乳腺癌中mRNA结合蛋白IMP3表达差异的研究

IMP3（胰岛素生长因子Ⅱ的mRNA的结合蛋白3）是一个新发现的癌胚胎的RNA结合蛋白,研究发现其参与细胞生长和细胞迁移在胚胎发育的早期阶段．该研究利用实时定量逆转录PCR对IMP3在乳腺癌的诊断和治疗中的应用潜力进行了研究和评估．检测了不同类型乳腺癌样本中IMP3的表达情况,定量PCR结果分析中应用2也小。方法进行了归一化比较．研究结果表明,IMP3基因表达与乳腺癌病人肿瘤的大小及淋巴转移存在明显的相关性（P〈0．01）．不同的临床阶段和病理分期与IMP3的表达水平之间也存在一定的相关性,表明差异不显著（P〉0．05）．该研究表明IMP3作为一种新的肿瘤相关因子,其表达水平与乳腺癌也存在一定的相关性,显示了其作为一种潜在的肿瘤标志物的可能性．     

DNA和蛋白质技术

<正>1概述从近几年的高考试题来看,这部分的能力要求都不高。本部分内容的重点是DNA的粗提取与鉴定、PCR技术及原理、血红蛋白的提取和分离以及电泳技术等。在教学中要把每一个经典实验的原理理解到位,把每一个步骤领会清楚。2例题例1将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。     

常压模拟高住低练结合高糖高脂饲料对大鼠心脏组织肾素-血管紧张素系统基因表达(RAS)的影响

目的: 检测高住低练训练方法和高糖高脂饮食对肾素血管紧张素系统(RAS)的基因表达的影响,从而提出治疗新血管疾病的新方法.方法:高住低练和高糖高脂饮食对大鼠心脏RAS基因表达的影响是通过real time PCR实现的,这种方法广泛被人们使用并且已经成为研究基因表达最为有效的方法.结果:我们的结果表明与安静组相比,高住低练和高糖高脂饮食可以显著降低ACE基因表达,其中高住低练组与高糖高脂高住低练组下调最多,血管紧张素原(AGT)的基因表达在低住低练组和高住安静组轻微上调,其他实验组都下调,其中高住低练组与高糖高脂高住低练组下调最多.与此相反的是,以上两种条件可以显著上调血管紧张素II的I型受体(AT1)基因的表达,高住低练组与高糖高脂高住低练组下调最多.结论:表明合理的训练方法(海拔2500 m的高原环境下居住,适宜的训练强度)和高糖高脂饮食可以改善优秀运动员的有氧运动能力.同时高住低练的训练方法可以抑制高糖高脂饲料引起的胰岛素抵抗等症状.     

药用植物雷公藤RAPD-PCR反应体系优化研究

采用单因子梯度试验法对影响雷公藤RAPD—PCIK反应的Mg^2＋浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶的用量及DNA模板浓度进行了筛选。结果表明获得清晰、重复性高的雷公藤RAPD-PCR扩增条件为：20μL PCR反应体积中,2．0mmol&#183;L^-1 MgCl2,0．2mmol&#183;L^-1 dNTPs,0．2μmol&#183;L^-1引物,50ng模板DNA,1UTaq DNA聚合酶。     

由一道高考题梳理基因工程考点“引物”相关知识

基因工程是当前发展最快的一项生物技术,在生物技术中处于核心地位。目的基因是基因工程操作的核心对象,基因工程的第一步是获取与制备目的基因。当前获取目的基因最常用的方式是PCR技术,关键是引物的设计。引物设计原则多,为实现不同目的,引物设计又具有多样性。高考以及各地模拟考试中基因工程是重要的考点,引物是考查的热点,考查变化多样,难度较大。以2023年高考浙江省6月选考生物学试题第19题为例,分析基因工程中“引物”的相关应用。     

“利用PCR技术来扩增目的基因”教学的思考

人教版高中《生物（选修3）现代生物科学技术专题》中“利用PCR技术来扩增目的基因”,是基因工程操作步骤中获取目的基因的常用方法之一。本文结合教学实践谈几点思考。     

实时荧光定量PCR技术的操作实践

采用Mx3000P型实时荧光定量PCR仪,以SYBR(R) Green I法相对定量技术为例,设计1例检测针对HIV-1 vpr基因的特异性siRNA基因沉默效果的实验.介绍了实时荧光定量PCR技术上机前样本的制备过程、检测程序及相关参数的设置方法等操作流程;结合熔解曲线、扩增曲线进行结果分析;强调了实验整体设计、引物设计与PCR反应体系的优化和内参的恰当选择在实时荧光定量PCR技术中的重要性.     

双引物PCR检测抗草甘膦豆粕饲料中的转基因成分

在一个PCR反应体系内,同步扩增大豆内参照基因lec和抗草甘膦大豆外源基因盒中的CaMV35s启动子、nos终止子或cp4 epsps基因,建立转基因大豆双引物PCR检测方法.PCR产物用限制性内切酶酶切进一步鉴定.结果表明,用双引物PCR扩增出标准转基因大豆阳性对照、阿根廷大豆、美国RR大豆及豆粕中的lec基因和相应的特异性外源基因;酶切反应确证PCR产物为特定片段大小的目的序列.建立的双引物PCR法适用于抗草甘膦大豆原料和豆粕饲料中转基因成分的简单化、高精度和高灵敏检测.     

嗜酸乳杆菌培养条件的优化及菌株鉴定

从肠道分离嗜酸乳杆菌,以MRS培养基作为基础培养基,对不同浓度的增殖因子进行筛选,得到了最优的培养基：基础培养基＋5％番茄汁＋0．3％肝浸汁（pH=6．4）。合成嗜酸乳杆菌16S rRNA的特异性引物,并建立了PCR方法从分子水平对其进行鉴定,为嗜酸乳杆菌的深入研究奠定基础。