实验得出采用简易CTAB法提取基因组DNA,利用总RNA试剂盒提取总RNA,提取效率和纯度较为理想。并利用生物软件学方法对老狡蛛丝蛋白基因引物进行了构建,为蜘蛛主壶腹线cDNA文库构建打下了基础。     

天津市肺癌转移与肿瘤微环境重点实验室

天津市肺癌转移与肿瘤微环境重点实验室成立于2007年10月,为天津市重点实验室,面积800平米,拥有精诺真体内可见光成像系统、细胞遗传工作站、实时荧光定量PCR仪、多功能PCR仪、     

细胞内外 别样精彩

作为生物体的基本组成单位——细胞的每一项生命活动都是一个复杂的系统工程。虽然葡萄糖在细胞内外氧化的本质相同,然而其反应的具体过程却大相径庭,胞内的反应远比胞外的氧化复杂得多。其实,在细胞内像葡萄糖氧化这样的例子比比皆是,如细胞内外DNA复制、肽键的形成以及转录的过程在细胞内外反应过程都不同。通过比较同一生命活     

谈病毒性肝炎的病原学进展和预防

在5型病毒性肝炎中,乙型肝炎和丙型肝炎对人体的危害最大。正常人养成良好的卫生习惯,与急性甲型肝炎患者早期隔离,使病人针具、餐具、洗漱具专用,携带者不能为输血对象,男女婚前作常规检查等是预防乙型肝炎和丙型肝炎的主要措施。