PCR及电泳实验的单课时解决方案

“多聚酶链式反应扩增DNA片段”在高中生物新课程中占有重要的地位,但是PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳的实验过程通常需要2h～3h才能完成,所以很难满足中学课时紧的要求,从而阻碍了在中学教学中的推广。针对以上问题,北京川布兰生物技术开发有限公司从研制相关试剂盒出发,将PCR扩增（21min）和琼脂糖凝胶电泳（5min-10min）控制在30min之内完成,从根本上解决了实验过程繁琐耗时长的问题。     

3种土壤微生物基因组DNA提取方法的比较

该实验通过SDS高盐法（常规法）、SDS高盐法（改良法）和Soil gDNA Kit法提取土壤微生物基因组DNA,用DNA Nanophotometer仪测定样本DNA的纯度和浓度,以确定最佳提取方法.结果表明,用SDS高盐法（常规法）、SDS高盐法（改良法）和Soil gDNA Kit法和土壤微生物基因组DNA的浓度分别为41.45 ng/μl、96.48 ng/μl和58.40 ng/μl,纯度（OD260/OD280）分别1.45、1.57和1.82.由结果可知,改良法提取DNA的浓度最高,而Soil gDNA Kit法的纯度最高,但其成本较高,因此,SDS高盐法（改良法）是节省成本且适合提取大批量土壤微生物基因组DNA的方法,今后在提取DNA过程中进一步优化,以提高其纯度.     

引物——生物高考命题的新视点

<正>引物是什么?引物是从哪里来的?引物的碱基序列如何确定?引物有哪些特点?关于引物的基础知识,高中生物教材选修3除了"引物"两字外没有其他任何文字叙述,教学参考资料及教辅资料对引物也没有作相关介绍,师生在这方面的认知可谓空白。而近年来各地调研或高考试题常涉及"引物"类问题,如江苏省2008年生物高考第32题首次考查了有关引物方面的知识,2011年江苏省高考第33题则更多地考查了有关引物的知识。"引物"俨然成为高考命题的新材料、新视点,因此对引物知识的全面了解就显得很有必要。     

简单快速的多糖植物双生病毒核酸提取方法

以朱槿曲叶病毒病株为材料,结合总DNA提取的CTAB法和质粒提取的离心柱方法,发展一种简单快速的多糖植物双生病毒基因组核酸的提取方法,用聚合酶链式反应(PCR)和实时定量PCR予以验证。结果显示:与目前的2种常用方法相比,改进的方法在灵敏度、时间、价格和产率上都具有一定的优势,更适合于双生病毒基因组核酸的提取和检测应用。     

基于“情感—交往”型课堂的聚合酶链式反应原理教学设计

基于对“情感—交往”型课堂的关注,以“利用PCR扩增目的基因”内容为例,利用社会热点真实情境激发学生好奇心,引发激情;通过科学史资料分析保持学生在课堂上的积极情感,产生共情;通过任务驱动鼓励并增强积极情感,进行移情。在生物学课堂中搭建“情感—交往”型课堂,有效培养学生对生物学学习的热情。     

优化多重PCR检测Duchenne muscular dystrophy基因外显

目的:介绍一种快速简便地优化多重PCR检测DMD基因外显子缺失的方法及详细步骤.方法:采2ml外周血,用0.2%氯化钠处理收集白细胞,再用基因组DNA提取试剂盒抽提基因组DNA,用优化的多重PCR法直接检测DMD基因外显子的缺失.结果:用该方法检测DMD基因外显子缺失结果准确清晰.结论:用优化的多重PCR技术可以直接检测DMD基因外显子缺失,跟通常使用的9对引物一步法相比,具有经济、快速、简便等特点.     

关于提高实时荧光定量PCR仪使用效率的思考——以南京农业大学植物保护学院为例

本文根据高校实验室实时荧光定量PCR仪的特点和使用现状,针对预约管理、使用培训、操作规则及基本维护方面存在的不足,分析了形成的原因,提出了改进措施,旨在提高效率,更好地服务于高校的科学研究和人才培养。     

稻纵卷叶螟一个DELTA家族谷胱甘肽S-转移酶基因的克隆、序列分析与表达模式

谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferases ,GSTs）在昆虫代谢各种内源和外源性有害化合物的过程中起关键作用。重要水稻害虫稻纵卷叶螟（Cnaphalocrocis medinalis）的GST基因目前尚无研究。本实验克隆了一个稻纵卷叶螟delta家族GST基因的全长cDNA序列,命名为CmGSTd3（Genbank登录号KM433686）。CmGSTd3包含681 bp的开放阅读框,编码一个由226个氨基酸组成的蛋白。CmGSTd3蛋白是一个胞质GST ,与已知的昆虫delta家族GST 具有较高的同源性。在系统进化分析中,CmGSTd3与家蚕的delta家族GST聚在同一进化分支上。实时荧光定量PCR结果显示,CmGSTd3基因在稻纵卷叶螟幼虫阶段表达量最高,且主要表达于幼虫的中肠和脂肪体,由此推测其可能参与了体内异源毒物的代谢。本研究为探索CmGSTd3的生理功能奠定了前期基础。     

应用广泛的PCR技术

什么是PCR技术 1865年,美国第16任总统林肯遇刺身亡,时年才56岁。然而,一些研究人员声称,他即使不遇害,也将寿终正寝了。因为他已经患上了一种叫“马方综合症”的疾病,患此病的人大多数只能活到这个年纪。     

实时荧光定量PCR技术在发育生物学实验

实时荧光定量PCR技术是生命科学研究常用实验技术,发育生物学实验是一门综合性很强的实验课程。为不断完善我院发育生物学实验课程建设,实现培养全面发展人才的教学目标,在本科生发育生物学实验课教学中设计了完整的实时荧光定量PCR实验内容。教学实践结果表明,该实验具有可行性,学生完成情况良好。所设计的实验加深了学生对于基本理论的理解,锻炼了学生的实验技能,激发了学生的学习积极性和创造性,有助于培养学生科学思维以及团队合作精神,获得了良好的教学效果。