蜡状芽孢杆菌毒株的致病机理及检测方法

蜡状芽孢杆菌系无荚膜的革兰氏阳性菌,是最常见的食源性病原菌之一。致病性菌株能产生呕吐毒素和肠毒素,临床上可分为致呕吐型和腹泻型。研究病原性蜡状芽孢杆菌的致病机理,有助于了解其致病途径,从而改进和完善检测方法和诊治途径。通过综述蜡状芽孢杆菌几种毒素的致病机理,整理了一套蜡状芽孢杆菌致病毒株的鉴定检测技术方法:用鉴定平板等传统的鉴定方法将蜡状芽孢杆菌检出,应用先进的PCR和免疫方法检测毒素基因及毒蛋白,通过荧光多重PCR提高灵敏度和准确性等,以期加强食品安全。     

棉花RAPD引物筛选及优质材料的遗传多样性分析

为了对本课题组得到的大批优质棉花种质资源进行RAPD分子标记遗传多样性鉴定,我们进行了对棉花有效的引物对的筛选,并完成了24个优质棉花材料的遗传多样性分析.结果从48个随机引物对中筛选出了20对引物,这些引物对这24个优质棉花材料的有效性非常高,共扩增出113条谱带,平均每个引物扩增出5.65条,而且这20个随机引物对这24个材料的多态性谱带扩增效果非常明显,多态率高,能明显分辨出来源不同的材料.将这些多态性标记通过聚类软件分析,可将这24种材料明显的分为六类群,遗传多态性得到明显的体现.     

实时荧光定量PCR技术在实验教学中的应用

设计了"实时荧光定量PCR分析IPTG诱导EGFP基因在大肠杆菌中的异源表达"实验,研究IPTG诱导浓度和温度对EGFP基因表达的影响。结果表明,IPTG浓度为270μmol/L、诱导温度为16℃、诱导时间为18h的条件下,EGFP mRNA的表达量最大。通过该实验的学习,使学生掌握实时荧光定量PCR的相关实验原理、技术以及实时荧光定量PCR仪的使用,培养学生的科研能力和综合素质。     

广电光纤网与微波网互联系统中PCR抖动的剖析及实例分析

随着广播电视事业的发展,广播电视传输覆盖手段和方式也日趋多样化,且各种方式之间相互渗透、互为补充。本文通过对福建省广电集团传输发射中心101台传输机房与东南网络互联互通中PCR抖动过大实例的分析,详细介绍了PCR在链路传输中的作用,分析了造成PCR抖动过大的原因,并通过实际测试和理论分析解决了实际应用中PCR抖动过大的问题。     

棒状杆菌表达载体的构建

ｐＧＡ４６－４是一个带有谷氨酸棒杆菌妄动功能片断的质粒。用ＰＣＲ技术从ｐｇａ４６－４中扩增该启动子片断，将该启动子Ｔ４噬菌体Ｐ３２基因的终止子克隆到大肠杆菌质粒ｐＫ１８上，再接入棒状杆菌粒ｐＸＺ１０１４２构建一穿梭表达载体。     

男性尿路感染患者阴道加德纳菌DNA检测

目的：了解部分男性尿路感染是否与阴道加德纳菌（GV）有关。方法：用特异性和敏感性都比较高的PCR法检测尿液中GV—DNA。结果：122份尿标本阳性23份，阳性率为18．9％。结论：GV在男性尿路感染中的致病性具有一定意义。     

转基因抗虫棉田杂草中外源基因成分的PCR检测

采用定性PCR的方法,以转基因植物常用的调控序列CaMV35S启动子、NOS终止子及报告基因gus、选择标记基因nptⅡ的序列设计特异引物;以转基因抗虫棉田里的杂草基因组DNA为模板,对棉田杂草进行转基因成分的检测。发现在检测的五种棉田杂草中两种存在转基因成分,初步说明转基因抗虫棉的种植过程中存在转基因逃逸现象。     

蚕微卫星DNA的体外自我扩增条件初步研究

采用一种类似PCR的基因组自我引发PCR(GSP—PCR)法，初步研究了家蚕、野蚕、天蚕、蓖麻蚕和柞蚕的微卫星DNA的体外基因组自我引发PCR扩增的条件。结果发现。浓度为100ng/μl的基因组DNA在100℃变性15min后，与等量的同浓度的未变性的DNA混合作为模板。在80m扩增体系中[含0．2mM dNTPs、50mM KCl、10mM Tris—HCl(pH9．0)、4mM MgCl2、1．25U Tap plymerase]，加入1μl此混合模板，在92℃，1min→55℃，2min→72℃，2min，30→90次循环的扩增条件下，成功地得到了PCR产物。基因组DNA的适宜浓度为1．25ng/μl反应体系；GSP—PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后的部分片段经回收后，在同样条件下，30—60个循环可得到同样大小范围的产物。GSP—PCR产物经6％的变性测序胶电泳，得到典型的梯状带，表明为微卫星DNA。     

SRY基因的分子机制及其在奶牛性别控制中的应用

综述了性别决定的生物学机制和性别决定基因（SRY）的定位、结构、功能、表达特异性及其作用的分子机制,在此基础上阐述了SRY在奶牛精子性别控制与胚胎性别鉴定中的应用,着重介绍了用于胚胎鉴定的PCR扩增法和DNA探针法。